试析蝴蝶兰组织培养研究

摘要：采用组织培养的快速繁殖方式对蝴蝶兰进行了繁殖培育，并且对蝴蝶兰的快速培育繁殖技术的研究进行了分析，明确了蝴蝶兰组织培养的优势以及其相应的影响因素，同时阐述了蝴蝶兰组织培养技术以及其影响因素，为减少蝴蝶兰组织培育当中的问题提供了参考的经验，同时也为蝴蝶兰的广泛种植以及生产奠定了良好的基础。

关键词：蝴蝶兰；组织培养；研究

中图分类号：Q943.1文献标识码：B文章编号：1674-9944（2013）10-0034-02

1引言

蝴蝶兰，属于兰科蝴蝶兰属植物，属于热带以及亚热带气生兰。蝴蝶兰的原产地为菲律宾、马拉西亚以及印度尼西亚等地，植株美观，形状似碟，枝叶繁茂且花色鲜艳持久，具有极高的观赏价值以及经济价值，然而由于蝴蝶兰属于单茎性气生兰，植株较少发育为侧枝，蝴蝶兰的种子也由于并不包含胚乳或者其他类型的组织，由此蝴蝶兰在自然条件下萌发率十分低，常规的无性繁殖方式无法采用。而组织培养方式进行的种苗繁殖是当前蝴蝶兰大规模生产以及种植的唯一途径。蝴蝶兰主要是通过无菌播种以及使用其他类型的外植体诱导类原球茎进行快速繁殖。

2蝴蝶兰组织培养快速繁殖及影响因素

2.1丛生芽诱导繁殖

当前，蝴蝶兰组织培养的快速繁殖有原球茎以及丛生芽繁殖途径。相对而言，原球茎的繁殖途径是研究相对较多的一种类型，而丛生芽快速繁殖途径则在很大程度上是一种芽生芽的繁殖途径。其培植的技术含量相对较低且容易操作，并不对母株造成影响和伤害，同时能在一定程度上保证其遗传的稳定性。同时也能在一定程度上避免植株的大量变异。并且丛生芽诱导的繁殖途径所需要的时间较短，诱导的成功率也相对较高。

2.2诱导以及其繁殖的影响因素

根据相应的研究以及实验表明，6-BA对蝴蝶兰丛生芽诱导产生了重要的影响。浓度一定的6-BA能在一定程度上破坏腋芽的休眠，随着6-BA浓度的持续提高，丛生芽的增长率也随之提高。6-BA浓度的提高能有效提高丛生芽的增长率，然而浓度过高的6-BA也将对丛生芽的生长以及发育产生影响，导致其芽的长势变弱，同时也将导致蝴蝶兰的褐化率明显增加。除此之外，NAA同时也将对丛生芽的增殖率产生影响。适当浓度的NAA能有效提高蝴蝶兰丛生芽的生长以及增殖，然而浓度过高将导致丛生芽的生长以及增殖缓慢、长势较弱，并且开始生根。由此在工厂化的育苗过程中，当丛生芽诱导数量阶段，可使用9.0mg/L以及05mgNAA能获得较好的增殖率。这与相关研究者的研究结论相一致。

3蝴蝶兰的培养

3.1培养的部位

就大部分植物而言，其根、茎、叶以及花器等各个部位都能成功培养，然而兰科植物能培养的主要部位为顶芽以及侧芽，部分种类的蝴蝶兰也可采用隐芽等休眠芽进行培育，部分可从叶片培养得出植株，不同属的蝴蝶兰所培养出的部位也并不相同。

（1）茎尖。茎尖处于细胞分裂的最为旺盛的部位，同时也是培育成功率最高的部位，但其对分离技术要求较高。

（2）休眠芽。休眠芽能在顶芽失去发芽能力后进行发芽。休眠芽在外，由此对其分离较为简单，但其容易受到病菌的污染，应注意灭菌。

（3）隐芽。较难分离，其成活率与休眠芽不相上下。

（4）花梗。当兰花开花30d后，剪下花梗顶端以及数个花梗腋芽，将其切成2～3cm长的切段，每段带着一腋芽，并将基部向下插入培养基中。

3.2选择外植体

蝴蝶兰不同外植体的成活率各不相同，其中，蝴蝶兰花梗侧芽的成活率最高，成活率有75%，其次为花梗，为62.5%。叶片和根尖的成活率最低，为12.5%及7.5%。

不同的外植体将采取不同的取材方法。最为理想的培养物为正在生长中的芽。一般可取2～6cm切取，使之上面包含多个隐芽以及生长芽。生长芽的成活率最高，休眠芽难以分离并且成长也相对较慢。

3.3选择基本培养基

蝴蝶兰组织培养所使用的基本培养基包括MS、VM、KC以及花宝等，然而对于最适宜的培养基则有不同的选择，主要由于蝴蝶兰品种差异较大，并且由于不同的外植体来源所导致的。相关学者以红花品种为研究的基础，分别时MS、1/2MS以及改良的KC培养基进行了研究，分析出改良KC培养基效果最佳，其次为1/2MS、MS；王静等研究者以红花及白花系未研究为基础，将其作为实验的材料，研究出了大量对于蝴蝶兰原球茎增殖以及分化影响的大量影响元素，表明对于原球茎而言也存在较多的增值影响因素。1/2MS对于原球茎增殖最为有益。鲁雪华等在对蝴蝶兰花梗节位置切段的诱导原球茎的试验中筛选培养基，也明确了1/2MS或者改良MS比MS的效果要好。适当减少MS培养基当中的元素以及减少部分微量元素以及相关的有机部分，同时适时增加少量的叶酸以及生物素能在一定程度上对原球茎的增殖生长有益。陈勇等学者研究表明，1/2MS培养基对于原球茎的增殖效果以及分化效果均比MS培养基要好。MS培养基当中所包含的浓度较高的无机盐对原球茎的增殖和分化并不利。杨美纯等研究表明，MS培养基在对蝴蝶兰种子的萌发十分有益。

3.4培养基添加物的影响

部分氨基酸类型的添加物也可作为培养基当中的有机氮源，甘氨酸能有效推动蝴蝶兰离体根的生长，而丝氨酸等能对蝴蝶兰当中的花药、胚状体以及不定芽的分化产生一定的影响。水解乳蛋白能对蝴蝶兰的胚状体或者不定芽提供相应的营养成分，提供相应的生理活性物质以及生长所需要的激素等等，例如通过加入100～200mg/L香蕉泥，从而缓冲pH值，从而促进幼苗的生长发育。

根据相应的研究可了解到，营养基当中的不同添加物能对蝴蝶兰原球茎的增殖以及分化将产生影响，水解酪蛋白能有效促进蝴蝶兰原球茎的增殖，而水解酪蛋白若是与香蕉泥均匀混合则将对原球茎产生一定的抑制作用，有机添加物之间的相互作用以及有机添加物与培养基之间的作用也能对蝴蝶兰原球茎的增殖产生一定的影响。部分研究表明，在培养基中添加适当的香蕉泥、椰乳或者包含胶质的果汁或者菜汁等等都将在一定程度上促进蝴蝶兰原球茎的增殖。若是在培养基当中添加活性炭，在添加低浓度的活性炭例如0.5～1.0g/L之时并不对原球茎的增殖产生影响。而在浓度约为20～30g/L之时将对原球茎的增殖产生一定的促进作用。而蔗糖是培养基的能源物质以及渗透调节剂，能在很大程度上对原球茎的增殖产生影响。相应的试验研究表明，在蔗糖浓度为2%时能有益于原球茎的生长，而在浓度为2～3%时能促进蝴蝶兰芽的生长形成，浓度为5%的蔗糖能促进根的分化以及生长，由此可了解到，蔗糖的浓度对原球茎的分化具有明显的影响，当分化培养基包含1%～2%的蔗糖之时，原球茎将达到100%的分化，而当蔗糖的浓度为2%时，其分化速度达到最高，当浓度为3%～5%之时，则将在一定程度上对原球茎的生长以及分化产生抑制。

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