甘油化时滴速对冰冻解冻去甘油红细胞质量影响

【摘要】 目的 对本站制备冰冻解冻去甘油红细胞方法进行探索， 并对其质量进行分析评价。方法 随机抽取本站红细胞悬液4℃保存9 d以内20u，随机分成甲组10u， 加甘油速度40滴/分和乙组10U加甘油速度120滴/min， 分别进行甘油化， -80℃冰冻及用ACP215全自动血细胞处理仪解冻。甘油化处理， 进行质量检测：甲组游离血红蛋白（0.14±0.05） g/L；乙组游离血红蛋白（1.01±0.02） g/L， 两组差异有统计学意义， （P

【关键词】 冰冻红细胞；冰冻解冻去甘油红细胞；全自动血细胞处理仪

成分输血在我国已经广泛开展， 其中Rh（D）阴性血的用量逐年增加， Rh（D）阴性血比例在我国汉族人群仅占（0.3～0.5%）[1]， 超低温甘油化冰冻保存红细胞作为血站平时贮备， 一旦临床急需可立即进行解冻洗涤， 即极大方便了临床用血， 又保证抢救生命时间， 而甘油化制备冰冻解冻红细胞是长期保存Rh（D）阴性血最理想方法， 作者按加甘油时不同滴速分成甲、乙两组， 检测洗涤后质控指标， 对冰冻解冻去甘油红细胞制备方法进行探索， 并对其质量进行评价。

1 材料与方法

1. 1 试剂与耗材 复方甘油试剂（北京博德桑特）、三珠袋（北京博德桑特）、ACP215红细胞洗涤耗材（美国血技）、9%氯化钠（北京博德桑特）、0.9%氯化钠（山东威高）、输血器（江西洪达）、贺利氏6000I离心机（德国）、三洋-80℃速冻冰箱（MDF-U32V型、日本）、调速多用振荡器（HY-4型、金坛市）、电热恒温水浴箱（HHW21-600型、天津）、无菌接驳机（SC-201型、日本）、钨酸钠（天津化学试剂四厂）、氢氧化钠（天津博迪化工）、乙二醇（天津富宇精细化工）、无水乙醇（沈阳华东试剂厂）、稀释液（希森美康医用电子有限公司）、酚酞（沈阳华东试剂厂）、高碘酸钠（天津福晨化学试剂厂）、血浆游离血红蛋白试剂盒（北京瑞尔达生物科技）、溶血剂（希森美康医用电子有限公司）。

1. 2 取样 用本站检测红细胞悬液4℃保存9 d以内20 U，随机分成甲组10 U， 乙组10 U。

1. 3 冰冻红细胞制备 取9 d内红细胞悬液各20 U， 经2200转， 25 min离心后， 分出上清， 转移至三珠袋， 通过无菌接驳机与输血器相连接， 加入57%复方甘油溶液， 振荡器60次/min， （甲组滴速40滴/min， 加5min后静止5min再继续加入， 仍是40滴/min， 至加甘油完毕；乙组滴速120滴/min， 匀速加完， 不需静止）排尽空气， 室温平衡放置30min， 纸盒装入后放在-80℃保存一个月后待用。

1. 4 冰冻解冻去甘油红细胞制备 保存一个月后， 冰冻红细胞从-80℃冰箱取出立即放入37～42℃恒温水浴箱中溶化， 4～6 min/（袋·U）， 启动ACP215全自动血细胞处理仪， 应用去甘油化程序洗涤， 用9%氯化钠80ml、0.9%生理盐水2000 ml， 解冻洗涤过程大约60 min。

1. 5 质量标准 红细胞回收率≥80%， 白细胞残留率≤1%， 血小板残留率≤1%， 甘油含量

1. 6 统计学方法 计数资料以（x±s）表示， 两组采用t检验， P

2 结果

3 讨论

冰冻解冻去甘油红细胞在制备过程中， 冰冻红细胞制备是质量的前提， 冰冻与解冻洗涤过程操作必须严格按照操作规程进行， 减少红细胞损失[2]。甘油的加入能使红细胞膜受到很大冲击， 渗透压逐步达到平衡很重要， 如果在加入甘油时先40滴/分， 加5 min后静止5 min再继续加入40滴/min， 使红细胞膜渗透压能得到很好的平衡， 甲组以可间歇再加入方式每次为40滴/min， 是本站经过实践检验后确立的操作方法；乙组为设立对照组加入甘油滴速120滴/min， 其余条件相同， 甲组游离血红蛋白（g/L）为0.14±0.05， 乙组游离血红蛋白为（1.02±0.04） g/L， 两组差异具有统计学意义， （P

参考文献

[1] 邱艳.全血成分血质量要求与血液标准化.北京：中国标准出版社， 2002.

[2] 安万新，于卫建.输血技术学.北京：科学技术文献出版社， 2010： 152.