Bmi—1蛋白在宫颈癌组织中的表达及临床意义

摘要：目的：研究Bmi-1蛋白在宫颈癌组织中的表达，探讨其与宫颈癌临床病理特征的关系。方法：采用免疫组化检测102例宫颈组织中Bmi-1蛋白的表达情况，其中：10例正常宫颈组织，11例CIN I级，19例CIN II级，17例CIN III及原位癌组织，宫颈癌组织45例。通过SPSS13.0对阳性率进行统计分析。结果：Bmi-1蛋白主要表达在细胞核及部分细胞质内，宫颈癌中的Bmi-1蛋白之表达明显高于其他类型宫颈组织。在45例宫颈癌标本中Bmi-1阳性的有34例，约占75.6%；47例CIN I、II、III及原位癌标本中Bmi-1阳性的有14例，约占17.1%；在10例正常宫颈组织中无表达，差异具有统计学意义（P

关键词：Bmi-1 免疫组化 宫颈癌

宫颈癌严重危害我国女性健康，居女性恶性肿瘤死亡第二位，占女性生殖系统恶性肿瘤的首位，中国每年约有13.5万宫颈癌新发病例[1]。国内外最新研究表明，宫颈上皮肿瘤的发生、发展及预后与多种基因的变化密切相关[2-3]。

Bmi-1基因（B-cell-specific moloneyleukemia virus insert site 1， Bmi-1）是白为B细胞特异的莫洛尼白血病毒插入位点1基因， 1991年被荷兰肿瘤研究中心在大鼠淋巴瘤细胞中第一次发现。近年来研究表明，Bmi-1在结肠癌、结肠癌、乳腺癌、肺癌等多种肿瘤中均有较高表达[3-5]。Bmi-1蛋白有氨基端环指结构和中心区H-T-H-T结构域，这两个区域对细胞的转化和肿瘤的形成具有重要作用。前者协同c-myc癌基因肿瘤形成和调控细胞的分化，而后者介导Bmi-1与DNA结合，抑制转录[4]。

目前对Bmi-1蛋白与宫颈癌组织的研究较少，本研究拟通过检测Bmi-1蛋白在宫颈癌组织中的表达，探讨其与宫颈癌的临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1 病理组织 选自2011年6月至2012年7月存入济宁医学院附属医院病理科的石蜡病理标本。采用免疫组化的方法检测82例宫颈组织中Bmi-1蛋白的表达情况，其中：10例正常宫颈组织，11例CIN I级，19例CIN II级，17例CIN III及原位癌组织，25例宫颈癌组织。

1.2 试剂与方法 Bmi-1单克隆抗体购自美国Santa Cruz公司。免疫组织化学SP试剂盒、抗原修复液、二氨基联苯胺（DAB）显色试剂盒均购自大连宝生物工程有限公司。酒精、二甲苯、磷酸盐缓冲液（PBS）、素木精、中性树胶等试剂由济宁医学院附属医院中心实验室提供。免疫组化SP法按试剂盒要求进行操作。常规石蜡切片脱蜡至后，对组织抗原进行相应的微波修复；Bmi-1单克隆抗体工作液浓度为1：100，4℃孵育过夜。用己知染色阳性的宫颈癌组织标本作为阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判断 Bmi-1蛋白阳性表达绝大部分定位于细胞核，核周围出现棕黄色或棕褐色为染色阳性细胞。染色强度以多数阳性细胞呈现的染色特性计分，淡黄色计1分，棕黄色计2分，棕褐色计3分；采用半定量法计算核阳性细胞数占细胞总数的百分比，阳性细胞

1.4 统计学处理 应用SPSS13.0统计软件，进行χ2检验、t检验。检验水准α=0.05。P

2.结果

2.1 Bmi-1蛋白在各宫颈组织中的表达 Bmi-1在正常宫颈组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及原位癌、宫颈癌组织中表达的阳性率见表1。由表1可见，Bmi-1蛋白的阳性率基本呈递增趋势。Bmi-1蛋白在宫颈癌中表达明显高于良性组及正常组（P0.05）。

2.2 Bmi-1蛋白与宫颈癌各临床指标的关系 结果见表2。

3.讨论

宫颈癌的发生发展由多个阶段演变而成，多种原癌基因共同参与的病理过程，目前具体机制仍不是十分清楚。经流行病学调查，可能与以下因素有关：不健康的、人瘤病毒感染、性卫生不良、早育、多产、吸烟或吸毒等诸多因素有关，另外，宿主的癌基因激活、抑癌基因的失活、细胞因子及其受体的异常可能也参与了宫颈癌的形成和发展[5]。宫颈癌早期的诊断和治疗是改善其预后的最有效方法，目前尚没有理想的早期诊断宫颈癌的指标，亦没有作为病情随访中的监测指标和方法，因此寻找宫颈癌的诊断、监测及判断预后的敏感有效的指标成为近年来研究重点。

原癌基因Bmi-1在多种肿瘤组织中的表达增高，同时 Bmi-1被认为是干细胞和多种实体瘤干细胞最为关键的调控因子，如多种鼻咽癌、脑肿瘤和乳腺恶性肿瘤等[6-8]。Bmi-1基因为多梳基因家族的转录抑制因子，是一种广泛表达的白，其为影响干细胞自我复制的重要干细胞因子，通过调节如存活基因、抗增殖基因等干细胞相关因子决定干细胞分化方向，调节造血干细胞和神经干细胞的自我更新[9]。研究发现，在白血病、乳腺癌、大肠癌和肺癌、宫颈癌等肿瘤均有Bmi-1高表达，与肿瘤原发灶浸润范围及患者生存预后密切相关[10]。由于Bmi-1大部分人体正常组织中都不表达或呈低表达，而其mRNA和蛋白在很多肿瘤组织或细胞中却高表达，并且与患者预后不良呈一定的相关关系。

本研究中发现在正常宫颈组织中Bmi-1阳性表达率为0，在宫颈上皮内瘤变组织中Bmi-1阳性表达率逐渐增高。在宫颈癌中Bmi-1阳性表达率明显增高，为进一步探讨Bmi-1基因表达与宫颈恶性潜能的关系，本研究分析了Bmi-1蛋白表达在不同临床病理指标间的差异，结果发现Bmi-1基因的表达与肿瘤的临床分期及组织学分级相关，且组织学分级越低，Bmi-1蛋白的阳性表达率越高，另外本研究发现，Bmi-1蛋白在宫颈癌组织中的表达明显高于癌旁组织 ，这也说明Bmi-1具有抑制子的功能，可能与阻断细胞周期中的p16基因的位点，促进细胞转化和肿瘤形成有关[10]。

总之，宫颈癌组织中的Bmi-1蛋白与肿瘤的某些生物学参数密切相关，研究Bmi-1蛋白在宫颈癌中的表达对于患者的早期诊断具有一定的临床意义，并有可能成为宫颈癌预后评测的指标，并随着基因治疗研究的进展，将有可能为宫颈癌基因治疗提供新的靶点。

参考文献：

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[9]Dimri GP， Martinez JL， Jacobs JJ， et al. The Bmi-1 oncogene induces telomerase activity and immortalizes human mammary epithelialcells.Cancer Res， 2002， 62（16）：4735-4736.

[10]姚尧.Bmi-1、p16基因与实体瘤关系的研究进展[J].实用医学杂，2009，25（18）：3162.