复方丹参注射液中原儿茶醛的含量测定

摘 要 目的：建立薄层层析-紫外分光光法测定复方丹参注射液中原儿茶醛的含量，控制复方丹参注射液的质量。方法：以原儿茶醛为对照品，展开剂为苯-乙酸乙酯-甲酸(8∶5∶0.8)分离得原儿茶醛，采用紫外分光光度法，检测波长281nm原儿茶醛在0.55～4.95μg/ml范围内线性关关系良好，r=0.9998，加样回收率为97.5%～102.5%，RSD为1.6%。结果：3个厂家的3个样品中原儿茶醛的含量差异无显著性(P>0.05)。结论：对复方丹参注射液的质量应作进一步调查。

关键词 复方丹参注射液 质量考核 原儿茶醛含量测定 薄层层析-紫外分光光度法

材料与仪器

材料：苯、乙酸乙酯、甲酸，均为分析纯。对照品：原儿茶醛。薄层层析硅胶G，化学纯。水为蒸馏水。复方丹参注射液(2ml/支)。

仪器：752紫外可见分光光度计，微量点样器(5μl)，分析天平。

薄层层析条件的考察：①对照品溶液的制备：精密称取原儿茶醛对照品1.1mg，置10ml容量瓶中，加水溶解稀释至刻度，摇匀即得浓度为0.11mg/ml。②展开条件的选择：薄层板为0.3%CMC-Na的硅胶G板，105℃活化0.5小时，置干燥器中备用。精密吸取复方丹参注射液10μl点于硅胶G-CMCNa薄层板上，另取原儿茶醛对照品溶液点于复方丹参注射液斑点的一侧。以苯-乙酸乙酯-甲酸(8∶5∶0.8)为展开剂，展开约15cm。取出，晾干，浓氨水显色。在此条件下原儿茶醛分离完全。

含量测定方法的建立：①对照品溶液的制备：按上述方法制备得浓度0.11mg/ml。②供试品溶液的制备：精密吸取3个厂家复方丹参注射液各20μl，点于同一硅胶G-CMCNa(0.3%)薄层板上，另取对照品溶液10μl点于供试品斑点一侧作为对照。以苯-乙酸乙酯-甲酸(8∶5∶0.8)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干。在紫外灯(365nm)下观察，定位。刮取与对照品斑点相应位置上的供试品各斑点，分别各精密加入5ml水溶解，过滤，即得各原儿茶醛供试品溶液。③检测条件的选择：文献记录原儿茶醛在281nm处吸光度最大。精密量取对照品溶液1ml置10ml的容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。以蒸馏水为空白对照，在281nm左右测定吸光度，结果281nm处吸光度为最大。④标准曲线的制备：精密量取对照品溶液5ml置10ml的容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。分别精密量取0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml对照品溶液，置10ml的容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。使浓度分别为0.55、1.65、2.75、3.85、4.95μg/ml。

以蒸馏水为空白对照，在281nm波长处测吸光度，以吸光度(A)为纵坐标，浓度(C)为横坐标，进行回归分析，回归方程为：A=2.6×10-3+0.1015C，r=0.9998(n=5)。

结果表明，原儿茶醛在浓度0.55～4.95μg/ml 范围内线性关系良好。

稳定性试验：精密吸取复方丹参注射液20μl，点于硅胶G-CMCNa(0.3%)薄层板上，另取对照品溶液10μl点于供试品斑点一侧作为对照。以苯-乙酸乙酯-甲酸(8∶5∶0.8)为展开剂，展开约1cm，取出，晾干。在紫外灯(365nm)下观察，定位。刮取与对照品斑点相应位置上的供试品斑点，精密加入5ml水溶解，过滤，即得原儿茶醛供试品溶液。

刮取同一薄层板上与供试品斑点等面积的空白硅胶G-CMCNa(0.3%)，精密加入5ml水溶解，过滤，取滤液作为空白对照。

取供试品溶液和对照品溶液分别在281nm波长处测吸光度，隔30分钟测定1次，连续测定3小时，结果在3小时内吸收度稳定。

精密度试验：取同一供试液连续测定6次，结果表明精密度良好。

含量测定：分别精密吸取3个厂家的丹参注射液各20μl，点于硅胶G-CMCNa(0.3%)薄层板上，另取对照品溶液10μl点于供试品斑点一侧作为对照。以苯-乙酸乙酯-甲酸(8∶5∶0.8)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干。在紫外灯(365nm)下观察，定位。刮取与对照品斑点相应位置上的各供试品斑点，各精密加入5ml水溶解，过滤，即得原儿茶醛供试品溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。

刮取同一薄层板上与供试品斑点等面积的空白硅胶G-CMCNa(0.3%)，精密加入5ml水溶解，过滤，取滤液作为空白对照。

取样品在281nm波长处测吸光度，由标准曲线计算供试品中原儿茶醛的含量。测定结果见表1。

加样回收率试验：精密取含量测定后供试注射液溶液5ml，置于10ml量瓶中，分别加入对照品1.0、1.5、2.1mg，加水至刻度，摇匀，按“含量测定”项下操作，测定，计算回收率，结果见表2。

结 果

点样斑点直径应控制在2～3mm，有较好的分离效果。原儿茶醛为丹参水溶性酚酸类成分，在展开剂中加入少量甲酸，抑制酸的解离。原儿茶醛在0.55～4.95μg/ml 范围内线性关系良好，r=0.9998。平均含量为0.174mg/ml，加样回收率为97.3%～102.3%，RSD为1.61%。

结 论

复方丹参注射液的主药丹参的有效成分为酯溶性的二帖醌类和水溶性的酚酸类[1]，均具有心血管方面的作用，且水溶性成分原儿茶醛较二帖醌类更能显著增加冠脉血流量和对抗ADP所致的血小板聚集。为保证药品质量，本文参考有关文献[2，3]，建立了薄层层析-紫外分光光度法分离测定了榆林市上市的3个厂家的复方丹参注射液中的原儿茶醛的含量。

本资料研究结果，榆林市上市的复方丹参注射液中原儿茶醛的含量无显著性差异(P>0.05)，有待于做进一步调查。

参考文献

1 刘燕，谢培德，王宝琴.丹参及其制剂质量的评价方法.中国中药杂志，1990，15(3)：31-34.

2 蔡梅，季一兵，骆雪芳，等.高效液相色谱法测定香丹注射液中丹参素和原儿茶醛的含量.海峡药学，2004，16(3)：54-55.

3 王振鲁，于立佐.薄层-紫外分光光度法测定复方丹参膏中原儿茶醛的含量.山东医药工业，1999，18(6)：7-8.