蒌叶茎中甘油酯和神经酰胺类化合物的研究

摘要: 目的：研究蒌叶茎的化学成分.方法：应用各种色谱技术进行分离纯化，用理化及波谱分析方法鉴定化合物结构.结果：从蒌叶茎70%丙酮提取物中分离得到3个化合物，分别鉴定为:1-O-十六碳酰基甘油酯(1)，1-O-β-D-半乳糖-(61)-α-D-半乳糖-2,3-O-十六烷酸甘油二酯(2)，poke-weed cerebroside(3).结论：3个化合物均为首次从该植物中分离得到.

关键词:蒌叶；胡椒科；甘油酯；神经酰胺

中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1672-8513(2010)02-0097-02

Glycrides and Ceramides from the Stems of Piper betle L.

[KH*2]HUANG Xiangzhong 1, YIN Yan 2, CHENG Chunmei 1, GAO Libin 1, LIU Tiancheng 1, DAI Yun 1

(1.School of Chemistry and Biotechnology,Yunnan University of Nationalities,Kunming 650031, China;2.Yunnan Rainbow Biotech Co. Ltd.,Kunming 650217,China)

Abstract: This research aimed to study the chemical constituents from the stems of Piper betle L. and various chromatographic techniques were used to isolate and purify the constituents. The structures of these compounds were elucidated on the basis of spectral analysis. The research findings are the following: Three compounds were isolated from the 70% acetone extract and their structures were identified as 1-O-hexnoyl-glyceroleterol (1), 1-O-β-D-galactosyl-(61)-α-D-galactosyl-2,3-dihexadecanoylgl- ycerol (2), poke-weed cerebroside (3). Three compounds were isolated from the plant for the first time.

Key words: Piper betle L.；Pepper；glycrides；ceramides

蒌叶(Piper betle L.)又名酱、芦子、槟榔，为胡椒科(Pepper)胡椒属植物，在我国主要分布于云南、广西、海南、台湾等地［1］.该植物具有祛风散寒、行气化痰、消肿止痒之功效.民间用于风寒咳嗽，支气管哮喘、风湿骨痛、胃寒痛、妊娠水肿；外用治皮肤湿疹、脚癣［2］.除曾华武等［3］从蒌叶中分离得到piperol A、methylpiperbetol等4个木脂素，Stohr等［4］用HPLC从蒌叶中定性检测出pellitorine，piperdardine，piperine 3个酰胺类生物碱外，目前未见对国产蒌叶化学成分及药理活性的研究报道.为了进一步了解蒌叶植物的化学成分，获得具有生物活性的天然产物，对该植物的化学成分进行了研究.本课题组之前已经从该植物茎70%丙酮提取物中分离鉴定了9个化合物［5］,目前又从中分离到3个化合物，分别鉴定为:1-O-十六碳酰基甘油酯(1-O-hexanoyl-glycerolesterl)(1)，1-O-β-D-半乳糖-(61)-α-D-半乳糖-2,3-O-十六烷酸甘油二酯(1-O-β-D-galactosyl-(61)-α-D-galactosyl-2,3-dihexa-decanoylglycerol) (2)，poke-weed cerebroside (3).所有化合物均为首次从该植物中分离得到.

1 仪器与材料

Boetius显微熔点测定仪（温度未校正）；Perkin Elmer-343型旋光仪（589 nm钠灯检测）；Nicolet-Impact 400红外光谱仪；Inova 500核磁共振仪；VGZAB-2F质谱仪；Rp-18(25~40 μm)材料是由日本Fuji Silysia公司生产；Rp-18板为德国Merck公司产品；Sephadex LH-20为瑞典Amersham Pharmacia 公司生产；柱层析硅胶（200~300目）和薄层层析硅胶GF254均为青岛海洋化工厂产品.

蒌叶茎于2007年11月采自云南保山，经云南大学生物系马绍宾教授鉴定为Piper betle L..

2 提取分离

干燥蒌叶茎6.5 kg粉碎后用70%丙酮回流提取4次，每次2 h，提取液减压浓缩成浸膏后将其混悬于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯以及正丁醇进行萃取，分别得浸膏36 g，170 g，50 g.石油醚萃取物(36 g)经硅胶柱色谱，以石油醚乙酸乙酯(50∶1~0∶1)梯度洗脱得到6个组分(Fr.A~F).Fr.D(1.8 g)经Sephadex LH-20柱色谱(甲醇)纯化，然后以石油醚丙酮(10∶1)为洗脱剂硅胶柱层析，得到化合物1(103 mg).乙酸乙酯萃取物(56 g)经硅胶柱色谱，用石油醚乙酸乙酯(10∶1~2∶1)和乙酸乙酯甲醇(20∶1~0∶1)梯度洗脱得到10个组分(Fr.1~10).Fr.3(1.1 g)经Sephadex LH-20柱色谱(甲醇)纯化，然后反复经硅胶柱色谱，以氯仿甲醇(20∶1~10∶1)洗脱，分离得到化合物3(9 mg).Fr.7(1.7 g)经多次硅胶柱色谱，纯化得到化合物2(24 mg).

3 结构鉴定

化合物1：白色粉末，m.p.67~69 ℃;FAB-MSm/z:353［M+Na］ +，分子式为C19H38O4.IR(KBr)cm -1:3 433,2 920,2 854,1 733,1 635,1 110,800; 1H NMR(500MHz,CD3C1)δ:4.18(2H,m,H-1),3.93(1H,m,H-2),3.70(1H,dd,J=11.5,3.5Hz,H-3β),3.68(1H,dd,J=11.5,6.0Hz,H-3α),2.92(2H,t,J=10.0Hz,H-2′),1.62(2H,m,H-3′),1.25(24H,m,H-4′~15′),0.87(3H,t,J=8.5Hz,H-16′); 13C NMR(125MHz,CD3C1)δ:65.6(C-1),70.7(C-2),63.8(C-3),174.8(C-1′),34.6(C-2′),25.3(C-3′),29.5-32.3(C-4′~14′),23.1(C-15′),14.5(C-16′).以上数据与文献［6］报道的1-O-十六碳酰基甘油酯一致.故鉴定为1-O-十六碳酰基甘油酯(1-O-hexanoyl-glycerolesterl).

化合物2：浅黄色胶状物.FAB-MSm/z:915［M+Na］ +，分子式为C47H88O15. 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:3.94(1H,m,H-1a),3.75(1H,m,H-1b),5.27(1H,br.s,H-2),4.44(1H,br.d,J=11.5Hz,H-3a),4.23(1H,br.d,J=11.5Hz,H-3b),1.31~2.30(56H,br.m,脂肪链CH2),0.92(6H,t,J=8.5Hz,CH3-16′,16″),4.26(1H,d,J=7.5Hz,H-1″′),4.89(1H,d,J=3.3Hz,H-1″″); 13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ:68.7(C-1),71.7(C-2),63.9(C-3),175.5(C-1′),174.2(C-1″),105.7(C-1″′),72.9(C-2″′),75.0(C-3″′),70.7(C-4″′),75.1(C-5″′),68.2(C-6″′),101.1(C-1″″),70.5(C-2″″),71.5(C-3″″),72.0(C-4″″),72.8(C-5″″),63.2(C-6″″),24.18~35.6(,C-3′~15′,C-3″~15″),14.5(C-16′,C-16″).以上数据与文献［7］报道的1-O-β-D-半乳糖-(61)-α-D-半乳糖-2,3-O-十六烷酸甘油二酯一致.故确定为1-O-β-D-半乳糖-(61)-α-D-半乳糖-2,3-O-十六烷酸甘油二酯(1-O-β-D-galactosyl-(61)-α-D-galactosyl-2,3-O-dihexadecanoyl-glycerol).

化合物3：灰色粉末(MeOH)，m.p.187~189 ℃；FAB-MSm/z:867［M+Na］ +,分子式为C48H93NO10.IR(KBr)cm -1:3 337(OH),3 245,1 645(酰氨基),2 918,2 850,1 623(C=O),1 543(C=C),1 070(C-O),729((CH2)n(n≥5))cm-1; 1H NMR(500MHz,C5D5N)δ:4.68(1H,m,H-1a),4.49(1H,m,H-1b),5.25(1H,m,H-2),4.27(1H,m,H-3),4.15(1H,m,H-4),2.23(2H,m,H-7),5.43(1H,dt,J=14.0,8.0Hz,H-8),5.52(1H,dt,J=14.0,7.5Hz,H-9),2.06(2H,m,H-10),0.84(3H,t,J=7.0Hz,H-18,24′),4.55(1H,m,H-2′),4.93(1H,d,J=7.5Hz,H-1″),3.97(1H,m,H-2″),4.13(2H,m,H-3″),4.13(1H,m,H-4″),3.85(1H,m,H-5″),4.31(1H,m,H-6″a),4.46(1H,m,H-6″b); 13C NMR(125MHz,C5D5N)δ:70.1

[JY，2]

(C-1),50.0(C-2),71.2(C-3),73.7(C-4),37.8(C-5),26.9(C-6),36.8(C-7),129.8(C-8),130.1(C-9),37.2(C-10),14.3(C-18,24′),175.2(C-1′),72.6(C-2′),35.9(C-3′),105.4(C-1″),75.1(C-2″),78.6(C-3″),71.9(C-4″),78.5(C-5″),62.7(C-6″).以上数据与文献［8-9］报道的poke-weed cerebroside一致.故确定为poke-weed cerebroside.

参考文献:

［1］南京中医药大学.中药大辞典:下册［M］.2版.上海：上海科学技术出版社，2006.

［2］全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编：上册［M］.2版.人民卫生出版社，1996.

［3］ZENG H W，JIANG Y Y，CAI D G，et al．Piperbetol, methylpiperbetol, piperol A and Piperol B: A new seris specific PAF receptor antagonists from piper betle［J］.Planta Med，1997，63(4)：296-230.

［4］STOHR J R，XIAO P G，BAUER R．Constituents of Chinese Piper species and their inhibitory activity on prostaglandin and leukotriene biosynthesis in vitro［J］.J Ethnopharmacol，2001，75(2-3)：133- 139．

［5］尹燕，黄相中，王炯，等.蒌叶茎的化学成分研究［J］.中药材，2009，32(6)：887-890．

［6］俎成立，顾谦群，方玉春，等.柄海鞘Styela clava化学成分研究(II)［J］.青岛海洋大学学报，2004，30(2)：255-258.

［7］杨岚，王满元，赵玉英，等.荚果蕨贯众化学成分研究［J］.药学学报，2005，40(3)：252-254．

［8］KANG S S，KIM J S，SON K H，et al．Cyclooxygenase-2 inhibitory cerebroside from Phytolaccae radix［J］．Chem Pharm Bull，2001，49：321-324．

［9］彭芳芝，戴云，黄荣，等.西域旌节花化学成分研究［J］.云南民族大学学报：自然科学版，2003，12（4）：218-219.

收稿日期:2009-11-11.

基金项目:教育部科学技术研究重点项目(209119).

作者简介:黄相中(1974-)，男，博士，副教授.主要研究方向:天然药物化学.

通讯作者:戴云（1957-），女，教授.主要研究方向：天然药物化学.