齿瓣石斛多糖含量测定比较

摘要：石斛是中国名贵中药材，多糖是石斛的主要有效成分之一。本文测定了不同产地，种植方式以及不同部位的齿瓣石斛多糖含量，对齿瓣石斛栽培应用有重要意义。

关键词：齿瓣石斛多糖；含量测定；比较

石斛属（Dendrobium）是兰科第二大属，全球约有1500种，主要集中分布在我国华南和西南地区[1]。石斛为我国名贵中药，具有滋阴清热、益胃生津等功效。齿瓣石斛化学成分类型多样，其中糖类也是重要化学成分，广西的加工品一级枫斗含量高达45.89%[2]。本文对不同齿瓣石斛多糖含量进行测定比较。

1仪器和试药

1.1仪器 UV-2450紫外分光光度计（日本岛津）；电子天平；分析天平（FA200413）。

1.2试药 对照品：D-无水葡萄糖（中国食品药品检定研究院，批号：110833-201205）。

1.3试剂 双蒸水：自制；无水乙醇，95%乙醇，苯酚。

1.4药材 见表1。

2实验方法

2.1紫外可见分光光度法测定石斛多糖含量[3]。

2.1.1对照品溶液的配置 取D-无水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每1 ml含94.66ug的溶液，即得。

2.1.2供试品溶液的制备 取石斛鲜品茎约60 g，精密称定，置于九阳豆浆机中，选择五谷模式榨汁，加水定容至1000ml，混匀，离心（转速为4000转/min）20min，上清液稀释8倍，精密量取2ml置10ml塑料离心管中，精密加入无水乙醇10ml，摇匀，冷藏1 h，离心，弃上清，加80%乙醇洗涤2次，每次8ml，离心，弃上清，沉淀用热水溶解，转移至25ml容量瓶中，放冷，加水至刻度，摇匀，即得。

2.1.3标准曲线的绘制 精密量取对照品溶液0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分别置10 mL具塞棕色试管中，加水补至1.0 ml，加5%苯酚溶液（临用时配）1.0 ml，摇匀，迅速加入浓硫酸5.0mL，置沸水浴加热20min，取出，立即置冰水浴中冷却5 min后取出，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法在488nm波长处测定吸光度。以吸光度（A）为纵坐标，进样量（c）为横坐标，制备标准曲线，得回归方程为A=0.0097c+0.0032（r=0.9997，n=7）。结果表明，D-无水葡萄糖的进样量在0～94.66ug范围内与吸光度呈良好的线性关系。

2.1.4样品测定方法 精密量取供试品溶液1 ml，置于10 ml干燥具塞棕色试管中，照"2.1.3"项下方法自"加水至1.0 ml"起依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中所含D-无水葡萄糖的重量（ug），计算，即得，见表2。

2.2结果 对收集到的10批云南不同产地、不同栽培方式、不同采收时间、不同保存方法齿瓣石斛多糖的含量测定，见表2。

多糖含量（%）=C*D*V*f/W

C：样品溶液中葡萄糖浓度（ug/ml）；D：样品溶液的稀释因素；V：样品溶液体积（ml）；f：换算因素；W：样品的重量（g）

3讨论

通过不同采收时间比较，齿瓣石斛存放时间较长时，多糖含量有所降低；不同的保存方式对齿瓣石斛多糖含量影响不大，建议常温通风干燥保存，更方便保存运输；不同的种植方式的齿瓣多糖含量为基质种植>横木种植>活树种植>自然生长。不同种样品中多糖含量均较高，但也有较大的差异，提示各药材的品质有差异，样品生长环境、生长年限、保存方式及种植方式对齿瓣石斛多糖含量有影响。

参考文献：

[1]明兴加，张明，陶文静，等.名贵中药齿瓣石斛的开发前景[J].重庆中草药研究，2006，54（2）：51.

[2]李满飞，徐国钧.中国石斛类多糖的含量测定[J].中草药，1990，10（21）：10-12.

[3]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：附录30、265.编辑/丁一