文冠木喷雾剂中总黄酮含量测定

摘要：目的 建立文冠木喷雾剂中总黄酮的含量测定方法。方法 采用紫外分光光度法，通过紫外可见扫描确定最大吸收波长，以芦丁为对照品制定标准曲线，并进行样品溶液稳定性实验和方法回收率与重复性实验。结果 最大吸收波长为500nm，标准曲线线性范围为10.520mg/L～63.120mg/L，r=0.9997。平均回收率为95.09%，RSD=1.61%，符合要求。结论 该方法简单方便、准确可靠，可以用来进行文冠木喷雾剂中总黄酮的含量测定。

关键词：文冠木；总黄酮；紫外分光光度法

Abstract：Objective To establish a method for determination of total flavonoids inXanthoceras sorbifolia spray. Methods Using UV spectrophotometry， UV Vis scanto determine the maximum absorption wavelength， with rutin as a standard to make the standard curve， and the sample solution stability experiment andrecovery rate and repeatability. Results The maximum absorption wavelength is 500nm， the linear range of standard curve is 10.520～ 63.120mg/L，r=0.9997. The average recovery was 95.09%， RSD=1.61%， meet the requirements. Conclusion The method is simple， accurate and reliable， can be used for the determination of content of total flavonoids in Xanthoceras sorbifoliaspray.

Key words： Xanthoceras sorbifolia Bunge；Total flavonoids； UV Spectrophotometry

文冠木处方由三类药物构成，即文冠木、黄连和人工牛黄。文冠木为无患子科植物文冠木（Xant Hoceras Sorbifolia Bge.）的茎干或枝条的无皮干燥木部，是一种常用的蒙药材。主要用于治疗风湿性关节炎、风湿内热、皮肤风湿、风湿性心脏病等病症[1]，其中有效成分为总黄酮。黄连[2]为毛莨科植物黄连，三角叶黄连或云南黄连的干燥根茎。黄连的药用始载于《神农本草经》，列为上品，能清热燥湿，泻火解毒，现代研究表明黄连的有效成份主要为小檗碱（即黄连素Berberine），含量可达10%左右。人工牛黄[3]由胆酸、猪去氧胆酸、胆红素、胆固醇等配制而成，具有清心、豁痰、开窍、凉肝、息风、解毒等功能。由于该处方药中文冠木质量占有绝大部分，故对其文冠木中的总黄酮进行含量测定，为其进一步开发研究奠定基础。

1仪器及试剂

紫外-可见分光光度仪：岛津UV-2401PC型（日本）；离心机：飞鸽牌LXJ-ⅡB型低速大容量多管离心机；超声波清洗仪：KQ2200B型（昆仑超声仪器有限公司）；分析天平：ESJ200-4型（沈阳龙腾电子有限公司）。芦丁对照品 （中国药品生物制品检定所提供，批号：0080-9705）；其它试剂试药均为分析纯。样品来源：文冠木（ 内蒙古库伦旗蒙药股份有限公司），黄连（重庆石柱黄连有限公司），人工牛黄（内蒙古自治区海拉尔生物化学制药厂）。

2方法学考察与结果

2.1测定方法及波长的选择 根据文献报道[4，5]，文冠木中的黄酮类化合物的3 ， 5 羟基与Al3+生成络合物，在可见光区有最大吸收的特点，故选用芦丁作为对照品，采用紫外分光光度法进行含量测定。分别取芦丁对照品和文冠木醇提取溶液在400～800nm波长范围内进行光谱扫描，从光谱图中可见上述两种溶液在波长500nm附近有明显吸收，故选择500nm为测定波长。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品13.15mg 置5ml容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含2.63mg芦丁对照品。

2.7重复性实验 用加液枪取出同一供试品五份，每份250μL分别注入到25ml容量瓶中，在每一容量瓶中依次加入30%乙醇12.25ml，再分别加入5%亚硝酸钠溶液1.0ml，轻摇后放置6min，再加入10%硝酸铝溶液1.0ml轻摇后放置6min，再加入1mol/LNaoH溶液10.0ml，用30%乙醇定容置25.0ml，充分摇匀后放置15min。时间到后，将每一份放入离心管中进行离心操作，使转数达到4400r/min，并保持5min。离心后取出上清液进行测量，实验数据见表4。

结果表明：供试品溶液的平均浓度为14.652mg/L，，RSD（%）=5.08，说明该方法的重复性良好。

2.8 回收率试验 用加液枪取供试品五份，每份125μL依次加入到五个25ml容量瓶中，再用加液枪加入200μL芦丁对照品溶液置每个容量瓶中，再依次加入30%的乙醇12.125ml，再依次加入5%亚硝酸钠溶液1.0ml轻摇后放置6min，再依次加入10%硝酸。

铝溶液1.0ml轻摇后放置6min，最后在每个25ml容量瓶中加入1mol/LNaoH溶液10.0ml并用胶头吸管吸取30%的乙醇准确定容置25ml，充分摇匀，放置15min，时间到后，将每一份放入离心管中进行离心操作，使转数达到4400r/min，并保持5min。离心后取出上清液进行测量，实验数据见表5。实验结果表明：该方法的平均回收率（%）为95.09%，RSD（%）=1.61。符合要求，说明该方法的准确度良好。

2.9 样品含量测定 用加液枪取五份样品，每份250μL分别注入到5个25ml的容量瓶中，在每瓶中依次加入30%的乙醇12.25ml和5%亚硝酸钠溶液1.0ml，轻摇后放置6min，再依次加入10%硝酸铝溶液1.0ml， 轻摇后放置6min，再依次加入1mol/LNaoH溶液10.0ml，用胶头滴管吸取30%的乙醇精确定容置25ml，充分摇匀后，放置15min。时间到后，将每一份放入离心管中进行离心操作，使转数达到4400r/min，并保持5min。离心后取出上清液进行测量，实验数据见表6。

3结论

本课题对文冠木喷雾剂中总黄酮的含量进行定量分析，并对测定的线性范围（10.520mg/L～63.120mg/L）、精密度RSD%=0.74、稳定性RSD%=0.90、加样回收率（平均回收率为95.09%，RSD%=1.61）进行了考察，结果均符合要求，可以作为文冠木喷雾剂中总黄酮的含量的测定方法。

参考文献：

[1] 宋 玲，郭忠祥.蒙药文冠木总黄酮提取方法研究[J].内蒙古民族大学学报（自然科学版）.2005. 20 （5）： 546-547.

[2]崔学军.黄连及其有效成分的药理研究进展[J].中国药师.2006，9（5）：469-470.

[3]万 彦，付小六，宋君军.分光光度法鉴别氯芬黄敏片等复方制剂中的人工牛黄[J].中国药事.2006，20（1）：55-56.

[4]赵亮，刘恩荔，李青山.紫外分光光度法测定海红果中总黄酮的含量[J].山西医科大学学报，2006，37（2）：169-171.

[5] You B engang，Tang L ihua，Liu Yang. D eterm ina tion of Tota l Flavones in Lysim achia clethroide Duby by UV Spectrophotometry[J].Chinese Wild Plant Resources，2007，26（1）：43-45.