排铅冲剂驱铅的实验研究

时间:2022-10-03 11:29:39

排铅冲剂驱铅的实验研究

摘要:目的研究排铅冲剂对染铅小鼠的驱铅作用。方法选用50只18~22 g雄性小鼠,随机分为空白对照组、模型对照组和3个实验组。低、中、高剂量组和模型组自由饮用0.1%的三水醋酸铅水溶液;低、中、高剂量组分别灌胃2,4,8 g/kg BW剂量的受试药液,模型对照组和空白对照组灌胃去离子水,连续30 d。采血,取肝、股骨,用石墨炉原子吸收光谱法测定铅含量。结果3个实验组小鼠肝组织铅含量显著低于模型对照组,但各剂量组小鼠血和骨铅含量无明显影响。结论排铅冲剂有排铅作用。

关键词:排铅冲剂;排铅;原子吸收光谱

中图分类号: R995文献标识码: A文章编号:1672-979X(2007)10-0013-03

Experiment Study on Lead-removing Effect of Paiqian Granules

DENG Li-juan1, CHEN Ya-fei1, JIANG Lu2, FAN Hui-hong1

(1. National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products, Beijing 100050, China;

2. China Agricultural University, Beijing 100083, China)

Abstract:Objective To study the lead-removing effect of Paiqian Granules in lead-exposed mice. Methods Fifty male mice weighed from 18g to 22g were randomly divided into five groups of blank control, model control and low, middle, high dose groups. In model control and low, middle, high dose groups, the mice freely drank 0.1% lead acetate trihydrate solution. Then, the mice in low, middle, high dose groups were additionally administered with Paiqian Granules by gavage for 30 days at doses of 2, 4, 8g/kg BW, respectively. The mice in blank control and model control groups were given deionized water for 30 days. At the end of the experiment, samples of whole blood, liver and femur were collected for lead detection by GF-AAS. Results Compared with model control group, the lead content in the liver of mice in low, middle, high dose groups significantly decreased. But, there was no significant difference for the lead content in the blood or femur of mice in all groups. Conclusion Paiqian Granules can promote lead excretion in mice.

Key words:Paiqian Granules; lead-removing; atomic absorption spectrometry(AAS)

排铅冲剂是以绿茶、金钱草、黄芪、木瓜、甘草和乳酸钙为主要原料制成的保健食品,具有促进排铅的作用。为验证本品排铅的功效,对排铅冲剂进行了驱铅实验。

1材料与仪器

1.1受试物

排铅冲剂为黄白黑混合砂状粉末,溶于水,规格6 g /袋,批号20040210,常州市红太阳生物工程有限公司生产。口服推荐量为每人24 g/d,以每人60 kg体重计算,折合0.4 g/kg BW。

1.2动物及饲养

SPF级昆明种小鼠,雄性,体重18~22 g,共50只,由中国药品生物制品检定所实验动物中心提供(动物质量合格证SCXK京2005-0004号)。小鼠在二级实验动物室随机分笼,每笼10只,自由摄食无菌颗粒块料,饮水,饲养观察1周,用于实验。实验动物室温22~24 ℃,相对湿度40%~45%,日光灯照明 12 h。塑料鼠盒体积29 cm×18 cm×2 cm,不锈钢丝顶盖。

1.3 主要试剂和仪器

三水醋酸铅,分析纯(北京红星化工厂);硝酸镁,分析纯(北京双环化学试剂厂);磷酸二氢胺,优级纯(北京益利精细化学品有限公司);硝酸,优级纯(北京化工厂);过氧化氢,分析纯(北京化工厂);铅标准溶液1 000 μg/mL(国家标准物质研究中心);AA-6800原子吸收分光光度计(日本岛津)。

2方法

随机将小鼠分为空白对照组、模型对照组和低、中、高剂量组5个组。每组10只。空白对照组自由饮用去离子水,模型组和实验组均自由饮用含0.1%三水醋酸铅的去离子水溶液。低、中、高剂量组同时以2,4,8 g/kg BW剂量药液灌胃(相当于人体推荐量的5,10,20倍)。实验前称取药液6 g加去离子水15 mL,配成0.4 g/mL,用于高剂量组;称取药液3 g加去离子水15 mL,配成0.2 g/mL,用于中剂量组;称取药液1.5 g加去离子水15 mL,配成0.1g/mL,用于低剂量组。小鼠按0.2 mL/10 g BW体积灌胃,空白对照组和模型组灌胃等体积去离子水,每周根据小鼠体重增长情况增加用量,每天1次,连续30 d。

2.1血铅含量测定

灌胃24 h后,眼眶取血,EDTA抗凝。用本室建立的石墨炉原子吸收光谱法快速测定鼠血铅含量,即以2 mg/mL磷酸二氢胺-1 mg/mL硝酸镁 -0.35%Triton X-100作混合基体改进剂,电热石墨炉原子化系统和氘灯扣背景校正的原子吸收光谱仪测鼠血痕量铅。

2.2骨铅含量测定

灌胃24 h后,断髓处死动物,取股骨,称重,用硝酸和30%过氧化氢湿性硝化。用石墨炉原子吸收光谱法测定鼠股骨铅含量[1],即以2.25 mg/mL磷酸二氢胺-1.125 mg/mL硝酸镁作混合基体改进剂,电热石墨炉程序升温和氘灯扣背景校正的原子吸收光谱仪测鼠股骨铅含量。

2.3肝铅含量测定

灌胃24 h后,断髓处死动物,取肝脏,称重,用硝酸和30%过氧化氢湿性硝化。用石墨炉原子吸收光谱法测鼠肝铅含量[2],即以2 mg/mL磷酸二氢胺-1 mg/mL硝酸镁作混合基体改进剂,电热石墨炉原子化系统和氘灯扣背景校正的原子吸收光谱仪测鼠肝痕量铅。

2.4统计学处理

数据以均数±标准差(-x±s,)表示,用SPSS10.0统计软件,2组比较用t检验,多组比较用单因素方差分析。

3结果

3.1排铅冲剂对体重变化的影响

实验期内空白对照组小鼠活动自如,进食、粪便、皮毛正常;染铅各组小鼠生长发育正常,无明显中毒症状,无死亡。模型组与同周次空白对照组比,及受试药不同剂量组与同周次模型组比,体重无显著差异(P>0.05),见表1。

3.2排铅冲剂对血铅和组织铅的影响

模型组与空白对照组比较,全血、肝、股骨铅含量显著升高(P

4讨论

实验结果表明,在高铅模型成立的前提下,2,4,8 g/kg BW剂量可显著降低染铅小鼠肝组织铅水平,根据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)标准判定[3],受试药具有促进排铅的作用。

P

对血和生物样本铅的测定,国外已有报道[4,5]。目前铅测定有石墨炉原子吸收光谱法(GF-AAS)、等离子体质谱法(ICP-MS)、X射线荧光法(SRFS)、铅同位素分布法(IDMS)等,这些方法各有优缺点。其中GF-AAS法适合常规分析,但国内相关报道很少。GF-ASS法的关键是找到一种合适的基体改进剂,磷酸二氢铵是铅测定时常用的基体改进剂,能提高铅的灰化温度,降低基体和共存元素的干扰;硝酸镁不仅有利于样品的灰化,而且能增加铅信号稳定性,减少灰化阶段中铅的损失,提高铅回收率,同时还对石墨管有一定的保护作用;Triton X-100的存在可减少基体干燥和灰化时可能的溅射,减少样品损失,同时可使基体较好地解离,有利于样品灰化和原子化。此外,Triton X-100的存在对血铅的测定有增敏作用。本实验采用了新的混合基体改进剂,即用磷酸二氢胺-硝酸镁-Triton X-100基体改进剂和磷酸二氢胺-硝酸镁基体改进剂测定鼠血、肝及股骨铅含量,获得满意的结果。本法进一步完善了《保健食品检验与评价技术规范》中的操作标准,为保健食品促排铅功能的评价提供了科学依据。

参考文献

[1]陈亚飞,邓利娟,范慧红. 石墨炉原子吸收光谱法测定鼠股骨中的铅[J]. 药物分析杂志,2006,26(12):1733-1736.

[2]陈亚飞,邓利娟,范慧红. 石墨炉原子吸收光谱法测定鼠肝脏中的铅[J]. 光谱实验室,2006,23(3):598-601.

[3]中华人民共和国卫生部. 保健食品检验与评价技术规范2003年版[S]. 北京:卫生部卫生法制与监督司,2003:72-73.

[4]Eller P M, Cassinelli M E. Lead by GFASS:METHOD 7105 [M]. NIOSH Manual of Analytical Methods (NMAM), 4th ed. OH: National Institute for Occupational Safety and Health, 1994:1-4.

[5]Zong Y Y, Parsons P, Slavin W, et al. Accurate and precise measurements of lead in bone using electrothermal atomic absorption spectrometry with Zeeman-effect background correction [J]. J Anal At Spectrom, 1996, 11(1): 25-30.

注:“本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。”

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