时间：2022-07-04 01:54:39
[收稿日期] 2014-03-03
[基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项（2011ZX09307-002-01）
[通信作者] *吉腾飞，E-mail：
[作者简介] 张孟孟，E-mail：
[摘要] 研究香茅Cymbopogon citratus的化学成分。采用硅胶，Sephadex LH-20和高效液相色谱法从中分离得到8个化合物，包括1个新化合物，通过理化性质和波谱数据分析鉴定其结构分别为3β-甲氧基羊毛甾-9（11）-烯-27-醇（1），3β-羟基羊毛脂- 9（11）-烯（2），（24S）-3β-甲氧基羊毛甾-9（11），25-二烯-24-醇（3），8-羟基-新薄荷醇（4），（2E）-3，7-二甲基-2，7-辛二烯-1，6-二醇（5），（+）-香茅醇（6），7-羟基薄荷醇（7）和十九烷酸乙酯（8）。其中化合物1为新化合物，化合物2～3为首次从该植物中分离得到。
[关键词] 香茅；化学成分；羊毛脂烷类
香茅Cymbopogon citratus（DC.）Stapf.，又被称为柠檬香草，是精油的来源之一，在热带和亚热带国家几乎都有种植，其地上部分作为民间药物被广泛使用，用来治疗消化紊乱、炎症、糖尿病、神经紊乱、发热以及其他健康问题[1]。香茅又为传统维吾尔药材，用于祛风除湿，消肿止痛[2]。据文献报道，已从香茅中分离得到黄酮类[3]、酚类[3]、三萜类[4-5]和倍半萜类[6-7]等化学成分。本实验对香茅地上部分的95%乙醇提取物进行了化学成分研究，从中分离并鉴定了8个化合物，其中化合物1为新化合物，化合物2～3为首次从该植物中分离得到。
1 材料
XT4-100显微熔点测定仪（温度未校正），Agilent 1100 系列LC/MSD Trap-SP 型质谱仪，Mercury-300，Vairan Inova-500 核磁共振波谱仪，Agilent 1200 型高效液相色谱仪。Sephadex LH-20（Pharmacia 公司），Rp C18（日本YMC 公司），色谱级甲醇（百灵威化学技术有限公司），实验室所用其他试剂均为分析纯。柱色谱硅胶（160～200，200～300目）、薄层色谱用硅胶GF254及薄层色谱用硅胶H（青岛海洋化工厂生产）。
香茅于2011年8月购买自安徽亳州，由中国医学科学院&北京协和医学院药物研究所马林副教授鉴定为香茅C. citratus，标本存放于中国医学科学院&北京协和医学院药物研究所标本室（标本号为ID-S-2544）。
2 提取与分离
香茅地上部分50.0 kg用95%乙醇浸渍提取3次，每次3 h，提取液合并，减压回收溶剂得浸膏3.0 kg，将浸膏混悬于12 mL水中再分别用等体积的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取。取石油醚萃取物（118.0 g）过减压柱（200～300目，9.0 cm×13 cm，280 g），依次用石油醚-乙酸乙酯（100∶0～100∶1～20∶1～10∶1～4∶1～2∶1）洗脱，得到13个流分（命名为A1～A13）。其中，A10（24.039 g）经反复硅胶柱色谱，最后用凝胶（氯仿-甲醇-水 5∶5∶1）纯化得化合物1（3 mg）和6（43 mg）；A12（22.896 g）经反复硅胶柱色谱，最后用凝胶（氯仿-甲醇-水 5∶5∶1）纯化得化合物2（58 mg）；A9（10.688 g）经反复硅胶柱色谱得化合物3（72 mg）；A2（48.736 g）经反复硅胶柱色谱，最后用制备薄层色谱（石油醚-乙醚 40∶1展开）得化合物8（26 mg）。取乙酸乙酯萃取部分（200.0 g）过减压柱（200～300目，9.0 cm×13 cm，280 g），流动相依次用石油醚、氯仿、氯仿-甲醇（20∶1～9∶1～4∶1）、氯仿-甲醇-水（7∶3∶0.5）洗脱，得到13个流分。第3流分（2.302 g）经硅胶柱色谱（200～300目，4.4 cm×40 cm，210 g）用石油醚-乙酸乙酯（3∶1）洗脱得到11个流分（命名为B1～B11），其中，B6（1.139 g）经反复硅胶柱色谱得化合物4（60 mg）；B7（0.896 g）用反相HPLC制备色谱 （42%甲醇）得化合物5（2 mg，tR=39 min）。第6流分（2.302 g）经硅胶柱色谱（200～300目，4.4 cm×40 cm，210 g）用氯仿-甲醇（20∶1）洗脱得到4个流分（命名为C1～C4），其中C3（9.787 g）经反复硅胶柱色谱，最后用凝胶（氯仿-甲醇-水 5∶5∶1）纯化得化合物7（11 mg）。
3 结构鉴定
化合物 1 白色针状结晶（氯仿），熔点139～140 ℃。HR-ESI-MS m/z 481.412 4[M+Na]+ （C31H54 O2Na计算值：481.411 0），确定其分子式为C31H54O2，分子不饱和度为5。
1H-NMR和13C-NMR谱（表1）显示出1个三取代双键[δH 5.22，1H，br d（J=6.0 Hz）和δC 148.7（C），114.8（CH）]信号；1个仲醇亚甲基[δH 2.66，1H，dd（J=11.0，3.5 Hz）和δC 88.6（CH）]信号；2个甲基[δH 0.90，3H，d（J=7.5 Hz）；0.87，3H，d（J=7.5 Hz）]信号和5个季碳甲基[ δH 0.80，0.98，0.75，0.66和1.06（均为 3H，s）]信号。分子式表明化合物1含5个不饱和度，而1含有一个双键，故1为四环三萜。从HMBC谱中可看到以下2，3键相关：H-3和C-（3-OMe）；H-11和C-8，10，13；H-21和C-17；H-26和C-24；H-19和C-5，9；H-30和C-8，13，15；H-29和C-3，5；1个甲氧基（δH 3.37，3H，s）与 C-3[δC 88.6（CH）]相关（图1）。因为羊毛脂烷型三萜、甘遂烷型三萜及大戟烷型三萜有相同的平面结构，所以NOESY是区别这三类三萜的重要手段。化合物1的NOESY谱显示19位甲基与18，30位甲基相关，然而对于甘遂烷型三萜及大戟烷型三萜，19位的甲基只与30位甲基相关，因此判断化合物1是羊毛脂烷型三萜。H-3的耦合常数[2.66，1H，dd（J=11.0，3.5 Hz）]表明3位的羟基为e键，即3位羟基为β构型；A-D环上甲基和其他氢的相对构型根据NOESY来确定；21位甲基的化学位移（δH 0.90，3H，d，J= 7.5 Hz）以及化合物1的旋光值+45.4（c 0.11，CHCl3）为正，进一步证明化合物1属于羊毛脂烷型三萜。综合以上数据，鉴定化合物1为3β-甲氧基羊毛甾-9（11）-烯-27-醇。
化合物2 白色结晶（氯仿）；ESI-MS m/z 429[M+H]+；1 H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：5.22（1H，
图1 化合物1的结构和HMBC相关图
Fig.1 Structure and key HMBC of compound 1
d，J=6.0 Hz，H-11），3.20（1H，d，J=11.4，4.2 Hz，H-3），1.31（6H，s，26，27-Me），1.60（3H，s，27-Me），1.05（3H，s，19-Me），0.97（3H，s，29-Me），0.90（3H，d，J=7.5 Hz，H-21），0.80（3H，s，28-Me），0.74（3H，s，30-Me），0.65（3H，s，18-Me）。以上数据与文献[8]对照一致，鉴定化合物为3β-羟基羊毛甾-9（11）-烯。
化合物3 白色结晶（氯仿）；HR-ESI-MS m/z 479.386 6[M+Na]+；1 H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：5.22（1H，d，J=6.5 Hz，H-11），4.92，4.84（2H，s，H-26），4.02（1H，t，J=6.3 Hz，H-24），3.37（3H，s，3-OMe），2.65（1H，dd，J=11.5，4.0 Hz，H-3），1.72（3H，s，27-Me），1.04（3H，s，19-Me），0.97（3H，s，29-Me），0.90（3H，d，J=7.5 Hz，20-Me），0.80（3H，s，28-Me），0.73（3H，s，30-Me），0.64（3H，s，18-Me）；13 C-NMR（CDCl3 ，125 MHz）δ：148.7（C-9），147.4（C-25），114.7（C-11），111.4（C-26），88.6（C-3），76.8（C-24），57.5（3-OMe），53.0（C-5），50.8（C-17），47.0（C-14），44.3（C-13），41.8（C-8），39.4（C-10），39.0（C-4），37.1（C-12），36.0（C-1），36.0（C-20），33.9（C-15），31.9（C-22），31.5（C-23），28.2（C-29），28.1（C-16），27.9（C-7），22.5（C-2），22.2（C-19），21.2（C-6），18.5（C-21），18.4（C-30），17.2（C-27），16.4（C-28），14.4（C-18）。以上数据与文献[9]对照一致，鉴定化合物为（24S）-3β-甲氧基羊毛甾-9（11），25-二烯-24-醇。
化合物4 黄色油状；ESI-MS m/z 173[M+H]+；1 H-NMR（CDCl3 ，500 MHz）δ：4.40（1H，s，H-3），1.22，1.26（6H，s，Me-9，10），0.87（3H，d，J=6.0 Hz，7-Me）；13 C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：73.3（C-8），68.1（C-3），48.3（C-4），42.5（C-2），34.8（C-6），28.9（C-9），28.9（C-10），25. 6（C-1），22.2（C-7），20.2（C-5）。以上数据与文献[10]对照一致，鉴定化合物为8-羟基-新薄荷醇。
化合物5 无色油状；ESI-MS m/z 171[M+H]+；1 H-NMR（CDCl3 ，300 MHz）δ：5.45（1H，tq，J=6.9，1.2 Hz，H-2），4.95（1H，m，H-8b），4.85（1H，dd，J=1.5，1.2 Hz，H-8a），4.16（2H，d，J=6.9 Hz，H-1），4.06（1H，t，J=6.3 Hz，H-6），2.08（2H，m，H-4），1.73（3H，s，7-Me），1.70（3H，s，3-Me），1.60（2H，s，H-5）；13 C-NMR（CDCl3 ，125 MHz）δ：147.3（C-7），139.4（C-3），123.6（C-2），111.2（C-8），75.5（C-6）59.3（C-1），35.5（C-4），32.8（C-5），17.6（7-Me），16.3（3-Me）。以上数据与文献[11]对照一致，鉴定化合物为（2E）-3，7-二甲基-2，7-辛二烯-1，6-二醇。
化合物6 无色油状；ESI-MS m/z 157[M+H]+；1 H-NMR（CDCl3 ，500 MHz）δ：5.11（1H，t，J=7.0 Hz，H-6），3.68（2H，t，J=7.0 Hz，H-1），1.98（2H，m，H-5），1.68（6H，s，7，10-Me），1.60（1H，m，H-3），0.90（3H，d，J=7.0 Hz，9-Me）；13 C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：131.5（C-7），124.9（C-6），61.4（C-1），40.1（C-2），37.4（C-4），29.4（C-3），25.9（C-8），25.7（C-5），19.7（C-9），17.9（C-10）。以上数据与文献[12]对照一致，鉴定化合物为（+）-香茅醇。
化合物7 白色结晶（氯仿）；ESI-MS m/z 173[M+H]+；1H-NMR（CDCl3 ，500 MHz）δ：3.72（1H，dt，J=4.0，10.5 Hz，H-1α），1.94（1H，α），1.70（1H，m，H-5α），1.68（1H，m，H-3α），1.64（1H，m，H-4β），1.38（1H，m，H-2β），1.22（6H，s，8，9-Me），1.08（1H，m，H-6β），1.02（1H，m，H-4α），0.95（1H，m，H-3β），0.92（3H，d，J=6.5 Hz，10-Me ）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：74.8（C-7），72.6（C-1），53.2（C-2），44.4（C-6），34.3（C-4），31.1（C-5），29.9（C-9），26.8（C-3），23.4（C-8），21.7（C-10）。以上数据与文献[13]对照一致，鉴定化合物为7-羟基薄荷醇。
化合物8 黄色油状；（+）-ESI-MS m/z 349[M+Na]+，365.2[M+K]+；1H-NMR（CDCl3 ，500 MHz）δ：0.88（3H，t，J=6.5 Hz，H-2′），1.25（33H，m），2.28（2H，t，J=7.5 Hz，H-2），4.12（2H，q，J=7.0 Hz，H-1′）。以上数据与文献[14]对照一致，鉴定化合物为十九烷酸乙酯。
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