胆木总生物碱的含量测定方法研究

[摘要] 目的 建立胆木总生物碱含量测定方法。 方法 采用紫外分光光度法测定胆木中总生物碱的含量。 结果 建立了胆木总生物碱的含量测定方法，测定波长为222 nm，标准曲线为Y = 62.841X + 0.036 3，R = 0.999 7（n = 9），线性范围0.000 96～0.019 2 mg/mL，平均回收率为100.45%，RSD为0.62%（n = 9）。 结论 该方法稳定、可靠、专属性强，可用于胆木总生物碱的含量测定，为胆木的质量控制提供了新方法。

[关键词] 胆木；总生物碱；含量；测定

[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2012）06（c）-0067-02

胆木（Nauclea officinalis Pierrc ex Pitard），又名乌檀、药乌檀、黄羊木，为茜草科乌檀属乔木，主要分布于广东、广西和海南等地。胆木性味苦、寒，具有清热解毒、消肿止痛之功效。文献报道胆木的主要化学成分为吲哚类生物碱成分[1]，笔者曾对其中一种生物碱进行含量测定[2]，但不能说明胆木所含总生物碱的情况，故本文对胆木总生物碱的含量进行测定，建立总生物碱的含量测定方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器

V-650紫外分光光度计；HH—W420三用恒温水浴箱； KQ2200E 医用超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 试药

胆木采于海南省五指山地区，由兴隆植物所李荣涛鉴定；异长春花苷内酰胺对照品（南京中康，纯度98.01%）。其他试剂均为分析纯。

2 方法

2.1 标准品溶液的制备

精密称取异长春花内酰胺碱对照品适量，加70%的乙醇超声溶解，制成每1毫升含异长春花内酰胺碱0.009 6 mg的标准品溶液。

2.2供试品溶液的制备

称取胆木药材粉末0.5 g，精密称定，50 mL 70%乙醇回流提取40 min，放凉，补足失重，摇匀，静置。吸取上清液2 mL，至100 mL容量瓶，70%乙醇定容，即得供试品溶液。

2.3 吸收波长的确定

精密吸取供试品溶液及对照品溶液适量，以相应试剂70%乙醇为空白对照，在200～600 nm波长范围内进行扫描，结果显示供试品溶液及对照品溶液在222 nm均有最大吸收值，且紫外吸收波谱基本相同，故选择取222 nm为测定波长，见图1，图2。

图1 标准品溶液紫外吸收图谱

图2 供试品溶液紫外吸收图谱

2.4 标准曲线的建立

精密吸取对照品溶液0.5，1，2，3，4，5，6，8，10 mL，分别至25 mL容量瓶中，70%乙醇定容，于222 nm下测定吸光度值，以标准品浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，计算得标准曲线方程Y = 62.841X + 0.036 3，R = 0.999 7（n = 9），线性范围0.000 96～0.019 2 mg/mL，见图3。

图3 异长春花内酰胺碱标准曲线

2.5 精密度试验

取对照品溶液在222 nm波长处连续6次测定吸光度，RSD为 0.48%，表明仪器精密度良好，结果见表1。

表1 精密度测试结果

2.6 稳定性试验

取供试品溶液在波长222 nm 处进行测定，并在室温下每隔2 h 测定1 次，连续测定7 次。结果见表2，表明供试品在10 h稳定，其RSD为0.30%。

表2 稳定性测试结果

2.7 重现性试验

精密称取同一批号的样品5 份，照“2.2”项下制备样品溶液，并按样品测定方法，测定5 次，RSD为0.83%，表明样品的重现性良好。

2.8加样回收试验

精密称取0.2 g干燥至恒重的胆木样品粉末3份，至100 mL圆底烧瓶，各加20 mL浓度为0.083 04 mg/mL的对照品溶液（即加入1.660 8 mg标准品），按“2.2”供试品溶液制备方法制备，每份3个平行样，平均回收率为100.45%，RSD为 0.62%，结果见表3。

表3 加样回收率

3 结果

本文对胆木总生物碱含量测定的方法进行了考察，最终确定了胆木中总生物碱含量测定方法。采用紫外分光光度法，选取222 nm为测定波长，进行含量测定，确定标准曲线方程Y = 62.841X + 0.036 3，R = 0.999 7（n = 9），线性范围0.000 96～0.019 2 mg/mL，精密度，RSD为0.48%，表明仪器精密度良好；稳定性RSD为0.30%，表明供试品在12 h稳定；样品重现性RSD为0.83%，表明样品的重现性良好；平均回收率为100.45%，RSD为0.62%。该方法简便，可靠，可用于胆木总生物碱的测定，为胆木的质量控制提供依据。

4 讨论

实验之初笔者同时也对酸性染料比色法进行考察，但是样品经过显色后，在可见光区无吸收峰，故没有采用酸性染料比色法进行含量测定。

本实验同时采用70%乙醇回流提取样品，而未采用酸提碱沉法，是由于胆木内所含的总生物碱为吲哚类生物碱，其分子结构中存在苯胺型和酰胺型共轭效应，异长春花苷内酰胺不但没有碱性，还呈现一定的酸性，因此应用常规的酸提碱沉法无法提取得到胆木内总生物碱，故采用了70%乙醇回流提取胆木总生物碱[3-8]。

[参考文献]

[1] 宣伟东，卞俊，陈海生.中药胆木的化学成分[J]. 中国天然药物，2005， 5（3）：3.

[2] 杨卫丽，刘明生，毛彩霓，等. 胆木的生药学研究[J]. 中药材，2008，31（9）：1324.

[3] 张俊清，毛彩霓，杨卫丽，等. 胆木不同部位异长春花苷内酰胺的含量研究[J]. 药物分析杂志，2008，15（10）：47.

[4] Ch P. Vol 1，2005 Edition[M]. Beijing： Chemical Industry Press， 2005：88-89.

[5] 高卫东，高英，李卫民. 百部总生物碱含量测定方法的研究[J]. 天然产物研究与开发，2007，15（5）：124-126.

[6] 符建，邝少铁，曾祥周，等. 胆木浸膏片的抗炎作用研究[J]. 海南大学学报（自然科学版），2002，20（1）：54.

[7] 宣伟东，卞俊，陈海生. 胆木生物碱成分研究[J]. 中草药，2007，38（2）：170.

[8] 李明慧，丁岗，沈鸣，等. 胆木及其制剂中异长春花苷内酰胺的分离鉴定和含量测定[J]. 中国天然药物，2006，4（2）：104.

（收稿日期：2012-05-22 本文编辑：马 双）