白花败酱草提取物对小鼠前列腺增生的实验研究

[摘要] 目的 研究白花败酱草提取物（PVJE）对小鼠前列腺增生的抑制作用。 方法 小鼠随机分为对照组、模型组、普乐安组、小剂量PVJE组、大剂量PVJE组。对照组皮下注射花生油溶液0.1 ml/只，其余各组均皮下注射丙酸睾酮溶液5 mg/（kg·d），同时普乐安组给予5 g/（kg·d）的普乐安溶液灌胃，小剂量PVJE组、大剂量PVJE组分别给予0.02、0.04 g/（kg·d）的白花败酱草提取物溶液灌胃，共给药12 d。研究小鼠前列腺湿重、前列腺指数、性激素水平和光镜下前列腺形态学的变化。 结果 与模型组比较，PVJE能明显抑制由丙酸酮诱发的小鼠前列腺增生，小鼠血清酮（T）、和雌二醇（E2）含量明显降低。 结论 PVJE对丙酸酮所致小鼠前列腺增生具有显著的拮抗作用。

[关键词] 白花败酱草；提取物；前列腺增生；小鼠

[中图分类号] R282.71 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）11（c）-0033-02

Experimental study of Patrina Villosa Juss. extractive on benign prostatic hyperplasia model of mice

GUO Xiao-qiu1 XU Jie1 ZENG Ling1 ZHANG Wen-ran1 ZENG Jing2

1.Department of Pharmacy， Hospital of Traditional Chinese Medicine in Jianxi Province， Nanchang 330006；2. Pharmacy College of Gannan Medical College in Jianxi Province， Ganzhou 341000，China

[Abstract] Objective To study inhibiting effect of Patrina Villosa Juss extractive（PVJE） on benign prostatic hyperplasia of mice. Methods Mice were divided into five groups including positive control group， model group， Pulean tablets treating group， low dose PVJE group and high dose PVJE group. The mice in control group were injected subcutaneously with peanut oil solution（0.1 ml）， while in other groups testosterone propionate solution [5 mg/（kg·d）] was employed instead of the oil. Meanwhile Pulean group was given gavage with Pulean 5 g/（kg·d）， and low dose PVJE group and high dose PVJE group were given PVJE gavage[0.02， 0.04 g/（kg·d）] for 12 consecutive days. Wet weight of prostate， prostate health index， sex hormone levels and prostate morphological changes under light microscope were compared among different groups. Results Compared with model group， PVJE can apparently inhibit prostatic hyperplasia in mice induced by testosterone propionate， reduce the serum testosterone（T）， estrodiol（E2） contents. Conclusion PVJE have significant inhibiting effect on benign prostatic hyperplasia induced by testosterone propionate in mice.

[Key words] Patrina Villosa Juss； Extractive； Prostatic hyperplasia； Mice

白花败酱草（Patrina Villosa Juss，PVJ）为是败酱科草本植物的根茎及带根全草，是一种常用植物药，在我国分布极广。败酱科味辛、苦性寒[1]，具有清热利湿、解毒排脓、活血化瘀、清心安神功效。1977年版《中国药典》将其收载为正品败酱草[2]。白花败酱草含有正三十二碳酸（Ⅰ）、正三十二烷醇（Ⅱ）、棕榈酸（Ⅲ）、齐墩果酸（Ⅳ）、aurentiamide acetate（Ⅴ）、胡萝卜苷（Ⅵ）、β-谷甾醇（Ⅶ）、7β-羟基-β-谷甾醇（Ⅷ）、豆甾醇（Ⅸ）[3]，更新研究发现从白花败酱草醋酸乙酯和正丁醇萃取部位共分离出7个化合物，分别鉴定为5-羟基-7、3′、4′-三甲氧基黄酮（Ⅰ），5-羟基-7、4′-二甲氧基黄酮（Ⅱ），木犀草素（Ⅲ），槲皮素（Ⅳ），异荭草苷（V），异牡荆苷（Ⅵ），8-C-葡萄糖基-7-甲氧基-4′、5-二羟基黄酮（Ⅶ）[4]。现代研究表明白花败酱草提取物（PVJE）具有中枢抑制作用、抗U14宫颈癌作用、耐缺氧作用，还有抑菌活性和抑制胃癌SGC7901细胞生长并诱导其发生凋亡等作用[5-14]。本文研究PVJE对小鼠前列腺增生的作用，报道如下。

1 材料与方法

1.1 药品

白花败酱草购自赣州市医药公司，取干燥白花败酱草100 g，加双蒸水过液面2 cm，煮沸3次。每次30 min，合并滤液，浓缩至200 ml。加3倍量95%的乙醇，放冰箱静置过夜，次日减压过滤，并回收滤液中乙醇，继续浓缩滤液得无醇味的提取物。提取物加双蒸水至100 ml使药液相当于生药1 g/ml。用0.5%NaOH溶液调整pH为7.0。置冰箱中备用。

1.2 动物

雄性成年昆明种小鼠，体重为（22±2） g，由湖南长沙实验动物中心提供。

1.3试剂

丙酸睾酮注射液（上海通用药业股份有限公司生产，批号：国药准字030519），普乐安，酮放射免疫试剂盒（购自天津九鼎医学生物工程有限公司，批号：国药准字G120103），雌二醇（购自天津九鼎医学生物工程有限公司，批号：国药准字A12101106）放射免疫试剂盒。酮（T）和雌二醇（E2）含量测定均按试剂盒说明书测定。

1.4方法

1.4.1 分组 小鼠随机分为5组，分别为对照组、模型组、普乐安组、小剂量PVJE组、大剂量PVJE组。

1.4.2 模型制备 对照组皮下注射花生油溶液0.1 ml/只，其余各组均皮下注射丙酸睾酮溶液5 mg/（kg·d），同时普乐安组给予5 g/（kg·d）的普乐安溶液灌胃，小剂量PVJE组、大剂量PVJE组分别给予0.02、0.04 g/（kg·d）的白花败酱草提取物溶液灌胃，共给药12 d。

1.4.3 指标的测定 于最后1次给药后的次日经颈总动脉取血，分离血清，按试剂盒操作说明，测定小鼠血清E2和T的含量，比较各组小鼠E2和T含量的变化。同时分离前列腺组织，按前列腺湿重/小鼠体重计算前列腺湿重指数（PI），比较各组小鼠列腺湿重和PI。前列腺以Bouin液固定，常规石蜡包埋，连续切片，HE染色，在光镜下观察其给药前后的结构变化[15]。

1.5 统计学方法

应用SPSS 14.0统计学软件进行数据分析，计量资料均以x±s表示，组间各指标的总体比较采用单因素方差分析，组内各指标的多重比较采用SNK-q检验，以P

2 结果

2.1 PVJE对小鼠前列腺湿重和PI的影响

与模型组相比，小剂量PVJE组、大剂量PVJE组小鼠前列腺湿重和PI均下降，且与PVJE呈一定的量效关系（表1）。

表1 PVJE对小鼠前列腺湿重和PI的影响（x±s，n=8）

与模型组比较，*P

2.2 PVJE对小鼠血清性激素水平的影响

与模型组相比，小剂量PVJE组、大剂量PVJE组小鼠血清E2和T的含量均有显著下降，且T/E2的比值亦有显著下降，且与PVJE呈一定的量效关系（表2）。

表2 PVJE对小鼠血清性激素水平变化的影响（x±s，n=8）

与模型组比较，*P

2.3 PVJE对前列腺结构的影响

模型组与对照组比较，腺体明显增生，腺体呈锯齿样扩张明显，腺体的大部分呈现状向腔内突出；腺腔不规则，体积增大且质较稀少，细胞核增大，腔内酸性分泌物明显增加；腺上皮细胞核呈卵圆形，可见核仁，腺上皮部分呈高柱状；酸性分泌物增多。小剂量PVJE组前列腺较模型组缩小，腺体腺上皮有一部分增生，少量呈现状向腔内突出；上皮为单层柱状或高柱状，腔内分泌物较模型组明显减少；腺上皮细胞胞浆呈透明状。小剂量PVJE组前列腺增生程度显著减轻，腺体细胞大小趋于一致，且腺体细胞排列整齐，腺体接近正常腺体。

3 讨论

前列腺增生症是老年男性的常见疾病，发病率随年龄递增。随着老龄社会的到来，前列腺增生症发病数明显增加。我国60～69岁年龄段老年人中重度前列腺增生的患病率约为66%，70岁以上老年人的患病率则高达70%。因此前列腺增生症已成为中国老年医学研究的重要课题。临床目前对前列腺增生的治疗还缺少有效药物。因此，迫切需要寻找高效低毒的治疗前列腺增生的药物。前列腺增生的关键诱因是雌、雄激素比例的变化，血清中T的含量和E2水平对前列腺增生有重要影响。同时前列腺湿重、PI及前列腺组织形态也是反映增生程度及确定是否增生的关键指标。本实验采用小鼠皮下注射丙酸睾酮建立前列腺增生模型。

研究结果表明每天给予0.02、0.04 g/kgPVJE可明显减轻前列腺湿重和PI，使小鼠血清中的E2和T的含量均有下降；在病理学检查中研究发现0.04 g/（kg·d）PVJE能显著减轻前列腺增生程度，使腺体细胞大小趋于一致，且腺体细胞排列整齐，接近正常腺体。以上研究结果显示PVJE对丙酸素所致的前列腺增生具有显著的治疗效果。

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（收稿日期：2013-08-30 本文编辑：魏玉坡）