EGFR和细胞角蛋白7在几种皮肤病中的表达及其意义

EGFR是一种转膜糖蛋白,广泛分布在许多正常和恶性上皮细胞中,其过度表达和自我激活可能与许多肿瘤的发生发展有关。Paget病是一种少见的恶性肿瘤,又称为湿疹样癌,分Paget病(mammary Paget disease,MPD)和外Paget病(extramammary Paget disease,EPD)两型。免疫组化研究表明Paget细胞表达癌胚抗原(CEA)[1]、癌基因蛋白(CD44)[1-3]和低分子细胞角蛋白(CK7)[4],而不表达高分子角蛋白(34beta E12)和黑色素瘤特异性抗体(HMB45)[1]。为了探讨EGFR和CK7在Paget病和外阴癌发病中的相互关系,我们对Paget病和外阴鳞癌等几种皮肤病组织进行免疫组化研究,结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源 常规石蜡包埋标本30例,均为女性,年龄35～78岁,平均(55±12)岁。其中MPD12例、外阴Paget病5例、外阴鳞状细胞癌(SCC) 8例,外阴慢性皮炎5例(作对照)。

1.2 方法

1.2.1 试剂来源 小鼠单克隆抗体CK7、EGFR及S-P(广谱)免疫组化试剂盒均购于福州迈新生物技术开发公司。

1.2.2 免疫组化方法 高温修复(枸橼酸)抗原,操作方法按试剂盒说明书进行,DAB显色。以PBS代替一抗作阴性对照。并用上皮膜抗原(EMA)、CEA和HMB45排除恶性黑色素瘤。

1.2.3 结果判定 显色后阳性细胞为细胞膜或胞浆出现棕黄色为准,整个切片阳性细胞占高倍镜下(×400倍)细胞的5%以上为阳性表达。染色强度分4级:不着色(-),淡黄色(+),棕黄色(2+),棕褐色(3+)。

1.2.4 统计学方法 计数资料比较采用χ2检验,等级资料的秩和检验采用SAS 6.0软件进行分析,取α=0.05。

2 结果

2.1 EGFR与CK7表达计数结果 EGFR和CK7在Paget病、SCC和对照组中的表达结果见表1。EGFR染色结果经Fish’s精确概率检验,MPD与对照组比较差异有统计学意义,P=1.616×104,而EPD、SCC与对照组之间由于样本例数的限制,尚不能认为它们之间有差别。CK7染色经等级资料的秩和检验,χ2=28.4716, P

表1

EGFR和CK7在Paget病和外阴鳞癌组织中的表达

组别例EGFR(+)CK7CK7

-++++++染色部位

MPD1212a00 0 12b细胞膜

EPD50 00 05b细胞膜

SCC80 11 60a细胞浆

对照5000 05细胞浆

注:a表示处理组与对照组之间比较,P

2.2 EGFR表达的组织学结果 EGFR主要定位于细胞膜及细胞浆。12例MPD中均伴有深层腺体的侵犯,所有Paget细胞及浸润到真皮内的肿瘤细胞不同程度地表达EGFR(1+-2+),而所有EPD、鳞癌的瘤细胞及外阴皮炎组织均不表达EGFR。在部分标本中可见毛囊、汗腺、顶浆分泌腺上皮中少数EGFR阳性细胞。

2.3 CK7表达的组织学结果 12例MPD 和5例EPD均表达CK7,主要定位于基底层或其上方的Paget细胞膜上,染色强度为3+;8例SCC中有7例CK7阳性表达,主要定位于棘

作者单位:519000中山大学附属第五医院

细胞层或颗粒层的癌细胞胞浆内,染色强度为1+-2+。癌细胞周围表皮角质形成细胞(keratinocyte,KC)大多数不表达CK7。 5例外阴皮炎颗粒层和棘层细胞均表达CK7,主要定位于增生的细胞浆内,染色强度为3+。

3 讨论

EGFR是一种转膜糖蛋白,广泛分布在许多正常和恶性上皮细胞中,其过度表达和自我激活可能与许多肿瘤的发生发展有关。EGFR是一种分子量为170Da的膜蛋白,由一个能结合表皮生长因子的胞外功能区、一个短的穿膜区和一个具有赖氨酸激酶活性的胞内区组成。EGFR表达于多种正常组织和恶性上皮细胞中,其过度表达和自我激活可能与许多肿瘤的发生发展有关。我们在MPD中观察到瘤细胞表达EGFR,而在EPD、鳞癌的瘤细胞中均无表达。

CK7分子量为54KDa,主要标记腺上皮和移行上皮,卵巢、肺和乳腺上皮为CK7阳性。新近发现CK是一类肿瘤标志物, 在某些皮肤肿瘤中表达不同,Bowen病、蕈样肉芽肿、SCC、基底细胞癌的皮损处表皮基底层KC对高分子量的角蛋白AE1反应减弱或消失,但棘层和颗粒层KC可与AE1反应。SCC、Paget病、Bowen病的瘤细胞可与AE1反应[4]。Watanabe等[7]认为抗上皮性角蛋白单克隆抗体在Paget细胞的鉴别诊断上较有意义,但并不能区分不同部位的EMPD。近年来有作者认为CK7是Paget细胞特异性的敏感指标[3]。

虽然Paget病是一种少见的上皮性肿瘤,需与湿疹、Bowen病、黑素瘤等疾病鉴别。EGFR结合CK7有助于区分Paget病的发生部位及来源。CK7在MPD、EPD及SCC中表达的形式不同,Paget病只在瘤细胞膜上表达,而SCC和皮炎对照组仅在KC胞浆内表达,推测MPD、EPD可能来源于腺癌上皮,而不是来源于表皮KC。CK7结合EGFR进行免疫组化染色有可能成为鉴别Paget病等外阴良恶性肿瘤的重要标志。

参 考 文 献

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