盐酸加替沙星胶囊的人体药代动力学及生物等效性评价

【摘要】目的：研究盐酸加替沙星胶囊在健康人体内的药代动力学特征及相对生物等效性。方法：采用标准二阶段交叉设计自身对照试验法，将18例男性健康志愿受试者随机分为两组，单剂量口服盐酸加替沙星胶囊400 mg（试验品）或盐酸加替沙星片400 mg（参照品），，以高效液相色谱法测定受试者服药24小时内血浆中加替沙星的经时浓度，计算加替沙星药动学参数。以双单侧t检验统计法比较两种盐酸加替沙星制剂Tmax、Cmax和AUC（0~24h）间的差异。结果：盐酸加替沙星在健康志愿者体内的处置为一级吸收单室模型，试验品和参比品的主要药动学参数Tmax（实测值）、Cmax（实测值）、AUC（0~24h）分别为：（1.51±0.35）小时和（1.53±0.38）小时，（3.46±0.79）和（3.43±0.92）mg/L，（34.51±8.43）和（33.04±10.20）mg/（h・L）；试验品的相对生物利用度为105.2%。结论：盐酸加替沙星具有口服后吸收快、血药浓度较高、体内平均滞留时间（MRT）较长的特点；两种盐酸加替沙星制剂在人体内具有生物等效性(P>0.05)。

【关键词】盐酸加替沙星胶囊；药动学；生物等效性；高效液相色谱

文章编号：1009-5519（2007）22-3326-02 中图分类号：R9 文献标识码：A

Assessment on pharmacokinetics and bioavailability of gatifloxacin HCL capsules in healthy volunteers

LI Hong-Li1，ZHAO Lei2

(1.Department of Medical Technique,Shaanxi Energy Vocational College,Xi'an 710033,China;2.Clinical Pharmacology Base，Xijing Hospital，Fourth Military Medical University，Xi'an710613，China)

【Abstract】Objective：To compare the pharmacokinetic parameters and bioavailability of gatifloxacin HCL capsules.Methods：An open， randomized， two-period crossover study was conducted in 18 healthy volunteers. The concentration of gatifloxacin in plasma was assayed by HPLC after a single oral dose of 400 mg test or reference preparation. The main pharmacokinetic parameters (AUC（0~24h），Cmax and Tmax) were analyzed by two one-sided t test.Results：The concentration -time curve after medication conformed to one-compartment open model with a first order absorption.Tmax，Cmax and AUC(0~24h) of test and reference preparation were （1.51±0.35） and （1.53±0.38）h，（3.46±0.79） and （3.43±0.92）mg/L，（34.51±8.43） and （33.04±10.20）mg/（h・L） respectively. The relative bioavailability of test was 105.2%.Conclusion：The gatifloxacin HCL had the characteristics of absorbing quickly， high peak concentration in plasma and longer mean retention time in vivo.The result of statistical analysis showed that two formulations were bioequivalent(P>0.05).

【Key words】Gatifloxacin HCL；Pharmacokinetics；Bioequivalence；HPLC

盐酸加替沙星（Gatifloxaci HCL）是第四代喹诺酮类药物，与前三代喹诺酮类药物相比，盐酸加替沙星不但扩大了抗菌谱 [1，2]，降低了喹诺酮类药物特有的光稳定性差的缺点[1]，而且其抗菌活性更强[3，4]。目前，关于盐酸加替沙星在人体内的药动学及生物等效性研究国内外报道较少，本实验我们采用HPLC法研究盐酸加替沙星胶囊在健康人体内的药代动力学特征及相对生物等效性，以期为该药今后在临床安全有效、合理经济的使用提供依据[5，6]。

1 材料和方法

1.1 材料：（1）仪器：LC-10AVP高效液相色谱系统（Shimadzu，Japan），含两台LC-10ATvp型7725型进样阀（配100 μl定量环），CTO-10Asvp柱箱，Class-vp 5.032色谱工作站(Shimadzu，Japan)，Shim-pack CLC-ODS C18分析色谱柱（150 mm×6 mm，5 μm），甲醇为色谱级，其它试剂均为分析纯。受试品盐酸加替沙星胶囊(河南康泰制药集团公司，批号20010922，100 mg/粒)；参照品盐酸加替沙星片 (陕西新兴制药有限公司， 批号20050920，100 mg/片)。盐酸加替沙星对照品(中国药品生物制品检定所，含量77.8％)。（2）色谱条件：Shim-pack CLC-ODS C18分析色谱柱（150 mm×6 mm，5 μm）；流动相为：甲醇:水:十二烷基硫酸钠=500 ml:500 ml:3.5 g(磷酸调pH=3.0)，流速1 ml/min，检测波长为292 nm。

1.2 方法

1.2.1 柱效及对称因子测试：在上述条件下，以加替沙星标准液测试，理论塔板数为7408，柱效良好，对称因子为1.03，可满足试验测试的要求（0.95～1.05）。

1.2.2 血浆样品测定：精取待测样品血浆 0.5 ml于尖底2 ml 的离心试管中，精密加入20%(水:高氯酸=80 ml:20 ml，v/v)的高氯酸200 μl，漩涡振荡1分钟，离心8分钟（15 000 r/min），取上清液100 μl进样，外标法定量，Class-vp5.032色谱工作站自动计算并打印加替沙星的色谱峰面积，将峰面积代入标准曲线方程，求出加替沙星的血浆浓度。

1.2.3 标准曲线的制备：取空白混合人血浆2.0 ml共7份，分置于试管中，加入适量加替沙星标准液，使血浆中加替沙星浓度依次分别为0.15、0.31、0.62、1.24、2.48、4.96和9.92 mg/L，按下述血浆样品测定方法操作，以加替沙星的血浆浓度C（mg/L）对加替沙星的色谱峰面积（A）作线性回归，求得加替沙星的标准曲线方程为：C=2.969×10-6A-0.0717(r=0.999，n=6)。

1.2.4 方法回收率:取空白血浆3份，加入适量的加替沙星标准液，分别配成高、中、低三个浓度的加替沙星样品4.96、1.24和0.31 mg/L，按样品测定法各测定含量6次， 计算方法回收率（Mean±SD），依次分别为(97.15±1.21)%、(96.37±1.78)%和(96.37±2.36)%。

1.2.5 方法精密度:取空白血浆加入适量加替沙星标准液，配制成高、中、低浓度分别为4.96、1.24和0.31 mg/L血浆样品，在一天内按样品测定法重复测定6次，求得加替沙星日内RSD分别为1.04%、1.68%、5.45%。将上述3个浓度的样品在8d内陆续各重复测定6次，求得对应的日间RSD分别为1.64%、3.47%和7.34%。

1.2.6 志愿者及实验设计：18例男性健康受试者，年龄18～40岁，质量（60.8±7.6）kg，身高(168.7±3.5)cm；血 、尿常规、肝功、肾功及心电图检查均正常，无药物过敏史，试验方案经西京医院伦理委员会批准通过。试验前18人均签署知情同意书。试验前1天19:00后即禁食，试验当日晨空腹用240 ml温开水口服盐酸加替沙星胶囊400 mg（试验品）或盐酸加替沙星片400 mg（参照品）。服药前抽取空白血样5 ml，服药后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、3、6、8、12和24小时分别采静脉血5 ml，置无菌抗凝试管中，离心分离出血浆置于无菌干燥塑料管中，于-20℃闭光保存，在14天内完成加替沙星的血药浓度测定。

1.2.7 数据处理：Tmax和Cmax均采用实测值，以梯形法求算AUC，以消除相血药浓度对数与时间的回归方程计算体内消除半衰期。盐酸加替沙星的主要药代动力学参数详见表1。将AUC和Cmax参数进行对数转换后，以双单侧t检验法评价两种盐酸加替沙星制剂在人体内的相对生物等效性。

2 结果

2.1 色谱分离：在本色谱条件下， 加替沙星保留时间为4.8分钟，分离度良好，可确保分析方法的专一性，见图1。血浆中加替沙星的最低检出浓度（按信噪比≥3计）为20 μg/L。

A：标准盐酸加替沙星；B：空白血浆；C：口服400 mg后的血浆样品，tR=4.81min

2.2 药-时曲线：两种制剂交叉给予18名受试者后，其药-时曲线经拟合符合口服一室开放模型，见图2。

2.3 药动学及生物等效性分析：以梯形法求算两种盐酸加替沙星制剂的AUC(0-∞)、AUC（0~24h），Tmax和Cmax采用实测值，以消除相血药浓度的对数与对应点时间的线性回归求算盐酸加替沙星胶囊的体内消除半衰期。结果表明两种制剂在健康志愿者体内的处置均符合一级吸收一室开放模型，其主要药动学参数见表1。

以盐酸加替沙星胶囊为试验制剂，以盐酸加替沙星片为参比制剂，求得试验制剂的相对生物利用度为105.2%，将两种制剂的主要药动学参数Cmax、Tmax和AUC经双单侧t检验，结果表明，两种制剂具有相同的生物效应。

3 讨论

本实验采用HPLC法测定血浆中盐酸加替沙星的浓度。在流动相的选择上，本试验经比较优化色谱条件[6]，最终确定流动相为甲醇∶水∶十二烷基硫酸钠=500 ml∶500 ml∶3.5 g(磷酸调pH=3.0)，结果显示药物与杂质分离良好。结果表明，本方法具有简便快速和误差较小的实用特点。

从表1可见，盐酸加替沙星片剂和胶囊剂在18例健康受试者体内的处置情况较为相似，从血药浓度测定结果可见，18例受试者的Cmax和AUC(0~24h)个体间的差异较大，但同一受试者服用受试品和参照品后的Cmax和AUC(0~24h)相近，提示: 盐酸加替沙星有一定的个体差异，临床使用时应加以注意。经配对双单侧t检验结果表明，两种盐酸加替沙星制剂在健康人体内具有生物等效性，受试品相对于参比品的相对生物利用度略高，为105.2%。

参考文献:

[1] 朱 曼，王 睿，方 翼，等.人体血浆及尿液中甲磺酸加替沙星浓度的HPLC测定法[J]. 药物分析杂志，2003，20(1):56.

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[6] Chen YL， Li LW. Determination of Gatifloxacin by HPLC[J]. Chi-nese Joural of Pharmaceuticals，2001，32（12）：553.

收稿日期：2007-08-02