基于若干种中药及其复方抗真菌实验研究

【摘要】目的：对单味中药及其复方的抑制真菌的最小浓度进行试验测定。方法：以试管内药基法对单味中药及其复方进行实验研究，对它们对常见真菌的抑制效果进行测定评价。结果：大风子、川椒、皂角对真菌的抑制作用最强，复方组抑菌最小浓度为0.625%，效果好于单味中药。结论：大风子、皂角、川椒等对皮肤癣菌具有明显的抑制效果，复方的抑菌效果优于单味中药，中药之间具有协同作用。

【关键词】中药；复方；抗真菌；最小浓度

【中图分类号】R28 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）04-0037-02

随着器官移植、器官插管的不断开展，广谱抗生素、甾体抗生素在临床上的大量使用，一些免疫障碍类疾病的大量出现，使得真菌感染的情况迅速增加[1] 。床上使用的抗真菌药物也不断增加，但是因为抗真菌药物的耐药问题及毒副作用的问题对其广泛推广应用产生了影响[2]。而中药具有来源广、毒副作用小、不容易出现耐药性、价格低等优点，使得抗真菌中药的研究具有比较好的发展前景[3]。手足癣是临床上常见行浅部真菌病，该病的致病菌种主要有石膏样毛癣菌、红色毛癣菌、白色念球珠菌等[4]。本文对临床上常用来治疗手足癣的10种单味中药及其复方进行研究，以试管内药基法，测定其抑制真菌的最小浓度，报道如下：

1资料与方法

1.1 一般资料

菌种：白色念珠菌、红色毛癣菌、石膏样毛癣菌。

菌液制作：用接种钩挑选适量菌种放入生理盐水，再经研磨制成混悬液。在血细胞计数板上对菌液浓度进行调节，浓度一般为5×105CFU/ML。

药液制备：取大风子、川椒、皂角、蛇床子、百部、大黄、地骨皮、苦参、黄柏、白鲜皮各30g，各加水250ML煮沸15分钟，将药汁以纱布滤出。然后再加水250ML煮沸15分钟，将两次煮出的药汁兑再一起，进行加热浓缩至50ML，得100%药液。

其他仪器：蛋白胨、蒸馏水、琼脂、葡萄糖、氯霉素、加样器、试管、恒温箱、高压消毒锅、微量天平、显微镜、5ML注射器、20ML注射器等。

单味中药的实验方法：制备常规沙氏琼脂培养基，注入系列试管，每管4ML，取140支试管，为1-140支。以5ML的注射器抽取2ML100%药液注入试管1ML，得20%药液与培养基混合物；再以剩1ML药液的5ML注射器抽取1ML蒸馏水，混合均匀后注1ML到下一试管，得10%的药液与培养基的混合物。以此方法，可获得0.3125%，0.625%，1.25%，2.5%，5%，10%，20%浓度的药液与培养基的混合物，并做好标记。再取141与142管，注入1ML蒸馏水，做好标记，总计142支。以高压消毒锅进行高温消毒，持续15分钟，然后置斜面等待冷却，这样就制成对照培养基与系列药物浓度的培养基。将1-140管与生长对照管（141管）接种待测试的菌种，和空白对照管（142管）一起放入恒温箱14天，恒温箱温度保持在25℃，观察真菌的生长情况。

复方的试验方法：按照单味中药的实验效果抽取5种效果最好的中药：大风子、川椒、皂角、地骨皮、藿香组成复方。制备药基和接种菌种相同的单味中药，观察真菌的生长情况。

1.2效果判定

真菌发育迅速旺盛，记4+；真菌发育比较旺盛，但是菌落比正常偏小，记3+；真菌发育不旺盛，记2+，真菌发育缓慢，菌落较小，记1+；真菌完全不发育，记-。最小真菌完全无生长浓度就是抑制真菌生长的最低浓度。

2 结果

3讨论

中药在临床上的应用一般是复方制剂，因此对复方中药进行研究具有十分中药的理论和实践意义[5]。

真菌皮肤病的基本致病因素是湿、虫、毒、热，因为湿邪粘滞，所以病情反复，难以治愈，时间久则会瘀阻脉络、伤津耗血，使血不荣肤。相关文献报道中一般采用祛风止痒、清热燥湿、杀虫疗癣等药物进行治疗[6]。本次试验采用的10种药物就是具有上述功效的药物。实验过程中，142支始终没有真菌生长，证明实验过程中没有出现真菌的交叉感染，141支生长始终迅速旺盛，证明菌株在培养基上的生长情况良好，提示测试结果可靠准确。

不同药物具有不同的真菌活性，大风子、川椒、皂角、藿香、苦参等具有显著的抑菌作用，而蛇床子、百部等抑菌效果较差；同一药物对不同菌种的抗真菌活性也不相同，10种药物对白色念珠菌的抑制效果较差。而复方组对三类真菌的抑制效果菌比较理想，优于单味药，最小浓度为0.625%，且对于白色念珠菌的抑制效果也比较好，最小浓度为2.5%，证明这些重要之间具有协同作用。

相信通过系统科学的研究，中药抗真菌会取得新进展。

参考文献

[1]邱莹，于腾. 20种中药及其复方抗真菌实验研究[J].济宁医学院学报.2007.9（3）：237-238

[2]刘静，蔡希. 中医药治疗手足癣的研究进展[J].四川中医.2011.29（8）：44-45

[3]常小东，段渠，张溯，李俊仪.中药复方外用治疗手足癣研究进展[J]. 河南中医. 2012.3（32）：390-391

[4] 钱方，叶秋华. 二大归芷汤治疗角化型手足癣临床及实验研究[J].湖南中医药大学学报. 2008.28（1）：41-42

[5] 秦丽.自拟克癣汤治疗湿热型手足癣30例疗效观察[J].工企医刊.2008.21（5）：50-51

[6]陶茂灿，夏修蛟，曹毅.中药复方制剂抗真菌的实验研究进展[J].浙江临床医学.2008.11（10）：1506-1507