小针电凝对SD大鼠真皮成纤维细胞活性影响的初步研究

[摘要]目的：研究小针电凝对SD大鼠真皮成纤维细胞生长活性的影响，并探讨其可能的发生机制。方法：应用小针高频电凝分别在6J/H、8J/H、10J/H、12J/H功率下对SD大鼠真皮进行选择性电热解作用2s，然后分别在术后第14天、第35天取标本制成病理切片光镜下观察成纤维细胞和胶原纤维的数量变化。结果：经小针高频电凝作用后第35天的SD大鼠真皮中胶原纤维数量明显增加（P

[关键词]小针电凝；成纤维细胞；胶原纤维；非剥脱性除皱

[中图分类号]Q813.1[文献标识码]A[文章编号]1008-6455（2011）05-0759-02

Initial research for the cytoactive of the fibroblast in the dermis of SD mice after treatment by fine-needle electrocoagulation

YU Hai-sheng,CHEN Shi-hai,LIU Qing-feng,WEI Qiang,LIAO Ming-de,MENG Xu-chang

(Department of Plastic Surgery,The First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021,Guangxi,China)

Abstract:ObjectiveTo research the effects of the cytoactive of the Fibroblast in the dermis of SD Mice after selectional treatment by Fine-needle electrocoagulation,and infer the mechanism that results in the effects.MethodsUsing Fine-needle，the Dermis of SD Mice were electrolyzed selectionally at 6J/H、8J/H、10J/H、and 12J/H power.Then the specime,electrolyzed with Fine-needle,were made into the pathological sections on 14 and 35 days after electrocoagulation，the change of the fibroglia fibrils and the fibroblast would be observeed in photon microscope.ResultsThe quantity of the fibroglia fibrils in the the dermis of SD mice were more incremental on 35 days after electrocoagulation than before that（P

Key words:Fine-needle electrocoagulation;fibroblast;fibroglia fibrils;nonablative skin rejuvenation

笔者在临床应用小针电凝治疗皮肤血管瘤时发现，该方法治疗后的部分皮肤不仅无瘢痕形成，而且皮肤皱纹较周围明显减少。本实验研究了小针高频电凝对SD大鼠真皮成纤维细胞活性和胶原纤维数量的影响，为小针高频电凝对皮肤非剥脱性除皱提供理论依据。

1资料和方法

1.1 试剂和所用仪器：华佗牌针灸针，上海沪通电子有限公司GD350-B型高频电刀作为治疗电凝器，光学显微镜等。

1.2 试验方法：选8只体重（120±10）g的雄性SD大鼠，随机分成4组（A～D组），选右侧背部1.5cm×1.5cm面积为实验侧，左侧对应部位为对照侧，在25%乌拉坦麻醉下将针灸针平行皮肤刺入大鼠实验区的真皮内约1.5cm，针间距为0.3cm，A～D组分别在6J/h、8J/h、10J/h、12J/h功率下应用电凝器电凝2s，术后电凝区及对照区皮肤均涂以金霉素眼膏。分别在术后14天，35天取实验区和对照区皮肤标本，采用masson染色法制成病理切片光镜下观察、对比，采用Image-ProPlus图像分析软件进行半定量分析，每张切片取IOD作为其含量的测量值。

胶原纤维的半定量分析采用t检验，结果以平均数士标准差(x±s)表示。检验水准取a=0.05，P

1.3 结果：术后第14天10×10倍视野光镜下观察，A-C组试验侧皮肤表皮真皮连接处正常，真皮浅层未见炎症细胞浸润，真皮毛囊结构完整，血管形态、数目正常，部分细胞核大，形态饱满的成纤维细胞（C组较为明显），成纤维细胞和胶原纤维数量与对侧相比增加不明显。D组试验侧皮肤真皮部分纤维支架被破坏，同时有纤维组织增生，考虑电凝功率过高所致。术后第35天光镜下见A、B组试验侧皮肤成纤维细胞和胶原纤维数量变化仍不明显（P>0.05）；C组胶原纤维数量有较明显增加（P

2讨论

2.1 随着年龄的增加，以及外部因素（日光、重力等）的作用[1-4]皮肤中成纤维细胞活性会逐渐降低，其分泌的胶原纤维逐渐减少，使皮肤弹性减少、变薄、松弛，进而皱纹增加。因此任何非剥脱性除皱方法，其目的都是通过各种手段或原理刺激皮肤中成纤维细胞，来增加其对胶原纤维的分泌，达到恢复皮肤弹性的目的。

2.2 本研究发现SD大鼠皮肤在小针电凝适度作用后（10J/S，2S），第35天时大鼠皮肤中胶原纤维的数量较对照侧明显增加（P

2.3 小针高频电凝提高真皮中成纤维细胞活性，进而增加真皮中胶原纤维的数量，推测可能有以下几种途径：①小针高频电凝通过选择性电热解作用降解基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)，从而减少MMP对细胞外胶原前体的降解作用[6-8]，增加成纤维细胞的活性，进而提高细胞外胶原纤维的数量；②小针高频电凝通过选择性电热解作用直接引起真皮原有胶原蛋白变性，促使增殖细胞核抗原蛋白的表达，从而增加DNA聚合酶的活性，增加在S期成纤维细胞的DNA合成[9]，从而促进细胞增殖；③小针电凝能促进成纤维细胞由静止态的G1期向S 期转变，使DNA合成量增加，胶原纤维分泌增加。

总之，小针电凝适度作用能够增加皮肤成纤维细胞活性，但其作用的确切机制，效果持续的时间以及对不同皮肤电凝功率的确定等问题仍有待进一步研究。希望小针电凝能为临床非剥脱性除皱的研究提供一个新的思路。

[参考文献]

[1]石钰,李利,王曦. 老化皮肤的胶原与弹性组织变化研究[J].中国美容医学,2007,16(6):727-730.

[2]何永静,刘垠,王继华. TGF-β1 对UVA 照射人皮肤成纤维细胞MMP-1 和MMP-3 mRNA表达的影响[J].中国美容医学,2010,19(1):53-55.

[3]Takahashi Y,Moriwaki S,Sugiyama Y,et al.Decreased gene expression responsible for post-ultraviolet DNA repair synthesis in aging：a possible mechanism of age-related reduction in DNA repair capacity[J].J Invest Dermatol,2005,124(2):435-442.

[4]丛敬,吴景东. 老化皮肤成纤维细胞的研究进展[J].中国美容医学,2009,18(5):736-738.

[5]谢志明,陈冠楠,陈建新,等.皮肤增生性疤痕组织的双光子显微图像纹理分析[J].中国图像图形学报,2009,14(9):1862-1866.

[6]刘仲荣,刘荣卿,张国威,等.基质金属蛋白酶表达在皮肤光老化皱纹形成中的作用[J].中华皮肤科杂志,2003,36(6):332-334.

[7]Hatamochi A,Ono M,Arakawa M,et al.Analysis of collagen gene expression by cultured fibro blasts in morphoea[J].Br J Dermatol,199 2,126(3):216-221.

[8]Schwartz E,Cruickshank FA,Christensen CC,et al.Collagen alterations in chronicalll sun-damaged human skin[J]. Photochem Photobiol,1993,58（6）:841-844.

[9]李晓格,李世荣,曹川,等，强脉冲光对成纤维细胞增殖与周期的影响[J].中国美容医学,2007,16（10）：1331-1334.

[收稿日期]2010-12-14 [修回日期]2011-03-10

注：“本文中所涉及到的图表、公式、注解等请以PDF格式阅读”