HIF―1α因子标记在卵巢恶性生殖细胞肿瘤组织中的表达及意义

【摘要】 目的：探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）在卵巢恶性生殖细胞肿瘤中的表达及与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学技术检测56例卵巢恶性生殖细胞肿瘤组织和38例正常卵巢组织中HIF-1α的表达因子。结果：HIF-1α在卵巢恶性生殖细胞肿瘤组织中表达率为64.3%，明显高于正常卵巢组织的23.7%，比较差异有统计学意义（ 字2=4.224，P

【关键词】 卵巢恶性生殖细胞肿瘤； HIF-1α； 病理

【Abstract】 Objective：To investigate the expression of hypoxia inducible factor 1α（HIF-1） in ovarian malignant germ cell tumors and its relationship with clinicopathological features.Method：Immunohistochemical technique was used to detect the expression of HIF-1α in 56 cases of ovarian malignant germ cell tumor and 38 cases of normal ovarian tissue.Result：The expression rate of HIF-1α in ovarian malignant germ cell tumor was 64.3%，which was significantly higher than 23.7% of normal ovarian tissue，the difference was statistically significant（ 字2=4.224，P

【Key words】 Malignant ovarian germ cell tumor； Hypoxia inducible factor 1α； Pathology

First-author’s address：The Second Affiliated Hospital of Nanchang University，Nanchang 330006，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.30.031

卵巢恶性生殖细胞肿瘤是一种复杂而高度恶性的肿瘤，发展快，易复发，预后差，死亡率高。缺氧诱导因子-1（HIF-1）是在缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子，由α和β两个亚基组成，对维持肿瘤细胞能量代谢、细胞增殖和血管生成具有很重要的作用，其中HIF-1α是决定HIF-1活性的缺氧调控亚基，可特异性的作用于氧反应通路，活性受氧浓度调节[1-2]。本研究采用免疫组化SP法，测定卵巢恶性生殖细胞肿瘤组织和正常卵巢组织中HIF-1α的表达，旨在探讨卵巢恶性生殖细胞肿瘤的HIF-1α表达及其与临床病理分型及分期之间的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择本院2012年1月-2015年7月手术治疗并经病理证实的卵巢恶性生殖细胞肿瘤患者组织标本56例和正常受试者卵巢组织标本38例，卵巢恶性生殖细胞肿瘤中包括卵巢内胚窦瘤16例，无性细胞瘤20例，未成熟畸胎瘤17例，胚胎癌

3例；患者年龄12～36岁，平均23岁；按照2000年FIGO临床病理分期标准，Ⅰ期20例，Ⅱ期20例，Ⅲ期14例，Ⅳ期2例，Ⅰ、Ⅱ为早期，Ⅲ、Ⅳ期为晚期。正常卵巢组织受试者年龄15～35岁，平均24岁，均来自不孕症腹腔镜探查行卵巢活检手术，病理证实卵巢组织无异常者。两组年龄比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法 免疫组化SP法：石蜡切片脱蜡至水，3%的过氧化氢室温孵育10 min，微波修复，正常山羊血清封闭，滴加一抗（兔抗人缺氧诱导因子-1α单克隆抗体浓缩液），4 ℃过夜，依次滴加生物素标记二抗，辣根酶标记链霉卵白素工作液，DAB显色，复染，酒精脱水，二甲苯透明，封固。用已知阳性片作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 免疫组化结果判定标准 采用Fromovitz阳性细胞半定量分级法。HIF-1α阳性判定标准为肿瘤细胞的胞质或胞核内出现棕黄色颗粒。先根据阳性细胞占肿瘤细胞的百分数计分，≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，≥76%为4分；同时根据阳性细胞染色深浅计分：不着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为

2分，棕褐色为3分。上述两项评分相加，0～1分为阴性（-）；2～3分为弱阳性（+）；4～5分为中度阳性（++）；6～7分为强阳性（+++）[3-4]。

1.4 统计学处理 采用SPSS 10.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料以率（%）表示，比较采用 字2检验，P

2 结果

2.1 卵巢恶性生殖细胞肿瘤组织与正常卵巢组织HIF-1α表达比较 HIF-1α在卵巢恶性生殖细胞肿瘤组织中表达率为64.3%，明显高于正常卵巢组织的23.7%，比较差异有统计学意义（ 字2=4.224，P

2.2 HIF-1α在不同病理类型的卵巢恶性生殖细胞肿瘤中的表达 不同病理类型的卵巢恶性生殖细胞肿瘤中恶性程度高、预后差的卵黄囊瘤、未成熟畸胎瘤及胚胎癌HIF-1α表达高于恶性程度低、预后较好的无性细胞瘤，比较差异有统计学意义（H=27.081，P=0.000），见表2。

2.3 HIF-1α在不同临床分期的卵巢恶性生殖细胞肿瘤中的表达 HIF-1α在晚期（Ⅲ～Ⅳ期）卵巢恶性生殖细胞肿瘤中阳性率为100%，明显高于早期（Ⅰ～Ⅱ期）的50%，比较差异有统计学意义（ 字2=3.176，P=0.001），见表3。

3 讨论

对人类肿瘤标本的免疫组化分析显示，在大多数肿瘤中HIF-1α呈过度表达，Zhong等[5]利用HIF-1α单克隆抗体检测了HIF-1α在多种肿瘤中的表达，发现90%的结肠癌、肺癌及前列腺癌等癌组织中表达升高，而在肿瘤附近正常组织中没有或仅有弱阳性表达；Birner等[6]宫颈癌的研究中也得到类似的结果。本研究显示卵巢恶性生殖细胞肿瘤组织中HIF-1α的阳性表达率明显高于正常卵巢组织（P

综上所述，笔者认为HIF-1α在缺氧环境可促进肿瘤发生与发展，维持肿瘤生长，故可作为临床监控卵巢恶性生殖细胞肿瘤发生、发展的一个生物学标志，作为基因治疗的靶点。抑制HIF-1α蛋白的表达及转录活性，有望成为一种新的治疗恶性肿瘤的途径[9-15]。

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（收稿日期：2016-08-08） （本文编辑：李颖）