404例羊水细胞染色体核型分析

【摘要】目的:利用妊娠中期羊水细胞染色体核型分析进行产前诊断。方法:对就诊且符合产前诊断指征的404例孕妇行羊膜腔穿刺羊水细胞培养染色体核型分析。结果:发现染色体异常核型19例(包括多态性变异5例),异常检出率为4.7%。其中数目异常8例,占42.1%;结构异常11例,占57.9%;不同产前诊断指征中的检出率不同,以夫妇一方为染色体异常携带者组最高,为39.1%。结论:对染色体病高危孕妇进行羊水细胞培养染色体核型分析,能有效地对胎儿染色体异常进行产前诊断。

【关键词】羊水细胞;染色体; 核型; 产前诊断

404 cases of amniotic fluid cells karyotype analysis

YE Zi-li Liu Li CUI Wei

【Abstract】Objective:The use of second trimester amniotic fluid cell karyotype analysis for prenatal diagnosis. Methods:To come to our hospital for treatment and in accordance with the indications for prenatal diagnosis of 404 cases of pregnant women visit puncture amniotic fluid cell culture karyotype analysis. Results:Karyotype chromosomal abnormalities found in 19 patients (including five cases of variant polymorphism), anomaly detection rate of 4.7 percent. Eight cases in which the number of anomalies, accounting for 42.1 percent; structural abnormalities 11 cases, accounting for 57.9 percent; different indications for prenatal diagnosis in the detection rate is different from one side to the couple for chromosomal abnormalities carriers the highest, at 39.1%.Conclusions:Pairs of chromosomes in amniotic fluid of pregnant women in high-risk disease cells Karyotype analysis, can effectively fetus for prenatal diagnosis of chromosomal abnormalities.

【Key words】Amniotic fluid cells; Chromosome; Karyotype; prenatal diagnosis

【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1006-1959(2009)10-0010-02

产前诊断是预防染色体病患儿出生的主要措施,羊水细胞染色体核型分析是产前诊断胎儿染色体病的主要方法之一,从而避免或减少染色体病患儿的出生,达到降低出生缺陷,提高人口素质,为家庭和社会减轻不必要的负担。我们对404例羊水染色体检查结果进行分析,目的是为今后的遗传咨询及产前诊断工作提供依据。现报道如下:

1 对象与方法

1.1 对象:自1990年以来因符合产前诊断指征在我室成功行羊水细胞培养染色体核型分析的孕妇404例,孕周介于17～31周之间,指征包括夫妇一方为染色体异常携带者、本人或家族有不良生育史、高龄孕妇、孕妇血清筛查高风险、孕妇血清致畸因子感染、B超检查异常、有害物质接触史、孕早期用药史、近亲婚配等,孕妇年龄介于22～42岁之间。

1.2 方法:在超声引导下,行羊膜腔穿刺术抽取羊水20～30ml,离心后,细胞悬液接种于培养基,培养5～7天,观察换液,当有较多克隆细胞时收获,常规方法制备、G显带,镜下分析,每例计数20～30个中期分裂相,分析核型3～5个,对异常核型加倍计数分析。

2 结果

404例羊水细胞培养发现染色体异常核型19例(包括多态性变异5例),异常检出率为4.7%。其中数目异常8例,占42.1%;结构异常11例,占57.9%;常染色体异常16例,占84.2%,性染色体异常3例,占15.8%。19例羊水染色体异常核型分布见表1。

3 讨论

3.1 产前诊断是预防染色体病患儿出生的主要措施:羊水细胞染色体核型分析是产前诊断胎儿染色体病的主要方法之一,不仅可以避免引起智力障碍和身体发育异常的如21三体等染色体病患儿的出生,也可以发现胎儿染色体结构异常是来自亲代遗传或者胎儿发生的突变,为孕妇及其家属决定胎儿的去留提供科学依据。

3.2 不同检查指征异常核型检出率:本室羊水染色体异常核型检出率为4.7%。高于一般出生婴儿自然发生率0.5%[1],与有关文献报道的3.1～6.7%相近,不同报道存在较大差异,究其原因一是病例来源与病例数不同,二是多态性变异是否纳入统计范围。从我室资料分析,夫妇一方为染色体异常携带者是发生染色体异常胎儿的首要原因,检出异常核型9例,占总异常核型的47.4%,检出率为39.1%(9/23),其余依次为B超异常、本人或家族有不良生育史、高、筛查高风险、致畸因子感染。其中三体的检出率为26.3%(5/19),与有关报道相近,一般认为三体综合征的发生是染色体畸变引起的,由于3条染色体载有相同的基因,破坏了遗传物质间的平衡,导致胎儿染色体异常。这说明,羊水染色体检查可以在减少染色体病患儿出生起积极的作用。

3.3 夫妇一方为染色体异常携带者与产前诊断:目前认为染色体异常占出生儿的1/120～1/150[2]。平衡易位是胎儿主要的染色体结构异常,在新生儿中发生率为1‰～2‰[1]。我室以夫妇一方为染色体异常携带者指征中,有6例是夫妇一方为平衡易位携带者,检出异常核型3例,检出率为50%,与有关报道一致,且异常核型与其父母的异常核型完全一致。平衡易位携带者其形成的配子在同正常配子受精时,生育正常后代和平衡易位携带者后代的机率各只有1/18,其余均可能因单体或三体造成遗传物质异常而致胎儿畸形、流产、死胎。在检出的5例多态性变异中,有4例来自亲代,1例inv(9)(p12;q21)为新发生的突变;核型为45,XN,rob(13;15),inv(9)胎儿其母亲是inv(9)携带者,inv(9)遗传效应主要决定于重复或缺失片段的长短及其所含基因的致死效应。其倒位片段越长,重复或缺失的部分越短,配子和合子正常发育的可能性越大,出生畸形儿的可能性越大;相反,其倒位片段越短,则重复或缺失的部分越大,其配子或合子正常发育的可能性越小,故出生畸形儿的可能性越小,但患者临床表现妊娠流产、不孕不育、死产及生育畸形儿的比例越高。rob(13;15),inv(9)胎儿可能是其母亲inv(9)(p11;q13)倒位片段相对较短所致,这说明,对包括多态性变异在内的夫妇一方为染色体异常携带者胎儿及时进行羊水细胞遗传学检查,防止染色体异常胎儿出生是十分必要的。

3.4 B超异常与产前诊断:B超异常是是产前诊断的一个重要指征。自1985年首先报道胎儿颈后透明层厚度改变与唐氏综合征有关,新的超声标记不断被发现,如胎儿鼻骨的缺如、异常导管静脉血流(缺损或逆流)等均可提高筛查检出率。胎儿2个或多个部位发生异常较1个部位发生异常更明显提示胎儿染色体异常,几率由2%上升至21%[3]。在超声检查中,当发现有解剖结构畸形,尤其是发现胎儿非特异性声像图标记者,应建议行胎儿羊水细胞遗传学检查,18、13三体通常具有明显的超声波改变,如唇/腭裂、心脏畸形等多发畸形。本研究检出1例18三体即因为胎儿心脏畸形、灶性回声,2例45,XO是因为胎儿脑积水、股骨头比例短小等生长发育障碍行细胞遗传学检查而检出。所以,产前超声检查对于是否应进行妊娠中期羊水细胞遗传学检查,尽可能把该人群降低到最小的范围是一种非常有效的手段,且因其是一种非创伤性诊断方法,乐于被广大孕妇所接受而越来越显示其优越性。

3.5 本人或家族成员有不良生育史与产前诊断:在本人或家族成员有不良生育史为指征组中检出异常核型2例,检出率为5.6%,均来自其家族成员曾有不良生育史,且孕妇夫妇双方染色体核型均正常,提示我们,本人或家族成员有不良生育史仍然是进行产前诊断的重要指征。

3.6 高龄孕妇与产前诊断:现在已公认染色体数目异常尤其是21三体的发生,与母亲年龄相关。本研究以高为指征组中,发现异常2例,检出率为3.8%,其中1例为21三体,相比其他的检查指征组,高指征检出率并不突出,可能因高龄组孕妇多数只以高龄作为指征,而非高龄孕妇有各种不同的指征。目前,对35岁以上高龄孕妇是先进行孕母血清筛查,还是直接进行羊水穿刺一直存有争议[4]。

3.7 孕血清筛查高风险与产前诊断:孕血清筛查高风险组中检出异常染色体2例,均为21三体,检出率为1.7%,有不少报道认为,唐氏筛查除了可以筛查21三体外,也可以筛出其他数目和结构异常染色体的胎儿,本研究未发现其他染色体数目异常和结构异常,可能与检查例数少有关。

3.8 致畸因子感染与产前诊断:本院开展的致畸因子检查包括巨细胞病毒(CMV)、风疹病毒(RUV)、单纯疱疹病毒(HSV)、弓形虫(TOX)、人类微小病毒-19(B-19)。孕早期TOX感染对胎儿影响较大,造成早期胚胎组织的感染性损害,从而导致自然流产,而直接导致13三体等三体儿的发生未见有报道,本研究检出的1例13三体儿其母亲从事宠物医疗(兽医)多年,年龄33岁孕1产0,其三体儿的产生是否与TOX感染有一定关联,我们认为,其合并致畸因子感染的可能性不可忽视。

3.9 在其他指征组中我们未检出异常染色体,也有报道在这些指征中检出异常染色体者。综上所述,对染色体病高危孕妇进行羊水细胞培养染色体核型分析,能有效地对胎儿染色体异常进行产前诊断。

参考文献

[1] 杜传书,刘祖洞,主编.医学遗传学[M].北京:人民卫生出版社,1992.175-300

[2] 陆国辉,李巍,黄艳仪,等.产前遗传病诊断[M].第一版.广州:广东科技出版社,2002.265-274

[3] Drummond CL,Gomes DM,Senat MV,et al.Fetal karyotyping after 28 weeks of gestation for late ultrasound findings in a low risk population[J].Prenat Diagn,2003,23(13):1068-1072

[4] 商敏,马彦彦.唐氏综合征血清筛查[J].中华围产医学杂志,2003,6(3):190-192

作者单位:519001 广东珠海市妇幼保健院