水溶性橄榄叶提取物

Eurol BT提取自Olea europaea(油橄榄)树叶，是100％纯天然的水溶性活性成分，用于化妆品和药用化妆品。Eurol BT的多种功效主要归功于其清除自由基的能力。橄榄树被认为是世界上最古老的植物之一；同时，它可以抵抗各种疾病，因此橄榄树树叶的应用也一直受到人们的关注。值得一提的是，当橄榄叶从树上落下，其颜色可以在很长一段时间内仍然保持绿色，充分显示了它高效的抗氧化能力。

Eurol BT是水溶的活性成分，富含生物多酚和生物黄酮素成分，二者协同作用，给予产品生物功效。在Eurol BT中，主要活性分子是橄榄多酚。它由亚麻酸和二羟基苯乙醇合成的酯上接有糖苷组成，并在羟乙基链的3号4号位上有两个-OH官能团。这两个氢氧基的位置决定了它特有的共振条件，这样通过一个内部分子的氢键结合，去稳定中间自由基。

从这个分子结构上，我们可以看到两种不同活性：双酚部分(A)起到清除自由基的作用；而糖苷部分(B)保证了产品的水溶性。橄榄多酚被认为是在自然界的一个化学特例，因为事实上，糖苷键通常是非常薄弱的部分，几乎不可能在萃取工艺中安全保留下来的。然而，在这里，我们却能够完全保留了天然的结构。

作为一种化妆品活性成分，Eurol BT的优势将在下文详细介绍。Eurol BT其它的优势归功于其极佳的安全性(LD50检测不到)和它的完全水溶性。Eurol BT用途广泛，这里我们主要介绍其抗氧化和抗炎的功效。

防止多不饱和脂肪酸的氧化

此试验目的是评估Eurol BT抗氧化能力，防止血浆脂蛋白氧化。试验通过铜盐造成氧化应激，令多不饱和脂肪酸(以下简称PUFA)产生过氧化反应，进而进行观察。简而言之，将CuSO4(6mM)与血浆脂蛋白一起培养，简而言之，将CuSO4(6mM)与血浆脂蛋白一起培养，令其发生氧化反应。然后分别测量培养在不含有或者含有Eurol BT(最终浓度为0.01％和0.1％)的培养液中PUFA的氧化速率，从而进行比较。通过对亚麻酸

(C18：3)，花生四烯酸(C20：4)，--+碳五烯酸(简称EPA)(C20：5)，二十二碳六烯酸(简称DHA)(C22：6)进行试验来证实Eurol BT的抗氧化作用。培养结束后，立即从样品中蛋白里提取出脂肪酸，用高效液相色谱(PECOSPHERE column CR C18 8.3cm×4.6mm)，使用线性渐变溶剂：甲醇及乙睛／水50／50溶液)分析上述几种脂肪酸。图2及图3显示CuS04氧化程度和Eurol BT的抗氧化效果。

Eurol BT的生物活性可以从PUFA氧化量来计量。铜盐的加入致使DHA(C22：6)，EPA(C20：5)和亚麻酸成分减少79.2％(参照样板是2.93％vs 0.61％含有CuSO4)。花生四烯酸总量减少了51.6％(参照样板是9.59％vs 4.64％含有CuS04)。总之，通过检测，Eurol BT(0.01和0.1％添加量)能够抵抗氧化应激，对PuFA起到完全保护。

保护细胞完整性　抵御由叔丁基过氧化氢造成的氧化应激危害

实验用于评估Eurol BT对人体细胞培养体系的保护作用。应用Caco-2细胞体系，达到融合。在37℃下，将细胞单层培养在两种不同含量的Eurol BT(0.1％and 0.5％)培养基中，培育15小时之后，含Eurol BT的培养基由无补料培养基取代。然后，分别将有机氧化剂－叔丁基过氧化氢(以下简称TBHP)，以两种不同的浓度(5mM and 25mM)加入到培养基中(这些浓度是基于预先的试验，该试验结果具体为：125 mM致细胞死亡；25mM产生细胞颗粒团)。测试细胞与TBHP接触三个小时后，然后更换无氧化剂的新培养基。用显微镜观察记录下细胞形态。

测试结果清晰的显示：Eurol BT自身不会造成细胞形态变异，细胞单层没有受到影响且无细胞内颗粒团(表1)。然而，显微镜观察到氧化剂的强烈毒性，细胞内部产生大量的颗粒团，并发现细胞单层本身分离。观察经过含有0.1％Eurol BT的培养基预处理过的细胞，我们发现Eurol BT拥有保护作用，抵抗了TBHP的促氧化反应(氧化剂浓度为5mM)。在这个测试中，我们发现细胞形态是正常的，而且没有发现颗粒团(表1)。经过测试，0.5％的Eurol BT可以抵抗氧化剂TBHP(即使是最高含量)的侵害，能够起到完整保护。

以上测试显示，Eurol BT在细胞层面上可以抵御氧化应激威胁。更进一步了解Eurol BT的抗氧化作用，我们将受到氧化剂TBHP激化的细胞溶解，并对血脂蛋白的脂肪酸成分进行分子分析。细胞溶解物被提取出，用高效液相色谱法(HPLC)(PECOSPHERE column CR C18 8-3 cm×4.6 mm)进行分析。由TBHP引起的氧化应激，造成不饱和脂肪酸占整个脂肪酸成分的比例发生变化(表2)。

试验表明，两种不同含量的Eurol BT对不饱和脂肪酸都没有影响。同时，在氧化剂TBHP(5mM and 25 mM浓度)令不饱和脂肪酸减少了22.6％和63.6％。这个结果表明氧化剂TBHP的氧化应激作用使细胞内部受到损害。通过实验，我们发现Eurol BT有极佳的抗氧化能力，即使在高浓度的TBHP氧化剂激化下，预处理液中，即使只有0.5％Eurol BT，就能够完全保障不饱和脂肪酸的完整性。试验中，25mM的TBHP氧化剂脂肪酸含量与对比样板(Eurol BT，0.5％；TBHP0 mM)比较，变化率100.6％。

通过试验，对各种因素激发的氧化应激反应，Eurol BT展示了高效的抵御作用。其自由基清除效果能够保持细胞的完整性，防止分子结构受到氧化应激损害。在我们的日常生活当中皮肤持续暴露在外界环境中，受到各种各样的损伤。只有对暴露的皮肤进行防护，以防范侵害，从而维护皮肤完整性。本测试证明，Eurol BT具有极高的抗氧化能力。

抑制IL-1分泌

IL-1α是一个促炎因子，与痤疮、在紫外线辐射下的皮肤反应等各种炎症环境都有紧密关系。通过测试，我们挖掘出Eurol BT的巨大潜能，证实了它能够减少IL-1α的分泌。

人体角化细胞是最先面对外部炎症侵蚀的细胞，运用抗炎组份来调整其炎症反应非常重要。因此，我们选用人体角化细胞(NCTC 2544细胞系)做实验模型。角化细胞分别培养在不含有或含有不同浓度Eurol BT的培养液中，用发炎剂聚丙烯酸甲酯(PMA)进行刺激，然后就行研究。使用地塞米松

(Dexamethasone)这一众所周知的糖皮质激素抗炎剂，作为正向对比剂。通过特殊抗体来计量释放到角化细胞培养基中的IL-1α。

由未经处理的角化细胞释放出来的IL-1α的量非常少(作为对照进行对比，图中标为“Cont”)(见图表4)。受到发炎剂PMA激化的角化细胞，释放出大量的IL-1α(+93％相对于对照组，p＜0.01)。然而正向对照数据――使用地塞米松的角化细胞，在PMA存在下，IL-1α释放水平明显减少(-67％相对于对照租+PMA，p＜0.01)。此结果达到试验预期，证实有效。在浓度为0.016％情况下，Eurol BT显著地抑制了IL-1α(-3l％ of the control+PMA，p＜0.05)

的分泌。实践证明，Eurol BT不仅能够有效抑制发炎细胞因子的分泌，而且在很低的浓度下就能发挥作用。至此，我们可以将Eurol BT称为高效的抗过敏成份。

结论

Eurol BT(INCI：橄榄叶提取物，水)是一种独特的活性成分，拥有高效的清除自由基能力。其天然的来源，令该活性成分囊括了橄榄叶的全部生物活性，特别是橄榄多酚的功效。B&T公司拥有的专有技术，将橄榄多酚连带其自然的分子环境一起提取出来。这样的技术产生出新一代的活性成分，如鸡尾酒般把高效抗氧化成分集合，达到效能一致性。

Eurol BT的功效在体外测试和临床测试上都得到验证。实验证明活性成分能保护细胞膜油脂成分抵抗氧化应激。膜脂肪是自由基的首选攻击目标之一。在自由基攻击过程中，Eurol BT保护了暴露在氧化环境中细胞的完整性。活性氧充当信使的角色调节各种氧化应激的有害影响。皮肤炎症现象与各种对皮肤有害的环境有关，诸如痤疮和紫外线灼伤的反应。另外，测试中，即使是很低的添加量(0.016％)，Eurol BT也显示出了对IL-1α分泌的明显的抑制作用。基于Eurol BT的抗氧化、抗发炎作用，该成份可以作为高效的抗发炎功效产品。

Eurol BT的多面性决定其为独一无二的活性成分。它拥有Ecocert认证(www.ecocert.fr)。因此，它能应用在多种美容／皮肤病学方面的配方中，以抵抗氧化作用对皮肤的损伤。同时，Eurol BT还是当今配方师们开发“绿色天然潮流”产品的最好选择。