60%唑醚?代森联水分散粒剂中吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的残留测定

摘 要： 采用高效液相色谱法定量分析吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的消解动态和最终残留。吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的添加回收率分别为799%～937%和809%～991%，相对标准偏差分别为22%～40%和18%～28%，吡唑醚菌酯的最低检出量为2×10-10g，在辣椒和土壤中的最低检测浓度为001 mg/kg。吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的消解动态显示，吡唑醚菌酯在辣椒中的半衰期为36～44 d，在土壤中的半衰期为88～107 d。最终残留量试验结果表明：60%唑醚·代森联水分散粒剂按施药剂量为540～810 g ai/hm2，对水喷雾，连喷3～4次，施药间隔期为7 d，最后一次喷药后3、5、7、14、21 d，辣椒中吡唑醚菌酯残留量为00102～02234 mg/kg，均未超过05 mg/kg（MRL）。按照推荐使用剂量在辣椒上使用，按采收间隔期3 d收获是安全的。

关键词：吡唑醚菌酯；辣椒；土壤；残留；安全评价

中图分类号：S4823+4；X592 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2012）12-0081-04

Residue Determination of Pyraclostrobin from 60% Pyraclostrobin

& Metiram in Pepper and Soil

Li LiangLiang1，2， Wang MingLin1*，Yu JianLei2*， Song GuoChun2， Li RuiJuan2

（1.College of Food Science and Engineering， Shandong Agricultural University， Taian 271018， China；

2.Institute of Plant Protection， Shandong Academy of Agricultural Sciences， Jinan 250100， China）

Abstract The degradation dynamics of pyraclostrobin residued in pepper and soil were determined by HPLC. The average recovery rates were 79.9%～93.7% and 80.9%～99.1% respectively in pepper and soil with the relative standard deviations as 2.2%～4.0% and 1.8%～2.8% respectively. The minimum detectable amount of pyraclostrobin was 2×10-10 g， while its minimum detectable concentration in pepper and soil was 0.01 mg/kg. The half-life of pyraclostrobin were 3.6～4.4 days and 8.8～10.7 days respectively in pepper and soil. When 60% pyraclostrobin & metiram was sprayed for 3～4 times successively at 540～810 g a.i./hm2 with the interval period as 7 days， the final residue of pyraclostrobin in pepper was 0.0102～0.2234 mg/kg on the 3rd， 5th， 7th， 14th and 21st day after the final application， which was lower than 0.5 mg/kg （MRL）. In conclusion， the preharvest interval should be suggested as 3 days if 60% pyraclostrobin & metiram was applied at recommended dosage for pepper.

Key words Pyraclostrobin； Pepper； Soil； Residue； Safety assessment

吡唑醚菌酯（pyraclostrobin），化学名称N-f 2-〔1-（4-氯苯）-1H-吡唑-3-基氧甲基〕苯卜N-甲氧氨基甲酸甲酯，是德国巴斯夫公司研发的兼具吡唑结构的甲氧基丙烯酸酯类新型杀菌剂，可有效防治子囊菌纲、担子菌纲、半知菌纲和卵菌纲真菌引起的作物病害，具有杀菌谱广、活性高、与环境生物相融性好的特点 ，具有很好的市场潜力和广泛的应用前景[1～7]，但长期、大量使用该农药对环境和食品不可避免地带来潜在的危险。目前对其在作物上的残留研究已有报道[8，9]，de Melo Abreu等同时分析测定了葡萄和葡萄酒中吡唑醚菌酯等几种农药的残留[10]，Zhang等测定花生中的吡唑醚菌酯[11]，而有关其在辣椒中的残留动态未见报道。本试验利用高效液相色谱法对60%唑醚·代森联水分散粒剂中吡唑醚菌酯在辣椒上的残留动态及最终残留开展研究，以探明吡唑醚菌酯在辣椒上的残留规律，提出合理使用方法，为其进一步推广应用提供一定的数据基础，并对评价吡唑醚菌酯的环境安全性提供重要的参考。1 材料与方法

11 仪器与试剂

LC-20AT液相色谱仪，紫外检测器（岛津公司），旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），超声波清洗仪（天津奥特赛恩斯仪器有限公司），电子天平（METTLER），组织捣碎机；玻璃层析柱25 cm×25 cm。

60%唑醚·代森联水分散粒剂，德国巴斯夫公司提供；吡唑醚菌酯标准品，纯度999%，德国巴斯夫公司提供；甲醇、正庚烷、四氢呋喃均为色谱纯；丙酮、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、无水硫酸钠、氯化钠均为分析纯；硅胶（分析纯）。

12 田间试验

参照农业部农药检定所制定的《农药残留试验准则》[12]和《农药登记残留田间试验标准操作规范》[13]于2010、2011年分别在山东、浙江两地进行了消解动态试验及最终残留试验。

121 吡唑醚菌酯在辣椒中残留消解动态试验 选择未施用过吡唑醚菌酯的地方划区，重复3次，并设置空白对照区，小区面积15 m2，顺序排列，小区间设保护行。60%唑醚·代森联水分散粒剂按1 080 g ai/hm2剂量施用，辣椒长到成熟个体一半时开始喷药，每公顷用药液600 kg，使用背负式喷雾器，对植株均匀喷雾。施药后1 h和1、3、5、7、14、21、28 d取辣椒样品。

取样方法：辣椒每株分上、下、内、外取果实，共取25 kg，用四分法处理样品，切碎，取250 g样品放于-20℃冰箱中保存待测。

122 吡唑醚菌酯在土壤中模拟残留消解动态试验 选择未施用吡唑醚菌酯的地块，划区施药，并设置空白对照区，小区面积10 m2，顺序排列，重复3次，小区间设保护行。60%唑醚·代森联水分散粒剂按1 080 g ai/ hm2剂量地面均匀喷雾，每公顷用药液900 kg。喷药后1 h及1、3、5、7、14、21、28、42 d十点取样法取土壤样品，钻取0～10 cm土壤1 kg，用四分法处理样品，最后取250 g放于低温冰柜中待测。

123 吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中最终残留量试验 选择未施用过吡唑醚菌酯的辣椒田划区，按60%唑醚·代森联水分散粒剂540、810 g ai/hm2剂量，分3、4次喷药，加空白对照，5个处理，3次重复，共15个小区，小区面积30 m2 ，随机排列。于辣椒花期喷药，每隔7 d施药1次，共施药3～4次。施药器械为背负式喷雾器，每公顷用药液900 kg，对植株均匀喷雾。距最后一次施药3、5、7、14、21 d各取样1次，辣椒及土壤取样方法同动态试验。

13 分析方法

131 样品的提取、净化 ①辣椒样品：称取匀浆机磨碎的辣椒样品2000 g于250 ml碘价瓶中，加入80 ml丙酮和水混合液（8∶ 2，V/V）超声提取15 min，过滤至平底烧瓶中，再加入60 ml×2丙酮和水混合液（8∶ 2，V/V），超声波提取15 min×2，合并滤液至平底烧瓶中。旋转蒸发器（45℃）减压浓缩除去丙酮，将浓缩液转移至分液漏斗中，加100 ml饱和食盐水，用50 ml×3二氯甲烷液-液萃取，经无水硫酸钠过滤，收集二氯甲烷相，用旋转蒸发器（40℃）减压浓缩至近干，吹干，待净化。

在玻璃层析柱内依次加入2 cm厚无水硫酸钠、10 cm中性硅胶、2 cm厚无水硫酸钠，用50 ml石油醚预淋，弃去淋洗液，用10 ml乙酸乙酯/石油醚（2∶ 1，V/V）将待净化液转移入柱中，再用100 ml乙酸乙酯/石油醚（2∶ 1，V/V）混合液淋洗，收集淋洗液，45℃浓缩至近干，吹干，用正庚烷/四氢呋喃（91∶ 9，V/V）定容至10 ml，待测。

②土壤样品：称取土壤样品2000 g于250 ml碘价瓶中，加80 ml乙酸乙酯和石油醚混合液（2∶ 1，V/V），超声波提取15 min，经无水硫酸钠过滤，再分别用乙酸乙酯和石油醚混合液（2∶ 1，V/V）60 ml×2，超声波提取15 min×2，合并滤液至平底烧瓶中。用旋转蒸发器（45℃）减压浓缩至近干，吹干，用甲醇定容至10 ml，经045 μm微孔滤膜过滤，待测。

132 仪器条件 LC-20AT液相色谱仪（日本岛津公司）；检测器：紫外吸收检测器；波长：278 nm；柱温：室温；进样量：20 μl；色谱柱：VP-ODS C18柱，250 mm×46 mm不锈钢柱；流速：08 ml/min；流动相：辣椒样品为甲醇∶ 水=65∶ 35，土壤样品为甲醇∶ 水=85∶ 15

133 结果与计算 采用外标法峰面积定量。在一定范围内吡唑醚菌酯的峰面积响应值（Y）和进样量（X）有良好的线性关系。用吡唑醚菌酯标准品配5个不同浓度（001、005、010、050、100 mg/kg）的样品，在上述条件下做标准曲线。吡唑醚菌酯进样量在4×10-10～1×10-7 g之间有良好的线性关系，直线回归式为：Y=49968X-36812，R2=09998。

134 方法灵敏度、准确度及精密度 在上述色谱条件下，吡唑醚菌酯的最小检出量为2×10-10 g，吡唑醚菌酯在土壤、辣椒中的最低检测浓度为001 mg/kg。用未施过吡唑醚菌酯的辣椒试验地的辣椒和土壤空白样品进行3个浓度的添加回收率实验，吡唑醚菌酯实际添加量均分别为001、050、100 mg/kg，每个添加浓度做5个平行样。辣椒中吡唑醚菌酯的平均添加回收率分别为909%、857%、825%，相对标准偏差为

2 结果与分析

21 吡唑醚菌酯在辣椒和土壤中的残留消解动态

2010～2011年在山东、浙江进行的60%唑醚·代森联水分散粒剂在辣椒、土壤中的残留消解规律试验显示，其消解规律均符合一级动力学方程式Ct=C0e-KT。式中：Ct为施药后间隔的残留农药浓度，C0为施药后的原始沉积量，K为消解速率常数，T为施药后天数。

试验结果（表2、表3）看出，吡唑醚菌酯在辣椒中的半衰期为36～44 d，药后14 d消解率达88%以上；吡唑醚菌酯在土壤中的半衰期为88～107 d，药后28 d消解率达850%以上。总趋势基本一致，吡唑醚菌酯在辣椒、土壤中消解速度较快。

22 60%唑醚·代森联水分散粒剂在辣椒及土壤中的最终残留量

辣椒样品：60%唑醚·代森联水分散粒剂540 g ai/hm2，3次药后3 d残留量为00106～00231 mg/kg，药后5、7、14、21 d未检出；4次药后3、5 d残留量为00105～00298 mg/kg，药后7、14、21 d未检出。60%唑醚·代森联水分散粒剂810 g ai/hm2，3次药后3、5、7、14 d残留量为00102～01432 mg/kg，药后21 d未检出；4次药后3、5、7、14 、21 d残留量为00102～02234 mg/kg。对照区样品均未检出。检出样品的残留量均低于最高残留限量（MRL）05 mg/kg（表4）。

土壤样品：60%唑醚·代森联水分散粒剂540 g ai/hm2，3次、4次药后3、5、7、14、21 d残留量为00102～01934 mg/kg。60%唑醚·代森联水分散粒剂810 g ai/hm2，3次、4次药后3、5、7、14、21 d残留量为01028～05735 mg/kg。对照区样品均未检出（表4）。

3 结论与讨论

60%唑醚·代森联水分散粒剂对辣椒猝倒病有明显的防治效果，并有一定的促进生长作用，在辣椒中的半衰期为36～44 d，药后14 d消解达88%以上。总的来说，吡唑醚菌酯在辣椒中半衰期较短，消解速度较快。

我国尚未规定吡唑醚菌酯在辣椒中最高残留限量（MRL），韩国规定吡唑醚菌酯在辣椒中最高残留限量为05 mg/kg。暂以此为依据，2010～2011年山东、浙江两地残留试验结果，60%唑醚·代森联水分散粒剂用于防治辣椒叶斑病，以540～810 g ai/hm2，对水喷雾，连喷3～4次，施药间隔期7 d，喷药后3、5、7、14、21 d，辣椒中吡唑醚菌酯残留量00102～02234 mg/kg，均未超过05 mg/kg，建议安全间隔期为3 d。参 考 文 献：

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