复方罗布麻片(Ⅱ)中蒙花苷的含量测定研究

【摘要】目的测定复方罗布麻片（Ⅱ）中蒙花苷的含量。方法采用高效液相色谱法，用C18柱（4.6 mm×200 mm，5 μm），用甲醇：水：冰醋酸（26∶23∶1）为流动相，检测波长：334 nm。结果蒙花苷在5.02～40.16 μg/ml的浓度范围具有良好的线性关系，r=0.9997（n=6），平均回收率为99.51%。结论方法简单、快速、灵敏、准确，并获得了满意的测定结果。

【关键词】

复方罗布麻片（Ⅱ）；蒙化苷；高效液相；含量测定

1概述

复方罗布麻片（Ⅱ）为常见治疗高血压药物，应用非常广泛。复方罗布麻片（Ⅱ）由野煎剂干粉、防己煎剂干粉、三硅酸镁、氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪、维生素B1、维生素B6等药物组成，主要用于治疗高血压，收载于《国家药品标准》化学药品第十一册[1]。现行标准中均未收载蒙花苷含量测定项目。

本研究采用高效液相色谱法（HPLC）等现代分析手段，对上述制剂中的蒙花苷含量测定方法进行研究。并优选出一种科学、方便的分析方法，为药品质量标准的修订和生产工艺的改进提供科学依据。

2立题意义

现行药品标准、药典、期刊杂志中无复方罗布麻片（Ⅱ）中蒙花苷含量测定方法。针对市场上药品存在的质量问题，杜绝厂家的偷工减料行为，严格药品标准，规范药品市场，更好的保障人民群众的用药安全，经仔细研究，制定了全面的测定复方罗布麻片（Ⅱ）中蒙花苷含量的方法。

3实验部分

3.1高效液相色谱法测定复方罗布麻片（Ⅱ）中蒙花苷的含量

蒙花苷是野中含有的主要成分，是复方罗布麻片（Ⅱ）中起降压作用的药效成分。本实验参照药典标准野中蒙花苷鉴别及含量测定方法，设计出了合理、可行的复方罗布麻片（Ⅱ）中蒙化苷含量测定的方法。

3.2主要实验仪器[2-4]

戴安P680高效液相色谱仪，四元梯度泵，色谱柱：Kromasil C18（200 mm×4.6 mm，5 μm），20 μl标准进样器。

3.3实验条件[3-5]

流动相的选择：根据蒙花苷的溶解的性质，参考有关文献，按甲醇、水、醋酸不同比例分别进行试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，选择甲醇：水：冰醋酸=26∶23∶1为流动相，其分离效果最好。

检测波长的选择：配制蒙花苷的标准溶液0.1 mg/ml，在不同波长测定，在334nm蒙花苷峰较大，基线平稳，确定为测定波长。流速：1.0 ml/min，吸收波长：334nm，外标法测含量。

3.4药材提取

精密称取野原药材43.6680 g，置于2000 ml烧瓶中，加水400 ml，水煮提取，连续提取三次。提取液滤过，取续滤液水浴蒸干，得4.6400 g野浸膏

3.5对照品溶液标准曲线线性关系考察

标准曲线制备：精密称取蒙花苷10.04 mg，置100 ml容量瓶，加流动相溶解并稀释至刻度。分别精密量取0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，微孔滤，进样20 μl，保留时间15 min，回归方程为：

y=2.60386x-0.43393r=0.9997 （n=6）

3.6系统适用性实验

精密称取105℃干燥至恒重的野50.6 mg、50.7 mg、50.78 mg置100 ml容量瓶甲醇溶解并稀释至刻度，称定重量加热回流三小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作供试品溶液。进样20 μl，记录色谱图。另精密称取蒙花苷10.04 mg，置100 ml容量瓶，加流动相溶解并稀释至刻度。微孔滤膜滤过，取20 μl进样，记录色谱图，计算含量，外标法测含量，含量为标示量的。

3.7空白干扰试验

精密称取罗布麻药材28.3966 g，置于2000 ml烧瓶中，加水400 ml，水煮提取，连续提取三次.提取液过滤，取续滤液水浴蒸干，得6.5366 g罗布麻叶浸膏.精密称定罗布麻叶浸膏0.5 g，置具塞锥形瓶中，精密加80%甲醇50 ml，密塞，称定重量，加热回流1 h，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失得重量，摇匀，滤过.吸取滤液进样20 μl，结果罗布麻叶中槲皮素成分在波长334 nm对蒙花苷无干扰.取防己粉适量，作干扰实验，另取盐酸异丙嗪对照适量，作干扰实验，结果表明在蒙花苷吸收波长处对蒙花苷无干扰.

3.8加样回收实验

3.8.1样品含量测定

取本品20片，除去糖衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于6片量），加甲醇100 ml超声溶解，加热回流三小时，过滤，取滤液，微孔滤膜滤过，进样20 μl，记录色谱图，另精密称取蒙花苷10.04 mg，置100 ml容量瓶，加流动相溶解并稀释至刻度。微孔滤膜滤过，取20 ul进样，记录色谱图，计算含量，外标法测含量。RSD=0.692%，n=6；含量为标示量的。

3.8.2加样回收

精密称取105℃干燥至恒重的蒙花苷10.04 mg加入100 ml容量瓶。精密称定复方罗布麻片（Ⅱ）40片，分别取相当于复方罗布麻片（Ⅱ）4片三份，相当于复方罗布麻片（Ⅱ）2片五份，置50 ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度。称定重量加热回流三小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作供试品溶液。进样20 μl，结果见表1。