HPLC法测定刺五加浓缩液中紫丁香苷的含量

【前言】HPLC法测定刺五加浓缩液中紫丁香苷的含量由文秘帮小编整理而成，但愿对你的学习工作带来帮助。【Abstract】 Objective A HPLC methods was developed for the contents determination of Syringin in Ciwujia Concentrated Liquid.Methods The AgilentC18 column was used with a mobil phase was Methanol-Water(20:80).The detection Wavelength was 265nm.Res...

【摘要】 目的采用高效液相色谱法测定刺五加浓缩液中紫丁香苷的含量。方法 选用AgilentC18色谱柱,流动相:甲醇-水(20:80);检测波长:265 nm。结果 紫丁香苷对照品线性范围0.130 5～1.044 0μg(r=1.000 0),平均回收率为99.42%,RSD=0.82%(n=6)。结论 hplc法简便,准确,重现性好。可用于刺五加浓缩质量控制。

【关键词】 刺五加浓缩液;紫丁香苷;HPLC

Determination of syringin in ciwujia concentrated liquid by HPLC

KONG Xiang-chen, YAN Qiu-ye,LIN Lan-bo,et al.

Heilongjiang agricultural college of vocational technology, Heilongjiang Jiamusi 154002,China

【Abstract】 Objective A HPLC methods was developed for the contents determination of Syringin in Ciwujia Concentrated Liquid.Methods The AgilentC18 column was used with a mobil phase was Methanol-Water(20:80).The detection Wavelength was 265nm.ResultsThe Linear range of reference substance of Syringin was 0.130 5-1.044 0 μg(r=1.000 0),The average recovery rate was 99.42%and the RSD=0.82%(n=6).Conclusion The method simple,sensitive and accurate.It can be used for quality of Ciwujia Concentrated Liquid.

【Key words】 Ciwujia Concentrated Liquid;Syringin;HPLC

作者单位:154002黑龙江省农业职业技术学院

刺五加浓缩液为生产刺五加注射液的原料,厂方内控标准仅采用可见-紫外分光光度法测定总黄酮的含量,笔者采用高效液相色谱法对刺五加浓缩液中活性成分紫丁香苷进行含量测定,方法简便,结果准确,可做为刺五加浓缩液的质量控制方法。

1 仪器与试药

Agilent1100自动进样高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司),紫丁香苷(中国药品生物制品检定所 批号:11574-200201 含量测定用)。刺五加浓缩液(厂方提供 批号:200807252、200807261、200807291)。甲醇为色谱纯,水为纯化水,其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[1]

色谱柱:AgilentC18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(20∶80);流速:1.0 ml/min,柱温:30℃;检测波长为265 nm;进样量:3μl。上述色谱条件下,理论板数按紫丁香苷峰计算应不低于2000。色谱图见图1。

图1 刺五加浓缩液HPLC色谱图

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取紫丁香苷对照品约10 mg,置25 ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液。精密吸取2.5 ml,置10 ml量瓶中,用流动相定容至刻度,摇匀,作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 精密称取供试品约0.5 g,置50 ml量瓶中,加流动相至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。

2.3 线性关系的考察

分别精密吸取对照品溶液1、2、4、6、8μl照2.1色谱条件分别进样,记录色谱图,以进样量(μg)为横坐标,以色谱峰面积Y为纵坐标,绘制标准曲线,计算回归方程Y=2.46×103X+22.87,r=1.000 0。结果表明紫丁香苷在0.130 5～1.044 0μg范围内与峰面积有良好的线性关系。

2.4 稳定性试验 取样品(批号200807291)的供试品溶液在15 h内每隔3 h进行一次进样,考察供试品溶液的稳定性,6次测定结果以峰面积计算(自动进样)RSD=1.2%(n=6)。表明紫丁香苷在15 h内具有良好的稳定性。

2.5 精密度试验 取上述对照品溶液4μl,重复进样6次,其峰面积的RSD为0.71%。表明仪器精密度良好。

2.6 重复性试验 精密称取同一份样品(批号200807291)5份,按试验方法,测定结果平均含量为12.51 mg/g,RSD=0.23%。

2.7 回收率试验 取已知含量的样品(批号200807291含量12.51 mg/g)6份,每份0.25 g,精密称定,精密量取上述对照品溶液(浓度为0.4100 mg/ml)各6、7.5、9 ml,分别加入上述量瓶中,按供试品溶液制备项下方法制备,按2.1色谱条件进行测定,计算加样回收率,结果平均回收率为99.42%。见表1。

表1

加样回收率试验

样品含量(mg/g)加入量(mg/ml)测得量(mg•gl)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)

3.17752.4605.612999.00

3.12752.4605.6010100.55

3.14133.0756.180998.8599.420.82

3.16253.0756.225299.60

3.18383.6906.814898.40

3.13383.6906.8271100.09

2.8 样品含量测定 取3批供试品(批号:200807252、200807261、200807291),按供试品溶液制备方法制备并测定,结果含量分别为12.71、12.79、12.55 mg/g (n=2)。

3 讨论

通过上述方法学考察,表明含量测定方法具有良好的线性关系、良好的精密度和回收率。该方法简便、准确,可作为刺五加浓缩液的厂方内控标准。

参 考 文 献

[1] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部).化学工业出版社,2005:277.