TGF—β1与CTGF在RA—ILD患者血清中的表达水平及意义

[摘要] 目的 通过检测TGF-β1和CTGF在RA-ILD患者血清中的表达水平，探讨其在RA-ILD中的意义。 方法 采用ELISA法检测100例RA（包括45例RA-ILD）和30例健康体检者血清TGF-β1、CTGF的表达水平。 结果 RA-ILD组中TGF-β1、CTGF、CRP、RF的含量分别为（15.9±4.5）ng/mL、（77.97±34.04）ng/mL、（58.8±50.7）mg/L、（518±574）IU/mL，均高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.01）；TGF-β1、CTGF、CRP之间均呈正相关关系。TGF-β1和CTGF对RA-ILD诊断的灵敏度、特异度分别为（80.0%，66.7%）、（57.8%，86.7%）。 结论 TGF-β1和CTGF参与RA-ILD的发生发展过程；TGF-β1和CTGF可作为判断RA-ILD活动期的指标，也可作为早期筛查RA-ILD指标之一。

[关键词] 转化生长因子β1；结缔组织生长因子；肺间质病变；类风湿关节炎

[中图分类号] R593.22 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）03-0049-02

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以慢性关节病变为主的自身免疫疾病，可反复迁延多年，最终导致关节畸形及功能丧失。然而，病变并非局限于关节，常伴有关节以外的其他脏器病变，甚至可引起主要脏器的血管炎而危及生命[1]。肺是由丰富的胶原、血管等结缔组织所构成，又有自己的循环体系，因而成为RA较易受累的器官之一。肺间质病变（interstitial lung disease，ILD）病理变化常由间质性肺炎逐渐向间质纤维化发展，最终导致肺组织弹性减退、肺容量缩小、呼吸衰竭以至死亡，早期无明显的临床表现。研究证实早期肺间质病变是可逆的，故早期诊断对于肺间质患者有着重要的临床意义。细胞因子及细胞因子间形成的复杂网络系统在肺间质病变的发生、发展过程中发挥着重要作用。其中转化生长因子β1（transfer growth factor beta 1，TGF-β1）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）对调控肺成纤维细胞的分裂、增殖及胶原蛋白的合成与降解起着十分重要的作用[2，3]。本实验通过检测RA-ILD患者血清中TGF-β1、CTGF的表达水平，来探讨其在RA-ILD患者中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2010年1月～2011年12月在我院风湿科住院的RA患者100例，所有患者均符合1987年美国风湿病学会的分类标准[1]，其中RA-ILD患者符合2000年美国胸科协会/欧洲呼吸协会（ATS/ERS）提出的IPF的诊断标准[2]。RA-ILD组45例，单纯RA组55例，健康体检组30例，以上患者年龄及性别均匹配。

全部入选组资料完整且诊断明确，且年龄相匹配。有以下疾病的患者被剔除，如曾患有肺结核或结核感染、慢性支气管炎、肺气肿、肺源性心脏病、支气管哮喘、支气管扩张等呼吸系统疾病者，结节病、肺部肿瘤、慢性心肝肾功能不全者，以及伴有其他纤维化疾病和长期服用金制剂、青霉胺、甲氨蝶呤等抗风湿药物的患者。

1.2 标本收集

全部研究对象取清晨空腹静脉血3 mL，静置30 min后，离心分离血清，置-20℃保存待用。

1.3 实验方法

采用酶联免疫吸附法检测血清TGF-β1、CTGF含量，试剂盒购自美国R&D Systems公司，操作均严格按照说明书进行。其他指标由我院风湿免疫实验室提供。

1.4 统计学处理

数据采用SPSS 13.0统计学软件进行处理，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用两独立样本t检验；细胞因子间相关关系采用皮尔逊相关分析，血清标志物的诊断评价采用ROC曲线评价方法。检验水准为双侧α=0.05。

2 结果

RA-ILD组血清中TGF-β1和CTGF的含量均高于RA组和健康对照组，差异有统计学意义（P < 0.01）。见表1。RA-ILD组血清中CRP为（58.8±50.7）mg/L、RF为（518±574）IU/mL，明显高于单纯RA组，差异有统计学意义（P < 0.05）。

RA-ILD组中变量间相关分析显示TGF-β1与CTGF（r = 0.29，P = 0.047）、TGF-β1与CRP（r = 0.41，P = 0.005），CTGF与CRP（r = 0.33，P = 0.029）之间均呈正相关。诊断评价结果显示TGF-β1和CTGF对RA-ILD患者诊断的灵敏度分别为80.0%、57.8%，特异度分别为66.7%、86.7%。见表2。

3 讨论

TGF-β1被认为是迄今发现的最强的细胞外基质沉淀促进剂[4]，它由巨嗜细胞、肺泡细胞、成纤维细胞等多种细胞分泌，能够趋化成纤维细胞，而且在成纤维细胞增殖和上皮细胞分化中起主要作用，还可以介导蛋白质合成、抑制胶原降解，从而参与肺纤维化的进程[3]。CTGF是近年来发现的一种新的可刺激成纤维细胞增殖和分泌胶原的生长因子，对调控肺成纤维细胞的分裂、增殖及胶原蛋白的合成与降解起着十分重要的作用[2，5]。它能够促进细胞外基质沉积及多种细胞外基质成分的产生，抑制细胞外基质的降解，还能促进蛋白酶抑制因子的表达，降低基质金属蛋白酶9的活性[6]。目前认为CTGF可作为促纤维化的共同下游介导因子，在介导器官纤维化的发生中可能发挥十分重要的作用。

本研究发现RA-ILD组TGF-β1及CTGF高表达，与对照组相比明显升高，提示TGF-β1及CTGF参与RA-ILD的发生发展过程。而且在相关分析中发现这两个指标与疾病活动性指标CRP呈正相关关系，这说明当RA-ILD患者病情处于活动期时TGF-β1及CTGF也呈高表达。因此TGF-β1和CTGF也可作为判断RA-ILD活动期的指标之一。

本研究采用ROC曲线评价方法对TGF-β1、CTGF在RA-ILD早期诊断中进行了评价。结果显示TGF-β1对该病诊断的灵敏度高，CTGF的特异度高。因此联合检测TGF-β1和CTGF两个血清指标，对早期筛查类风湿关节炎合并肺间质病变患者有重要的临床价值，不仅可提高检查效率，还可降低医疗费用。

[参考文献]

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[2] Zhang L，Keane MP，Zhu LX，et al. Interleukin-7 and transforming growth factor-beta play counter regulatory roles in protein kinase C-deta-dependent control of fibroblast collagen synthesis in pulmonary fibrosis[J]. J Biol Chem，2004，279（2831）：5-9.

[3] Kelly M，Kolb M，Bonniaud P，et al. Re-evaluation of fibrogenic cytokines in lung fibrosis[J]. Curr Pharm Des，2003，9（1）：39-49.

[4] Han L，Sakamoto H，Sakuraba M，et al. Geno toxicity of microcystin-LR in human lymphoblastoid TK6 cells[J]. Mutat Res，2004，557（1）：1-6.

[5] 宋淑菊，马骥良，潘丽恩，等. 类风湿关节炎患者肺间质病变的临床研究[J]. 中华风湿病学杂志，2005，9（2）：81-85.

[6] Blaney Davidson EN，Vitters EL，Mooren FM，et al. Connective tissue growth factor/CCN2 over expression in mouse synovial lining results in transient fibros is and cartilage damage[J]. Arthritis Rheum，2006，54（5）：1653-1661.

（收稿日期：2012-11-15）