时间：2022-08-04 03:29:47
摘 要：建立气相色谱法测定氨磷汀中N，N-二甲基甲酰胺的残留量。采用RTX-624色谱柱（30m×0.53mm×3.0？滋m），以氮气为载气，FID检测，顶空进样，测定残留溶剂的含量。N，N-二甲基甲酰胺在34.9～251.1μg/mL浓度范围内线性关系良好，相关系数r=0.9992，回收率为 102.2%，最低检测限为13.53μg/mL。
关键词：氨磷汀；N，N-二甲基甲酰胺；气相色谱法 氨磷汀是一种细胞保护剂类药物，对大多数抗肿瘤细胞毒类药物或放射治疗所产生的毒副作用，能明显保护正常细胞免受损害，而不影响其抗肿瘤活性，且毒性较小，用于肿瘤放疗或细胞毒性化疗的辅助治疗。但由于在合成中使用了N，N-二甲基甲酰胺有机溶剂，根据目前新药审批对有机溶剂残留量的要求[1-3]，必须对原料药中的有机溶剂残留量进行考察，因此开发和制定了用顶空气相色谱法测定氨磷汀中有机溶剂残留量的方法，并进行了方法学验证。
1 仪器与试剂
气相色谱Agilent6890、顶空进样器Agilent7694E、配FID检测器。
氨磷汀（批号：120312 120313 120314），江苏正大天晴药业有限公司生产；N，N-二甲基甲酰胺、无水硫酸钠均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司。
2 试验方法
2.1 色谱条件
色谱柱：RTX-624（6%氰丙基苯基-94% 二甲基聚硅氧烷）毛细管色谱柱（30m×0.53mm×3.0？滋m）。进样口温度：150℃。检测器温度：280℃。柱温程序：70℃保持1分钟，然后以8℃/min升温至100℃，保持5分钟。最后以30℃/min升温至200℃，分流比：2：1。柱头压：4.0psi。进样量：1ml顶空气体；顶空瓶温度：80℃；定量环温度：100℃；传输管温度：110℃，样品平衡时间：30分钟。
2.2 方法与结果
2.2.1 专属性试验
分别对空白溶液（纯化水）、N，N-二甲基甲酰胺对照品溶液和供试品溶液单独进样，N，N-二甲基甲酰胺与相邻杂质峰的分离度为37.92，无干扰。
2.2.2 精密度试验
精密称取N，N-二甲基甲酰胺23.0mg至100ml容量瓶中，用纯化水稀释并定容，吸取2ml上述溶液至10ml顶空瓶中，加入0.2g无水硫酸钠；连续进样6针，计算峰面积的RSD为3.1%。
2.2.3 线性关系及检测限
取N，N-二甲基甲酰胺适量，精密称定，分别配制成一系列不同质量浓度的N，N-二甲基甲酰胺溶液。在上述色谱条件下，进样1mL，分别由质量浓度与对应峰面积求得线性回归方程，检出限以S/N=3计算，结果见表1，N，N-二甲基甲酰胺在34.9～251.1μg/mL浓度范围内线性关系良好，相关系数r=0.9992，最低检测限为13.53μg/mL。
表1 检测参数及检出限（N，N-二甲基甲酰胺）
2.2.4 样品测定及回收率
取不同批次的氨磷汀样品（批号：120312 120313 120314），按照溶剂残留方法，每份均称样配制12份供试品溶液，测定每份供试品溶液，每份进样1针，计算12份溶液中每个残留溶剂的平均含量及相应的RSD，并进行回收率实验，测定结果见表2，由表可知，产品中未检出N，N-二甲基甲酰胺，且12份样品的回收率在80%～120%之间，其RSD≤10%，符合规定。
2.3 讨论
由于氨磷汀不稳定，容易分解，不宜采用直接进样进行测定，故采用顶空进样毛细管气相色谱法，使样品分解的物质不导入GC系统，使GC的污染降到最低，便于维护。
在测定N，N-二甲基甲酰胺时，由于它限度低、沸点高，故在配制的样品溶液浓度较大，使纯粹的标准溶液与样品溶液出现了较大的活度系数上的差异，所以在双方都添加了大量的无水硫酸钠，从而减小了该误差。添加无水硫酸钠的另一个目的是利用盐析效应，提高N，N-二甲基甲酰胺的灵敏度。
3 结束语
本研究建立了原料药氨磷汀中N，N-二甲基甲酰胺的气相色谱法，实验结果表明，气相色谱法测定氨磷汀中残留溶剂N，N-二甲基甲酰胺是可行的，符合药典的相关规定。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010.
[2]高青，张吉，车宝泉.残留溶剂GC检查方法的验证与设计[S].中国药品标准，2007，8（3）：10～13.
[3]李会轻，栾成章，王尊文.顶空气相色谱法测定盐酸拉贝洛尔中有机溶剂残留量[J].中国药事，2010，24（4）：397～399.