银杏叶黄酮的提取工艺研究

【中图分类号】R284.2【文献标识码】A【文章编号】1672-3783（2012）11-0449-01

【摘要】：用分光光度法测定重庆市涪陵区太极集团的银杏叶中的黄酮含量，从溶剂选择、提取时间、料液比等几个因素探讨了银杏叶黄酮的提取工艺。结果表明：水提取银杏叶黄酮的效果最好，重现性最好；料液比为1：5时最合适；提取时间2个小时效果最好。

【关键词】：银杏叶黄酮提取

1引 言

银杏（GinkgobilobaL）树又称白果树和公孙树，属银杏科银杏属植物，原产我国，是当今地球上最古老的树种之一。我国的银杏拥有量占世界总量的70% 以上，主要分布在江苏、山东、浙江、安徽、福建、江西、河北、河南、湖北、湖南、四川、贵州、广西和广东等省资源丰富。国外利用银杏叶标准提取物治疗心脑血管及外周血管循环障碍性疾病取得了显著疗效[1]。突发性耳聋中医发病机制多为气滞血瘀，银杏叶具有活血化瘀的作用[2]今天，银杏叶提取物注射液已广泛用于心脑血管病的治疗探讨其可能机制[3]抑制血小板活化因子、抗氧化、抗肿瘤等药理作用[4-8]近年来，对银杏叶黄酮的提取和测定方法研究十分活跃[9]对银杏叶黄酮类化合物提取与测定研究进行系统总结，可以有针对性地加强银杏叶黄酮研究开发的力度，提高银杏叶提取物产品在国际市场的竞争力，使我国银杏开发事业跻身于世界先进行列。

但是国内用分光光度法测定因提取条件不同对提取液中黄酮含量的影响还很少，介于此种情形，我们采用分光光度法测定不同条件下银杏叶中黄酮含量的变化，并对结果进行讨论。

2提取黄铜的过程

2.1材料与器材

2.1.1原料：　银杏叶（2011年10月12日采于太极集团）

2.1.2器材： 　比色管、移液管、恒温水浴锅、圆底烧瓶、球形冷凝管、直管、胶管、蠕动泵、滤纸、比色皿、紫外分光光度计、电子天平。

2.1.3试剂：　乙醇、石油醚、氢氧化钠、亚硝酸钠，硝酸铝。

2.2实验方法

2.2.1银杏叶样品的预处理

将采摘的新鲜银杏叶进行粉碎，粉碎细度为5mm。按照单因素实验从提取时间、提取溶剂、料液比三个因素，每份银杏叶25g，共12份。

2.2.2.黄酮含量的测定原理与方法

2.2.2.1黄酮含量的测定原理

以芦丁作为标准物质，在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下，黄酮类化合物与铝盐生成螯合物，加入氢氧化钠溶液后显红橙色，在510nm波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定律。

2.2.2.2黄酮含量的测定方法

试样处理：取 10ml容量瓶5支，分别量取每组单因素的供试品溶液（0.0ml、0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml）分别放入10ml容量瓶中，分别向其中加入5%的亚硝酸钠0.5ml摇匀，放置6分钟再向其中加入10%的硝酸铝0.5ml放置6分钟再向其中加入4%的氢氧化钠4ml，用60%的乙醇定容，放置15分钟在紫外风光光度计510nm处检测，记录数据。

3提取黄铜的工艺

3.1料液比选择

将称量好的三组25g银杏叶放入圆底烧瓶，料液比分别按照1：5、1：6、1：7的比例投放80%的乙醇回流提取两个小时，将回流物进行过滤，收集滤液将其进行蒸馏，待圆底烧瓶的液体体积剩余25ml左右时停止蒸馏，将圆底烧瓶的液体用滤纸过滤之后再用超滤膜（直径为47mm）过滤得到供试品（含黄酮的提取液）目的是得到更纯的供试剂。将回收的乙醇收集放入指定的试剂瓶。

3.2溶剂选择

将称量好的三组25g银杏叶放入圆底烧瓶，投料比按1：6的比例分别向其中加入石油醚、80%乙醇、纯化水。分别回流两个小时，将回流物用纱布进行过滤，得到的滤液再进行蒸馏，待圆底烧瓶的液体大约剩余25ml左右停止蒸馏，（水做提取剂的除外）。

3.3提取时间选择

将称量好的6组25g银杏叶放入圆底烧瓶，投料比按1：6乙醚提取1个小时，80%乙醇提取1小时，水提取1小时；同样再按1：6的乙醚提取1.5小时，80%乙醇提取1.5小时，水提取1.5小时。将回流物用滤布过滤得到滤液，再将滤液进行蒸馏分别待烧瓶中的液体剩余25ml左右时停止蒸馏（水作提取剂的不用蒸馏）将蒸馏的液体用滤纸过滤，得到的滤液进行超滤得到供试品。将回收的试剂放回指定的试剂瓶。