胶体金法与ELISA法检测猪瘟抗体结果对比分析

摘要：为了比较胶体金法与ＥＬＩＳＡ法检测猪瘟抗体的结果符合率，以了解胶体金法的特异性与敏感度，用胶体金法和ＥＬＩＳＡ法平行检测受检猪血清标本猪瘟抗体滴度。结果表明，胶体金法和ＥＬＩＳＡ法检测猪瘟抗体的结果符合率为８６．６％，用胶体金法检测猪瘟抗体存在漏检及误诊（即假阴性、假阳性）。说明胶体金法较ＥＬＩＳＡ法敏感度、特异度低，用胶体金法检测猪瘟抗体滴度存在一定程度的漏检率及误诊率，胶体金法只能初步筛查猪瘟抗体，有一定技术力量的县级兽医实验室使用ＥＬＩＳＡ法检测猪血样的猪瘟抗体滴度更为合适，对于胶体金法筛查阴性的猪血样，建议用ＥＬＩＳＡ法复检以防漏检。

关键词：猪瘟抗体；胶体金法；ＥＬＩＳＡ法检测；特异性；敏感性

中图分类号：Ｓ８５４．４＋３ 文献标识码：A 文章编号：１００７－２７３Ｘ（２０12）08-0004-02

近几年来，随着各级政府对动物疫病监测工作的日益重视，寻求一种快速、方便、敏感的实验方法检测猪瘟抗体滴度就显得至关重要。胶体金法是一种膜载体的免疫检测法，具有快速、简便的特点，非常适合基层兽医防疫人员及规模户使用。同样，ＥＬＩＳＡ法检测虽然对实验室设施有一定要求，也因出结果快、灵敏度高而在县级兽医实验室大量采用。为了了解这两种检测方法检测猪瘟抗体的敏感性、特异性和准确性。２０１２年４月２３日，笔者结合宜都市春防抗体监测用胶体金法和ＥＬＩＳＡ法同时检测送检的１１２份猪血清标本中的猪瘟抗体水平，现将其报告如下。

１ 材料与方法

１．１ 样本来源

２０１２年４月宜都市１０个乡镇春防抗体监测送检猪血清样本１１２份。

１．２ 试剂和仪器

试剂：猪瘟抗体快速检测试剂盒（胶体金法）和猪瘟病毒抗体检测试剂盒（ＥＬＩＳＡ法）均为深圳市康百得生物科技有限公司生产。

仪器：瑞士帝肯产Ｓｕｎｒｉｓｅ酶标仪。

１．３ 方法

１１２份猪血清样本以胶体金法和ＥＬＩＳＡ法平行检测猪瘟抗体滴度，操作均按试剂盒说明书进行。对于ＥＬＩＳＡ法检测阳性、胶体金法检测阴性的血清标本，再用ＥＬＩＳＡ法双孔复检，其中任一孔Ｓ／Ｃｏ≥１即确定为阳性。

２ 结果

胶体金法和ＥＬＩＳＡ法检测１１２份猪血清猪瘟抗体结果见表１、表２、表３。

由表１可见，１１２份猪血清，用胶体金法检测猪瘟抗体，阳性９６份，阳性率为８５．７％；用ＥＬＩＳＡ法检测猪瘟抗体，阳性１０９份，阳性率为９７．３％。

由表２可见，两种方法检测结果不相符的有１５份。其中，１４份ＥＬＩＳＡ法检测为阳性，胶体金法检测为阴性；１份ＥＬＩＳＡ法检测为阴性，胶体金法检测为阳性。胶体金法检测相对ＥＬＩＳＡ法有一定漏检和误诊现象存在。

由表３可见，相对ＥＬＩＳＡ法检测，胶体金法检测阳性（ａ）为９５份，阴性（ｄ）为２份，假阳性（ｂ）为１份，假阴性（ｃ）为１４份。胶体金法检测灵敏度＝ａ／（ａ＋ｃ）×１００％＝８７．２％；特异度＝ｄ／（ｂ＋ｄ）×１００％＝６６．７％；漏检率＝ｃ／（ａ＋ｃ）×１００％＝１２．８％；误诊率＝ｂ／（ｂ＋ｄ）×１００％＝３３．３％；诊断符合率＝（ａ＋ｄ）／（ａ＋ｂ＋ｃ＋ｄ）×１００％＝８６．６％。

３ 小结与讨论

胶体金法和ＥＬＩＳＡ法检测均属于免疫学检测范畴，方法特异，敏感性好。ＥＬＩＳＡ法是目前应用最广而且发展最快的一种免疫测定技术。胶体金法与ＥＬＩＳＡ法相比，具有快速、灵敏、操作更加简便等优点，可最大限度地避免试验过程中各种因素对结果的影响并减轻实验室人员的工作强度。另外也可用于检测单个样本，特别适用于基层防疫员和规模户，大大方便了畜病的快速诊断。本试验１１２份猪血清样本中，ＥＬＩＳＡ法检测出阳性样本１０９份，阳性率为９７．３％，胶体金法检测出阳性样本９６份，阳性率为８５．７％。两种方法同时检测猪瘟抗体滴度，尽管符合率较高，胶体金法还是有漏检、误诊现象存在，分析１４例漏检及１例误诊原因，可能是胶体金法较ＥＬＩＳＡ法灵敏性、特异性低造成的，漏检率为１２．８％，误诊率为３３．３％。对于没有良好ＥＬＩＳＡ设备的兽医实验室，用胶体金法检测猪瘟抗体时应选择灵敏度高、质量好的胶体金法快速检测试剂盒。胶体金法只能初步筛查猪瘟抗体，适用于快速检测的需要，但县级兽医实验室不宜使用胶体金法检测猪瘟抗体滴度，对于胶体金法筛查阴性的血样，建议用ＥＬＩＳＡ法复检，以防漏检。