槟榔炭疽菌生物学论文

1杀菌剂的抑制作用测定

采用菌丝生长速率法，将供试药剂分别配成含有效成分l000、500、100、50、10、5、1和0．5μg／mL的溶液，分别吸取2mL加入装有18mL的PDA培养基的三角瓶中，混匀后倒入培养皿中。药剂浓度被稀释为100、50、10、5、l、0．5、0．1和0．05μg／mL，以无菌水平板为对照，每处理重复6次。将直径5mm菌苔接种到含药平板上，每皿1块，25℃恒温箱内培养，6d后用十字交叉法测定各处理菌落直径，计算抑制生长率。抑制生长率（％）＝［（对照菌落直径－处理菌落直径）／（对照菌落直径－菌饼直径）］×100。通过菌丝生长抑制概率值和药剂浓度对数值之间的线性回归分析，求出各药剂对菌株的有效抑制中浓度（EC50值）［5］。试验数据均由SAS数据处理工作平台统计分析。

2结果与分析

2．1病原菌生物学特性观察

2．1．1温度和pH值影响

试验结果看出，在PDA培养基上槟榔炭疽菌菌丝生长的温度范围是10～40℃，最适生长温度25～30℃，低于5℃或高于40℃均不能正常生长。该菌在15～30℃均能产孢，最适产孢温度25℃，产孢量最多。pH值4～11时槟榔炭疽菌在PDA培养基上均能生长和产孢，菌丝最适生长pH值6～7，pH值大于4的条件适宜产孢，pH值＝6产孢量最大（见表1）。pH值对菌丝生长和产孢的影响一致，酸性偏碱的条件适宜病菌的生长和产孢。

2．1．2不同碳源、氮源的影响

试验结果看出，不同碳源培养基上，槟榔炭疽菌菌落生长及产孢量明显不同。7种供试碳源的菌丝生长均优于对照，除D－半乳糖外，其他碳源的菌落直径均大于对照，说明碳源对槟榔炭疽菌菌丝生长具有促进作用。海藻糖的菌落直径最大，长满整个平板，且菌丝生长旺盛；其次为可溶性淀粉，菌丝生长茂密。碳源对槟榔炭疽菌的产孢量影响差异较大。除可溶性淀粉、D－果糖、甘露醇的产孢量大于对照外，其他供试碳源的产孢量均低于对照。可溶性淀粉的产孢量最大，D－果糖次之。8种供试碳源中，可溶性淀粉适合槟榔炭疽菌生长和产孢，可作为槟榔炭疽菌的培养碳源。不同氮源对槟榔炭疽病菌菌落生长及产孢的影响差别较大。以硝酸钾和脲为氮源时，菌落生长最快，菌丝生长旺盛，且产孢量也最大；硝酸钠培养基的菌落生长旺盛，但不产孢。以硫酸铵、氯化铵、硝酸铵为氮源的菌丝生长及产孢均明显受到抑制。在无氮培养基上，菌落直径最大，但菌丝极少，接近透明且不利于产孢（见表2）。

2．2杀菌剂的抑制作用

试验结果看出，6种杀菌剂对槟榔炭疽病菌菌丝生长的抑制作用差异较大（见表3，图1）。咪鲜胺抑制作用最强，其次为苯甲•丙环唑，代森锰锌、十三吗啉的抑制作用较弱，不适用于防治槟榔炭疽病；甲基托布津、多菌灵对槟榔炭疽菌基本上无抑制作用，不能用于防治槟榔炭疽病。

3结论与讨论

试验结果表明，温度对槟榔炭疽菌菌丝生长和产孢影响明显，20～30℃最适合菌丝生长和产孢，这与槟榔炭疽菌田间发生规律吻合［1－2］。pH值4～11的范围均能生长和产孢；能利用多种碳源，但对氮源要求较严格，硫酸铵、氯化铵和硝酸铵完全抑制槟榔炭疽菌产孢，之前未见相关报道，具体原因有待进一步研究。根据不同氮源对槟榔炭疽菌菌丝生长和产孢的影响差异显著的特性，在生产中可以合理施用氮肥，控制该病害发生［7］。多菌灵和甲基托布津对病原菌的作用机理极为相似，连续使用容易诱致病菌产生抗药性，且两者有正交互抗药性［8］。试验中多菌灵和甲基托布津对槟榔炭疽菌基本上已丧失毒力，推测槟榔炭疽菌对多菌灵和甲基托布津可能已产生抗药性。詹儒林等证实杧果炭疽病菌C．gloeosporioides在我国热区杧果上已形成对多菌灵的高水平抗药性［9］。另外，多种植物上的胶孢炭疽病菌也出现不同程度敏感性降低的情况［10－18］，说明多菌灵的抗药性问题已在胶孢炭疽菌的寄主范围内普遍发生。因此，对胶孢炭疽菌的抗药性应给予高度重视，及早采取相应措施。

作者：余凤玉 朱辉 牛晓庆 唐庆华 宋薇薇 覃伟权 黄山春 单位：中国热带农业科学院椰子研究所