丹参对不同时间窗急性脑梗死中CGRP、ET含量的影响

【摘要】 目的 研究丹参对两种时间窗的脑梗死急性期（ACI）患者的作用机制与其降钙素基因相关肽（CGRP）、血管内皮素（ET）血清含量变化的相关性寻找丹参的最佳治疗时间窗。方法 依据其入院时的发病时间，40例病例均衡地分为两大组，其中发病24 h内入院者为早期组，发病24 h～7 d入院者为晚期组，每大组又分为观察组和治疗组两小组，每组患者均于入院前、疗程完成时测量CGRP、ET含量。结果 疗程完成时测量早期治疗组脑梗死患者CGRP含量高于早期对照组（P＜0．05），但是ET含量低于早期对照组（P＜0．05）； 早期治疗组ET含量也明显低于晚期治疗组（P＜0．05）。 结论 研究提示丹参治疗脑卒中有时间依赖性，它能影响ET、CGRP含量变化，在早期时间窗丹参能通过抑制ET和升高CGRP起到保护作用。故发病24 h入院为其最佳治疗时间窗。

【关键词】 脑梗死； 丹参； 时间窗； 降钙素基因相关肽； 血管内皮素

Clinical study on the effect of the radix salviae miltiorrizae on cerebral ischemia during two different time-windows and the change of levels of the CGRP and ET

LI Fang-ping,HUANG Zheng-de,XIAO Bi-yue.

Department of Geratology, The 458th Hospital of People’s Liberation Army，Guangzhou 510602，China

【Abstract】 Objective To investigate the association between the change of levels of the Calcitonin-gene-related and endothelins in blood and the effect of the radix salviae miltiorrizae(RSM) on cerebral ischemia during two different time-windows. Methods Based on the time of the onset of the disease, 40 cases were in equilibrium divided into two big groups: the early-time group (in 24 hours) and the late-time group (after 24 hours but before 7 days) ; each group was randomly divided into two little groups, which were testing group and contrasting group . The testing group would be applied with RSM. Every case was measured the levels of CGRP、Et before the course of treatment, and end of the course of treatment. Results After the course of treatment, in acute cerebral infarction (CI) early-time testing group(ETG),the level of CGRP was higher than that in the early-time contrasting(ECG)(P＜0．05) ,but the level of ET was especially lower than that in late-time testing group (P＜0．02). Conclusion The results suggested that RSM had different effect on different time-window CI cases. and which also affected the levels of CGRP、ET. RSM could have a neuroproctive role by the decreasing ET and increasing CGRP during the early-time window.

【Key words】 Cerebral ischemia； Salviae miltiorrhizae； Time-window；Calcitonin-gene related； Endothelins

丹参为祖国医学中治疗缺血性脑血管病常用的有效的药物，其对缺血后脑组织有诸多保护作用。为了进一步了解丹参的治疗脑缺血的作用机制，同时为了进一步研究治疗急性脑梗死的最佳时间窗，本研究选择协调脑血管收舒的最重要的两种神经肽CGRP、ET作为观察的机体指标。通过探讨两种不同时间窗CGRP、ET含量的变化，来分析丹参的作用机制及治疗的最佳时间窗。

1 资料与方法

1．1 一般资料 急性脑梗死患者共40例，年龄均为40～75例，男22例，女18例，年龄40～70岁，平均（58．42±10．13）岁。疗程为21 d。正常人组10例，为门诊健康体检者。全部组别在年龄、性别、既往史、就诊时间、一般情况、病因等方面经统计学处理，均无显著差异，两组有可比性。

1． 2 诊断标准 全部病例符合1996年全国脑血管学术会议修订的诊断标准。并经CT证实为脑梗死患者，并依据中华神经科杂志1996；29（6）：381记载[11]“脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准”，所有病例均为中型患者。

1．3 排除标准 排除严重肝肾功能不全者及合并其他严重疾患如心肌梗死等。

1．4 分组方法 首先，依据时间窗分层：发病24 h入院者为早期组（20例），24 h~7 d 内入院者为晚期组（20例），然后，这两大组再分别按照完全随机法，依据随机数字表，根据受实者进入研究时间先后顺序，依次随机分组为：早期对照组、早期治疗组、晚期对照组、晚期治疗组，每组10例，

1．5 治疗方法 对照组：20%甘露醇脱水降颅压，常规降血压、血糖、护胃、消炎。治疗组：除以上常规治疗外，另用5%葡萄糖250 ml+丹参注射液20 ml静脉滴注，1次/d，丹参注射液为上海第一制药厂产品，观察疗程为21 d。

1．6 标本收集和处理 所有病例于入院后次日及第22天（疗程结束时）清晨取肘静脉血5 ml，其中4 ml血液加入含7．5%EDTA二钠30 ul和抑肽酶40 ul的试管中，混匀，4℃，3000转/min离心10 min，分离血浆，于-70℃保存，测定前，使样本置于冷水中复融，再次4℃ 3000转/min，离心5 min，取上清液分为2份，分别测ET、CGRP；所有测定方法严格按试剂盒内附说明书进行。

1．7 试剂及仪器 试剂均购自北京北免东雅生物技术研究所，设备由湖南中医药大学放免中心提供。

1．8 统计学方法 采用SPSS11．0软件处理，统计方法为单因素方差分析及q检验。

2 结果

从表1所见：入院时测定所有ACI病例ET含量均高于正常组，CGRP含量低于正常组。疗程结束时测定：早期ACI患者其治疗组CGRP明显高于对照组（P＜0．05）、ET明显低于对照组（P＜0．03），而早期治疗组中ET明显低于晚期治疗组（P＜0．02），而晚期入院者中，治疗组CGRP、ET与对照组无明显差异。

3 讨论

丹参作为活血化瘀的药物，能改善微循环，减轻缺血后脑水肿，增加脑内ATP含量，抑制血小板的释放反应，改善血液流变学及微循环障碍和缺血、缺氧所致的代谢障碍，丹参对神经细胞的保护作用在科研及临床中都被国内外媒体所报道[1]，然而，关于丹参对ACI患者CGRP、ET分子影响却缺少相关研究。本科研发现，丹参对ACI患者CGRP、ET血清浓度的改变具有一定的影响，而且这种影响具有时间窗的依赖性。本研究过程中发现，对于起病24 h内入院者，丹参具有强大的影响力，能明显地升高CGRP、降低ET，而对于24 h~1周内入院者，丹参对CGRP、ET等神经肽因子影响都并不明显。

ET是目前所知最强的内源性血管收缩因子，脑微血管内皮细胞可合成和释放ET[2]。正常情况下，ET可被内皮细胞降解，同时内皮细胞还可分泌血管舒张物质以抵抗ET的缩血管效应，共同调剂血管的紧张度[3]。CGRP是与ET作用截然相反的血管活性肽，它是迄今可知体内作用最强的舒血管活性物质[4]，体外实验证明急性期血浆及脑脊液中ET显著升高，而CGRP合成不足，致使CGRP对脑细胞保护减弱，细胞内钙离子超量，导致继发性脑损伤。等量CGRP能明显拮抗等量ET引起的血管收缩且扩张作用持久。ET、CGRP的协调均衡在脑血管疾病中具有重要作用[5-7]。本研究发现，丹参通过升高CGRP同时抑制ET来舒张血管，改善脑血管的痉挛，使脑组织保证正常的供血。改善脑组织缺血缺氧的状态。本研究提示对CGRP、ET浓度的调节，可能是丹参作用机制之一。

本研究中ACI患者在入院时的CGRP水平均低于正常组，而ET均高于正常组，说明CGRP、ET的改变是ACI病理生理变化过程中的一些因素，这与科研资料吻合[6-7]。但对于早期与晚期两种时间窗入院者，本研究却发现入院时CGRP、ET无明显差异，这一方面可能与患者病情及个体素质有关也有可能由于样本数不大而致差异不显著有关。若扩大样本重复研究，应当会发觉其中细微的改变。但本研究证实丹参对早期脑梗死（发病24 h内入院）的CGRP、ET的影响是肯定的，故而，发病24 h内入院为其最佳时间窗。

本研究发现，入院第22天测定的晚期ACI治疗组与对照组ET、CGRP并无明显差异，分析其原因可能比较复杂，已有临床表明[8]，缺血性脑卒中后1～3 d ET，水平显著升高，首先是脑脊液内ET在1 h内升高，而在血浆中ET尚未升高，同时发现，ET与脑梗死损伤的体积大小相关；同样CGRP亦有时间窗的依赖性，有临床科研[9-10]证实：CGRP在ACI发病24 h内即显著降低，2～3 d与4～7 d进一步缓慢下降，8～15 d开始升高，15 d后接近正常，而且随病情严重程度，血CGRP水平显著降低， ACI患者ET、CGRP平衡失调导致进一步继发性脑损伤。而随着ACI病程日久CGRP、ET逐渐自动调节致正常，故而难以反映出丹参的影响。

CGRP、ET这种复杂的时间依赖性，在某方面可以阐释，晚期ACI患者治疗组与对照组血清中CGRP、ET无明显差异性的原因。

同时，丹参的调节机制应当是多途径的，对于晚期时间窗ACI患者，丹参在CGRP、ET方面并未体现出明显的影响，可推测它对晚期时间窗ACI的保护也许是通过其他神经肽的作用来体现。这就有待于进一步深入挖掘。

参 考 文 献：

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［3］ Ehrenreich H, Schilling L. New developments in the understanding of cerebral vasoregulation and yasospasm: the endothelin-nitric oxide network.Cleve-Clin J Med, 1995,62920:105-106.

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［5］ 冯斌, 韩树生，王丽萍,等. 急性颅脑损伤患者TNF、ET及CGRP含量变化及意义. 中华神经外科疾病研究杂志,2007,6(6):520-522.

［6］ Giuffrida R, Bellomo M, Polizzi G, et al.Ischemia-induced changes in the immunoreactivity for endothelin and other vasoactive peptides in the brain of the Mongolian gerbil. J Cardiovasc Pharmacol,1992,20(12):41-44.

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［10］ 冯斌, 刘福增，韩树生,等.TNF、ET及CGRP在急性颅脑损伤中的作用.中国误诊医学杂志,2007,7(21):5008-5009.

［11］ 全国第四届脑血管病学术会议.脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准（1995）.中华神经科杂志，1996，29（6）：381.