Bcl-2和Bax在子宫肌瘤中的表达

【中图分类号】R711 【文献标识码】 A【文章编号】1672-3873（2011）03-0232-01

【摘要】目的：研究Bcl-2和Bax基因在子宫肌瘤中的表达。方法；用免疫组织化学SP法检测60例子宫肌瘤组织和正常子宫平滑肌组织中的Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:Bcl-2在肌瘤组织中表达均明显高于正常子宫平滑肌组织，Bax在肌瘤组织中的表达明显低于正常子宫肌瘤平滑肌组织(P

【关键词】Bcl-2 Bax 子宫肌瘤

子宫肌瘤是妇科最常见的良性肿瘤，在生育期妇女发病率约为25%，是育龄期妇女行子宫全切术的主要原因之一[1]。子宫肌瘤病因和发病机制尚不清楚。近年来研究表明， 细胞凋亡过度抑制与子宫肌瘤的生长有一定的因果关系。

1材料与方法

1.1研究对象

选择2009年12月―2010年12月在我院经手术切除子宫病理检查确诊为子宫肌瘤患者60例作为研究组，年龄35~55岁，平均年龄45岁。正常子宫平滑肌组织（距肌瘤包膜外1.0cm处）为对照组。60名研究对象月经周期规则，手术前6个月未采用激素治疗。

1.2方法

1.2.1免疫组化试剂

鼠抗人Bcl-2、Bax单克隆抗体，链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组化试剂盒，均购自北京博奥森生物技术公司。

1.2.2免疫组化步骤

(1)石蜡切片，常规脱蜡至水；蒸馏冲洗，PBS浸泡5分钟。(2)滴3%H2O2置去离子水孵育15分钟；(3)加5%正常山羊血清，室温置15分钟，倾去，勿洗。(4)加鼠抗人Bcl-2-IgG(或Bax-IgG)4℃过夜，稀释比例1∶100;PBS冲洗，3分钟×3次。(5)生物素标记二抗，室温20分钟;PBS冲洗，3分钟×3次(6)辣根酶标记的链霉卵白素，室温下孵育15分钟;PBS冲洗，3分钟×3次。(7)显示剂显色(8)苏木素复染半分钟;中性树胶封片。

1.2.3免疫组化对照

阴性对照用PBS代替Bcl-2-IgG(Bax-IgG)单克隆抗体，阳性对照用北京博奥森生物技术公司附带的标准阳性对照片。

1.2.4结果判定

Bcl-2和Bax阳性染色为细胞浆内出现黄色或棕黄色的颗粒。结果判定按Fromrwitz[2]综合计分法(综合阳性细胞所占比例和染色强度)进行半定量判定。染色强度按下列标准评定:阴性为0分;染色虽弱但明显强于阴性对照为1分;染色强度中等为2分;染色强为3分。染色的阳性细胞所占比例评定标准为:阳性细胞数75%为极强阳性(4分)。两种评分相加，将结果分为4个等级，0~1分为阴性(-);2分为阳性(+);3~4分为强阳性( );5~7分为极强阳性( )。

1.3统计学方法

结果按综合评分的等级来评价Bcl-2和Bax变化情况，采用统计软件进行Wilcoxon秩和检验。

2.结果

Bcl-2、Bax蛋白主要位于细胞浆，呈黄色或棕黄色，均匀分布于细胞浆中。未在肌层及肌瘤的血管中表达。

2.1 Bcl-2蛋白的表达60例正常子宫平滑肌标本中，Bcl-2蛋白有50例表达为阳性，主要为弱阳性(+);60例子宫肌瘤标本中Bcl-2蛋白全部表达为阳性，且呈中等至强阳性染色(++~+++)。

2.2Bax蛋白的表达60例正常子宫平滑肌标本中Bax蛋白全部表达为阳性，呈中等阳性至强阳性染色(++~+++);60例子宫肌瘤标本中，Bax蛋白22例为阳性，且为弱阳性表达。

3 讨论

3.1.细胞凋亡概述

细胞凋亡是细胞的程序性死亡，正常生理条件下，细胞凋亡和细胞增殖处于一种平衡状态，细胞凋亡程序的破坏，便可导致疾病的发生和发展。肿瘤细胞的发生发展过程，不仅是细胞的异常增殖，更重要的是细胞凋亡能力的降低。Bcl-2家族是当今细胞凋亡研究的热点之一。Bcl-2和Bax分别是Bcl-2家族中最有代表性的抑制凋亡和促进凋亡基因。在大多数肿瘤中，Bcl-2升高或Bax降低能抑制多种因素诱导的肿瘤细胞凋亡。反之，Bcl-2降低或Bax升高则促进肿瘤细胞凋亡。

3.2. Bcl-2、Bax在子宫肌瘤组织和正常子宫平滑肌组织中的表达

本实验结果显示，Bcl-2在子宫肌瘤组织中多呈强阳性表达，而Bax在子宫肌瘤组织中多呈阴性表达，在正常子宫平滑肌组织中，Bcl-2的表达多呈阳性表达，而Bax的表达多呈阴性至极强阳性表达，这与近年多数学者研究的结果一致。由于子宫肌瘤组织中的Bcl-2表达能力升高，导致肌瘤生长不断增大。正常子宫平滑肌组织中由于Bax的相对较高，导致肌瘤对凋亡的敏感性升高，从而避免发展为子宫肌瘤。故认为凋亡抑制基因Bcl-2的表达能力升高和凋亡基因Bax的表达降低可能是子宫肌瘤发生发展的原因之一。

综上所述，子宫肌瘤组织中Bcl-2的表达升高，Bax的表达降低，可推测子宫肌瘤的发生发展与细胞凋亡过度抑制有关。本文结果为子宫肌瘤的发病机制研究提供了新的探讨之路。

参考文献

[1].Gao Z，Matsuo H，Wang Y，et al. Up-regulation by IGF-I of proliferating cell nuclear antigen and Bcl-2 protein expressionin human uterine leiomyoma cells[J].J Clin Endocrinol Metab，2001，86(11):5 593-5 599.

[2].Fromrwitz FB，Viola MV，Chao S，et al.Ras P21 expression in the progression of breast cancer.Hum Pathol，1987;18(12):1268~1275