间接酶联免疫吸附法与假病毒中和法检测HPV疫苗免疫原性的相关性

摘要：目的 分析间接酶联免疫吸附法与假病毒中和法检测HPV疫苗免疫原性的相关性。方法 选取医院2013年4月～2014年1月收治的100例HPV感染患者，并选择同期接受HPV16/18型双价疫苗（Cervarix）免疫自然感染的患者100例，抽取其血清作为研究标本，应用酶联免疫吸附法和假病毒中和法对血清样本进行抗体滴度检测。结果 对于自然感染HPV病毒检测结果方面，其血清样本HPV16型抗体的滴度系数为0.519，HPV18型滴度系数为0.613，而对于接种疫苗后血清样本中，去HPV16型抗体滴度系数达到0.671，HPV18型为0.879，两组检测方法在进行HPV疫苗免疫原性检测中具有相关性（P

关键词：假病毒中和法；间接酶联免疫吸附法；HPV疫苗免疫原性

据相关医学方面文献报道，高危性人瘤病毒（HPV），临床发生感染极其容易引起患者发生宫颈癌疾病；对此可以应用HPV预防性疫苗，在临床预防HPV感染方面发挥一定影响[1]。本研究分析了临床间接酶联免疫吸附法与假病毒中和法检测HPV疫苗免疫原性的相关性。

1资料与方法

1.1一般资料 针对在医院2013年4月～2014年1月收治100例HPV感染患者，以及接受HPV16/18型双价疫苗（Cervarix）免疫后的100例自然感染患者，将其作为本次研究对象，抽取患者的血清，在对样本进行随机编号后，比较间接酶联免疫吸附法与假病毒中和法检测血清样本中HPV疫苗免疫原性的相关性。

1.2方法 间接酶联免疫吸附法检测中，可以将HPV 16 VLP与HPV18 VLP，将其分别稀释为2.7 ug/ml，然后，可以对于每孔的100 μl包被，将其放置在4℃酶标板上，孵育3 d，然后可以用0.2%PBST进行洗涤；在三遍之后可加入PBS，并在室温内封闭90 min之后，再洗涤4次；并运用0.36N硫酸终止显色反应后，将其防治在96孔板中，进行读数，并设定其波长参数450 nm，参比波长为620 nm。可以用SoftMax Pro 5.2版本软件，拟合绘制标准曲线，被计算出标本血清抗体的滴度。

假病毒中和法检测中，可以将1.5×104个/孔人293FT细胞，接种到96孔细胞培养板中，然后放置在37℃的恒温环境之中，并培养8 h后，将血清进行10%DMEM稀释，并同时能够在96孔板对倍稀释8个不同梯度的稀释液，取60 μl的稀释血清样本，稀释到MOI=0.2范围，然后可以在4℃环境内进行孵育1 h，并去除100 μl血清与假病毒的混和液，加入96孔细胞培养板之中，在荧光显微镜下进行结果观察，分析检测结果。

1.3统计学处理 对于本次研究结果处理，可以采用统计学SSPS 20.0版本软件，采用Pearman相关性分析ELISA法和PBNS法测定的抗体值，且以结果P

2结果

采用Pearman相关性分析，对临床间接酶联免疫吸附法与假病毒中和法测量的血清滴度进行统计分析，见图1。

临床中，在间接酶联免疫吸附法与假病毒中和法检测血清的样本之中，其中对于自然感染的HPV病毒血清样本，其中的HPV16型抗体滴度相关系数为0.519，HPV18型相关系数达到0.613，在接种疫苗后的血清样本检测之中，HPV16型的抗体滴度相关系数0.671，HPV18型为0.879其，两组检测方法在进行HPV疫苗免疫原性检测中具有相关性（P

3 讨论

相关研究中指出，基于HPV疫苗，不仅是一种具有诱导型与特异性的中和抗体，同时，在临床中也可以有效的保护机体免疫力，使机体免受到病毒的侵害[3]。采取间接酶联免疫吸附法与假病毒中和法，检测同一批样本，比较分析检测结果，可以为疫苗免疫原性评价提供参考依据[4]。在检测血清样本中抗HPV疫苗免疫原性方面，应用间接酶联免疫吸附法与假病毒中和法，为进一步临床评价HPV疫苗免疫效果提供参考。间接酶联免疫吸附法与假病毒中和法在检测HPV疫苗原性方面，有相关性（P

本研究结果充分证实，针对HPV感染中，应用间接酶联免疫吸附法与假病毒中和法，在检测HPV疫苗免疫原性方面具有相关性，可见采取HPV疫苗预防可发挥重要作用。

参考文献：

[1]赵慧，李娟，潘晖榕，等.重组人瘤病毒疫苗免疫原性检测方法的比较[J].中国生物制品学杂志，2013，26（7）：1006-1009.

[2]凌辉生，储迅涛，曾敏霞，等.人细小病毒B19IgM抗体间接ELISA检测方法的初步建立[J].检验医学与临床，2014，（5）：583-585，588.

[3]高煜，王东，郭琴，等.喉鼻咽重复癌中病毒感染初探[J].山西医药杂志，2011，40（3）：236-238.

[4]孙丽媛，张婷，于世荣，等.重组人瘤病毒16型L1 VLP的初步纯化、鉴定及免疫效果的初步研究[J].国际生物制品学杂志，2010，33（4）：169-172.

[5]Yu Shirong，Sun Liyuan，Liu Jun et al.Expression of recombinant human papillomavirus type 58 L1 protein in Sf9 cells was optimized for[J].International Journal of biological products，2010，33（3）：128-133.编辑/肖慧