苦参碱在甘蓝中的残留及安全使用评价

苦参碱是广谱性杀虫剂，具有触杀和胃毒作用，为指导农民安全合理地使用该药，作者于2008年、2009年在江苏、湖南、河北三地进行了0.3%苦参碱水剂在甘蓝上的残留试验。

1.田间试验

1.1 试验设计 试验设5个处理，每个处理3个重复（20m2/重复），另设对照区。

1.2 残留消解动态试验 在甘蓝生长至成熟个体的一半时，以6.75g.a.i/ha（制剂用量150g/亩）剂量手动喷雾施药，按施药后2小时、1天、3天、5天、7天、14天间隔期随机采集样品；在土壤动态小区（30m2），以6.75g.a.i/ha（制剂用量150g/亩）剂量手动喷雾施药，按施药后4小时、8小时、12小时、24小时、36小时、48小时、60小时、72小时间隔随机采样。

1.3 最终残留量试验 在甘蓝生长期以4.5g.a.i/ha（制剂用量100g/亩）及 6.75g.a.i/ha（制剂用量150g/亩）分别施药2～3次，在末次施药后间隔1天、3天、5天，分别采集甘蓝和土壤样品。

1.4对照区 采集甘蓝和甘蓝四周的土壤为对照样品。

2.检测方法

2.1检测提要 样品中残留的苦参碱经乙腈提取，过滤盐析后，取上清液，经固相萃取柱净化，液质（LC-MS-MS）测定。

2.2 仪器设备 液相色谱仪；质谱系统；LG-2.4A型高速离心机；CAT X120匀浆机；电子天平。

2.3试剂和溶液 乙腈PLC级；甲醇PLC级；水：二次蒸馏；醋酸氨：分析纯；甲酸：分析纯；无水硫酸镁：分析纯；氯化钠：分析纯；试剂盒（硫酸镁/PSA/GCB＝150mg/50mg/50mg）；标准苦参碱（含量≥98%）。

2.4分析步骤

2.4.1提取 称土壤样品20.0g置于250mL具塞三角瓶中，加入40mL乙腈浸泡过夜，振荡30分钟。经快速定性滤纸滤入盛有6g氯化钠的具塞比色管中，剧烈振荡，静置分层；称取甘蓝样品5.0g置于50mL离心管中，加入3g氯化钠、1g无水硫酸镁、10mL乙腈高速匀浆提取1分钟，5000rpm离心3分钟待用。

2.4.2净化 上述2mL乙腈层倒入装有分散 SPE填料并配有0.22μm滤头的一次性5mL医用注射器中剧烈振摇、过滤，待测。

2.5分析测定

2.5.1标准曲线 称取苦参碱标准品于10ml容量瓶，用基质制成浓度为120μg/L、24μg/L、12μg/L、4.8μg/L的标准曲线工作液，以苦参碱进样浓度（μg/L）为横坐标，对应色谱测定峰面积为纵坐标绘制标准曲线，其线性回归方程：y= 9.913x+76.977，相关系数r=0.9953（图1）。

2.5.2结果计算 样本苦参碱的残留浓度以质量分数表示，单位为mg/kg，按下列公式计算： C =ρV/ m 。式中：C―苦参碱浓度，单位mg/kg；ρ―标准曲线上得到的试样溶液质量浓度，单位mg/L；V―样品溶液定容体积，单位mL；m―样品溶液代表试样的质量，单位g。

2.5.3 苦参碱保留时间 1.23分钟。

2.5.4添加回收率 在未施过苦参碱的对照样品中添加苦参碱的标准溶液，以0.01～0.5 mg/kg和0.01～0.5 mg/kg为添加浓度，进行添加回收试验，然后进行提取、净化与测定，结果见表1。苦参碱在甘蓝、土壤中的平均回收率为82.1～99.1%，变异系数为3.6%～8.0%。

表10.3%苦参碱水剂在甘蓝和土壤中添加回收率试验结果

2.5.5 最低检出浓度 甘蓝0.01mg/kg，土壤0.01mg/kg。

3.试验结果

3.1苦参碱水剂在甘蓝和土壤中的消解动态测定结果 从测定结果可以得出，2008年苦参碱在甘蓝、土壤中的降解半衰期分别为江苏3.25天、18.28小时，湖南3.77天、18.23小时，河北3.82天、19.05小时；2009年苦参碱在甘蓝、土壤中的降解半衰期分别为江苏3.15天、19.23小时，湖南3.46天、21.10小时，河北3.46天、21.88小时。

3.2 苦参碱水剂在甘蓝和土壤中的最终残留测定结果 以4.5g.a.i/ha推荐剂量喷施2～3次，采收间隔期1天、3天、5天时，甘蓝中苦参碱残留量为0.019mg/kg～0.066mg/kg (1天)；

4.结论

目前FAO/WHO、日本及欧盟均未对甘蓝中苦参碱最大残留限量(MRL)作出规定，我国目前也尚未制定甘蓝中苦参碱的MRL标准。参照试验结果，暂推荐0.05 mg/kg为标准制定合理使用准则。试验结果表明，以推荐剂量4.5g.a.i/ha施药2次，采收间隔期为3天时，甘蓝中苦参碱的残留量均低于0.05mg/kg。因此建议在甘蓝中以4.5g.a.i/ha，2次施药，最后一次距采收间隔期不小于3天。