银屑病患者IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的表达

[摘要] 目的：探讨银屑病患者外周血单个核细胞（PBMC）分泌白细胞介素2（IL-2）、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平及意义。方法：选取32例银屑病患者和15例正常人，分别作为病例组和对照组，分离培养其外周血PBMC，并用植物血凝素（PHA）诱导，酶联免疫吸附法（ELISA）检测诱导前后PBMC分泌IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的水平。结果：①病例组PBMC培养上清液中IL-2水平在PHA刺激前低于对照组（P

[关键词] 银屑病；白细胞介素；肿瘤坏死因子α

[中图分类号]R758.4+1[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2007）08（b）-011-02

The expression of interleukin-2, soluble interleukin-2 receptor, interleukin-6 and tumor necrosis factor alpha in patients with psoriasis

CHEN Yan-lei

(Department of Dermatology, Sheng Li Hospital of Sheng Li Petroleum Administrative Bureau, Dongying 257055,China)

[Abstract] Objective: To investigate the levels of IL-2、sIL-2R、IL-6 and TNF-α secreted from peripheral blood monouclear cells (PBMC) in the patients with psoriasis, and approach their significances. Methods: Selected 32 psoriasis patients as psoriasis group and 15 normal person as control, whose PBMC were cultured and induced by polyhydroxyalkanoate (PHA) in vitro. The levels of IL-2, sIL-2R, IL-6 and TNF-α were measured with sandwich ELISA in medium. Results: ①The spontaneous level of IL-2 in medium of psoriasis group was lower than that of the control (P

[Key words] Psoriasis; Interleukin; Tumor necrosis factor alpha

近年来的研究表明免疫功能调节异常在银屑病的发病中起着十分重要的作用，尤其是细胞因子导致的细胞免疫功能异常倍受关注。但它们在银屑病患者体内是如何产生并发挥调节作用的，目前尚不完全清楚。本研究分离培养寻常型银屑病患者外周血单个核细胞（PBMC），检测其在植物血凝素（PHA）诱导前后产生的IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α水平，分析此4种细胞因子在银屑病发病中的作用。

1 材料与方法

1.1 研究对象

所选病例32例均为我院确诊的寻常型银屑病患者，其中男19例，女13例，年龄18～61岁，平均32.5岁；病程0.5～30年,平均9.1年；银屑病面积和严重程度指数（PASI）积分介于7.0～47.5之间；患者无急性感染和其他免疫系统疾病，近3个月内均未做任何治疗。正常对照者15例为我院无任何疾患的健康体检者，其中男9例，女6例，年龄20～60岁，平均31.56岁。病例组和对照组在年龄和性别上相匹配，无显著性差异。

1.2 实验方法

1.2.1 标本采集抽取银屑病组和对照组的静脉血5 ml，肝素抗凝，用淋巴细胞分离液按常规方法分离PBMC，调整细胞浓度至1×106，台盼兰染色，存活率95%以上。用含10%胎牛血清的RPMI-1640液培养，植物血凝素（PHA）刺激，48 h后收集上清，-70℃保存备用。

1.2.2 检测ELISA法检测PBMC在PHA刺激前后细胞培养液中IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF－α的水平。人IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的ELISA试剂盒均由上海森雄科技有限公司提供。操作均严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学方法

数据用x±s表示，采用SPSS10.0处理，组间比较采用t检验，两变量之间的相互关系采用直线相关分析。

2 结果

2.1 PHA诱导前后PBMC培养上清液中IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α的水平

如表1所示，PHA刺激前PBMC培养上清液IL-2水平低于对照组（P

2.2 PBMC诱导后IL-2、sIL-2R、IL-6和TNF-α水平与PASI的相关分析

表2中结果显示，PBMC在PHA诱导后sIL-2R和TNF-α的水平与银屑病面积和严重程度指数（PASI）均呈显著正相关（r分别为0.53、0.68）；IL-2的水平与PASI呈显著负相关（r=-0.46，P0.05）。

3 讨论

本研究结果表明寻常型银屑病患者PBMC自发产生TNF-α的水平较对照组显著升高，这与Mizutani H等[1]的研究结果相一致。且PHA诱导后患者PBMC产生TNF-α的水平也较对照组显著升高，提示患者血循环中可能存在一定数量的PHA或某种银屑病相关因子导致PBMC的激活并分泌TNF-α，患者体内可能存在细胞免疫功能的失调，TNF-α以某种方式参与了寻常型银屑病的病理过程。杜静等[2]研究认为TNF-α可诱导HLA-Ⅱ类抗原表达，激活免疫细胞或炎症细胞，增强机体免疫应答水平，尤其是自身免疫应答水平，从而参与银屑病的发生发展过程。

sIL-2R是由活化的T淋巴细胞膜表面IL-2R的α链脱落形成的[3]。结果显示银屑病患者PBMC自发产生sIL-2R水平与对照组无显著性差异，进一步证实sIL-2R主要由T淋巴细胞产生，且提示银屑病患者可能存在外周血T细胞的异常活化。受PHA刺激后，sIL-2R水平明显高于对照组，提示患者血循环中可能存在一定数量的PHA活化了PBMC，且增高的sIL-2R可能对IL-2介导的细胞反应起到了拮抗剂的作用，进一步加重了银屑病患者细胞免疫功能的缺陷。

银屑病患者PBMC自发产生IL-6水平明显高于对照组，受PHA诱导后，IL-6水平呈高于正常人的趋势，但无统计学意义，且IL-6水平与PASI不相关，但我们的另一项研究发现IL-6血清水平与PASI呈显著正相关，提示PBMC可能不是产生IL-6的主要细胞，T细胞也可产生IL-6，且可能是血清IL-6升高的主要来源，这进一步提示银屑病患者可能存在外周血T细胞的异常活化，尚需进一步证实。

结果显示IL-2水平低于对照组，经PHA诱导后IL-2水平明显低于对照组，与杨竹生等[4]的研究结果相似。患者分泌IL-2的PBMC在体内可能已经被某种免疫原激发，在体外对PHA的应答减少[5]，进而导致患者PBMC受PHA刺激后分泌IL-2的量显著降低。

Jeffes等[6]研究发现银屑病患者外周血增殖的PBMC较正常人明显增高，且PBMC的增殖数与银屑病严重程度呈正相关。我们的研究结果显示IL-2水平明显低于对照组，sIL-2R和TNF-α水平明显高于对照组，且IL-2、sIL-2R和TNF-α水平与PASI均呈明显相关性，因此银屑病患者IL-2、sIL-2R和TNF-α水平的变化可能与血中PBMC的增殖有关。

由此我们可以看出，银屑病PBMC的异常活化及其导致的多种细胞因子的异常可能是该病的重要致病机制之一。多种细胞因子之间又可相互影响、相互诱生，更增加了银屑病免疫学发病机制的复杂性，这就需要我们做更深入的研究，以便为银屑病的免疫治疗提供更充分有力的理论依据。

[参考文献]

[1]Mizutani H, Ohmoto Y, Mizutani T, et al. Role of increased production of monocytes TNF-alpha, IL-1beta and IL-6 in psoriasis: relation to focal infection, disease activity and responses to treatments[J]. J Dermatol Sci, 1997, 14(2): 145-153.

[2]杜静，黄家强，龚非力，等. 癫痫患者PBMC分泌TNF-α、IL-6及HLA-Ⅱ类抗原表达的改变[J]. 同济医科大学学报，1997，26（3）：187-190.

[3]Dummer R, Posseckert G, Nestle F, et al. Soluble interleukin-2 receptors inhibit interleukin 2-dependent proliferation and cytotoxicity: explanation for diminished natural killer cell activity in cutaneous T-cell lymphomas in vivo? [J]. J Invest Dermatol, 1992, 98(1): 50-54.

[4]杨竹生，李玛琳，何黎，等. 寻常行银屑并患者外周血单一核细胞产生IL-2及IL-4能力的研究[J]. 中国皮肤性病学杂志，2001，15（2）：76-78.

[5]O'Donnell MC, Catts SV, Ward PB, et al. Increased production of interleukin-2 (IL-2) but not soluble interleukin-2 receptors (sIL-2R) in unmedicated patients with schizophrenia and schizophreniform disorder[J]. Psychiatry Res, 1996, 65(3): 171-178.

[6]Jeffes EW 3rd, Lee GC, Said S, et al. Elevated numbers of proliferating mononuclear cells in the peripheral blood of psoriatic patients correlate with disease severity[J]. J Invest Dermatol, 1995, 105(6): 733-738.

（收稿日期：2007-0501）

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