用显微和理化鉴别法鉴别秦艽与麻布七

摘要：秦艽作为常用中药，由于受地域限制或不法药贩制假贩假等原因影响，其假冒伪劣之品不断的冲击市场，严重地影响了临床用药和患者的康复。麻布七就是其中之一，常常冒充秦艽使用。因此笔者采取显微和理化的鉴别方法，运用高效液相色谱新技术对其进行了鉴别研究。秦艽的横切片有放射状的木质部，内皮层处有众多层呈不规则增厚的犀壁组织，薄壁细胞中含草酸钙针晶；麻布七的木质部排列不规则，无增厚的厚壁组织，薄壁细胞中无草酸钙钟晶。秦艽粉末中可观察到草酸钙针晶，麻布七粉末中不舍草酸钙针晶而含淀粉粒。理化鉴别，荧光法，秦艽断面在紫外灯下显黄白色，而麻布七显淡蓝色；显色反应，麻花秦艽碘试液不显色，麻布七显蓝色；化学定性反应，两者提取液加碘化铋钾和浓氨水，麻花艽显棕绿色，麻布七显黄白色。高效液相色谱法，秦艽的出峰时间与标准品龙胆苦苷相同，而麻布七不同。 　关键词：秦艽；麻布七；真伪鉴别 　中图分类号：R284.1

文献标识码：A 　文章编号：1673-7717(2007)12-2638-02

秦艽和麻布七自古到今是两种不同的药物。秦艽来源于龙胆科植物秦艽Gentiana macrophylla Pall.、麻花秦艽Gentiana stramlnea Maxim.、粗茎秦艽Gentiana craasicaulisDuthie ex Burk.或小秦艽Gentiana dahurica Fisch.的干燥根。麻布七来毛茛科植物高乌头Aconimm SinomontanumNakai.)的干燥根。

由于受地域限制或不法药贩制假贩假等原因，麻布七常常冒充秦艽使用。其中麻花秦艽在性状上与麻布七很相似，临床上很难将两者鉴别开来，因此笔者采用显微和理化鉴别方法对其进行鉴别研究。

1.显微鉴别

1.1实验材料及仪器 正置荧光落射显微镜：Nikon-C-SHG1型，日本尼康公司；超高压水银灯能量供应装置：Nikon-ECLIPSE-80i型，日本尼康公司；轮转式切片机：KD-202型，浙江金华科迪仪器设备有限公司。

1.2实验方法

1.2.1组织切片 因为无鲜药材，所以取秦艽和麻布七药材润透，切取小块置轮转式切片机中切片，将切片小心平铺于载玻片上，加一滴稀甘油封片，用正置荧光落射显微镜观察。①秦艽的组织切面：见图1。中，外部细胞多颓废或破碎，近内皮层处有众多层呈不规则增厚的厚壁组织。内皮层明显。韧皮部宽广，有韧皮束散在，形成层明显。木质部呈放射状排列。导管单个散在或2～3个成群。

②麻布七的组织横切片：见图2。外部皮层多已脱落，木栓层为4～12列细胞，皮层较宽，薄壁细胞中含众多淀粉粒。韧皮部与皮层界线不明显。木质部排列不规则。导管单个散在或2～5个成群。

1.2.2粉末鉴别　将秦艽和麻布七药材分别粉碎，过六号筛，取少量粉末于载玻片上，加一滴水合氯醛透化，透化完成后加一滴稀甘油封片，用正植荧光落射显微镜观察。①秦艽的粉末特征：见图3。粉末黄棕色，栓化细胞多成片，无色或淡黄棕色，表面观细胞呈多角形、类长方形或不规则形，直径18～127mμ，长至178μm，壁薄，平周壁有横向微细纹理，细胞内含无色油滴状物，有的细胞不规则分隔成2～12个细胞。草酸钙针晶散在于薄壁细胞中，晶体微小，长5～10μm，呈颗粒状、杆状。主要为螺纹及网纹导管，直径8～52μm，有的螺纹导管具双螺纹。厚壁网纹细胞较多，常与栓化细胞连接，无色或淡棕黄色，类长方形或纺锤形，网孔长裂缝状，疏密不一，大多纵向排列。 ②麻布七的粉末特征：见图4。粉末灰黄色。含多量石细胞，导管主为具缘纹孔，直径29～70μm，末端平截或短尖，穿孔位于端壁或侧壁，有的导管分子短粗拐曲，或纵横连接。淀粉粒单粒球形，长圆形或肾形，直径3～22μm。纤维少数。

2.理化鉴别

2.1实验仪器

2.1.1标准品　龙胆苦苷，购自中国药品生物制品检验所。

2.1.2试剂　甲醇为色谱醇，购自天津四友公司；其余试剂均为分析纯。

2.1.3仪器　恒温水浴锅：HH.S 1～6，上海跃进医疗器械厂；真空干燥箱：DZF-6020型，上海精宏实验设备有限公司；KQ-50B型超声波清洗器；高效液相色谱仪(HITACHI L2000)。日本日立；送液泵(HITACHI L-2130)；检测器(HI-TACHI UV-detector2-2400)；工作站：N-2000色谱数据工作站，浙江大学智达信息工程研究所；微量进样器；电子天平：METILER，AE 240，上海梅特勒托仪器有限公司。

2.2实验方法及结果

2.2.1荧光法　取二者的粗粉置自外灯下(365nm)观察：麻花秦艽显黄白色荧光；麻布七显浅蓝色荧光。

2.2.2化学定性法　①分别取二者粉末1g，各加5mL温水浸泡1h，过滤，各取滤液2mL，分别置试管中加稀碘液2滴：麻花秦艽无显色反应；麻布七显蓝色反应。②分别取二者粉末2g，加10mL甲醇浸泡2h，过滤，取滤液水浴浓缩至2mL。分别置试管中加碘化铋钾溶液6滴，再加入浓氨水6滴：麻花秦艽显棕绿色；麻布七显黄白色。

2.3高效液相色谱法

根据中华人民共和国药典2005版秦艽项下相关的规定操作。

2.3.1色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(1：4)为流动相；检测波长为254nm。柱温为30℃。理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000。

2.3.2对照品溶液的制备　精密称取龙胆苦苷对照品0.0125g，加25mL甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，即得。

2.3.3供试品溶液的制备　各取秦艽和麻布七的粉末(过3号筛)0.5g，加甲醇20mL，加热回流30min，放冷，滤过，滤液水浴蒸干，残渣用适量甲醇溶解，滤过，转移至50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取10mL，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.3.4测定法　分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。见图5～图8。

3.结论

显微特征，秦艽的横切片有放射状的木质部，而麻布七的木质部排列不规则。秦艽近内皮层处有众多层呈不规则增厚的厚壁组织，而麻布七的没有。秦艽的薄壁细胞中含草酸钙针晶，而麻布七无此特征。秦艽粉末中可观察到草酸钙针晶，麻布七粉末中不含草酸钙针晶而含淀粉粒。

理化鉴别，荧光法，秦艽断面在紫外灯下显黄白色，而麻布七显淡蓝色；显色反应，麻花秦艽碘试液不显色，麻布七显蓝色；化学定性反应，两者提取液加碘化铋钾和浓氨水，麻花艽显棕绿色，麻布七显黄白色。

高效液相色谱法，秦艽的出峰时间与标准品龙胆苦苷相同，而麻布七不同。

总之，通过上述显微与理化鉴别方法的研究，不但能够准确地鉴别秦艽与麻布七，同时也向广大中药工作者提供了新的鉴别方法。