肤痒颗粒阿魏酸含量测定

【摘要】目的 测定肤痒颗粒中阿魏酸含量。方法 采用高效液相法，色谱柱用Shim-pack柱,以甲醇-0.1%磷酸水溶液(体积比31∶69)为流动相，检测波长为320 nm。结果 阿魏酸在19.12-573.6μg范围内，峰面积积分值与阿魏酸量呈线性关系，相关系数r=0.9999；平均加样回收率为99.68%,RSD为0.29%。结论 本法操作简便,结果可靠,重现性好,可作为该产品质量控制的方法。

【关键词】肤痒颗粒 阿魏酸 高效液相色谱法

中图分类号：R286文献标识码：B文章编号：1005-0515（2011）12-289-02

肤痒颗粒由川芎、苍耳子(炒、去刺)、地肤子、红花、白英等五味中药组成。具有祛风活血、除湿止痒的功效,用于治疗皮肤瘙痒、湿疹、荨麻疹等瘙痒性皮肤病[1]。本文以肤痒颗粒中的川芎的主要成分阿魏酸为指标，建立其质量标准的定量检测方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器

岛津LC-2010高效液相色谱仪（紫外可见双波长检测器SPD-10AVP Plus）；BSZZ4S型电子分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；KDQX-260超声波清洗机（济宁科电检测仪器有限公司）。

1.2 试药

阿魏酸对照品，含量测定用，批号110773-200611，中国药品生物制品检定所提供。甲醇，色谱纯，山东禹王实业有限公司禹城化工厂；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱: Shim-pack柱，4.6×150 mm；甲醇-0.1%磷酸水溶液(体积比31∶69)为流动相；检测波长320nm.流速：0.7 mL/min；理论板数按阿魏酸峰计算应不低于6000。分离度大于1.5。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 取阿魏酸对照品适量, 精密称定，置棕色量瓶中，加70%甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备本品1袋，研细，取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，滤过，取续滤液，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。

2.2.3 缺川芎的阴性对照溶液的制备 依据处方中的比例，按制法制备缺川芎的阴性对照样品，按“2.2.2”项方法制备阴性对照溶液。

2.3 系统适用性试验

分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪中测定。结果阿魏酸在16 -17min内出峰，而且与前后的峰均有较好的分离,见图1图2。阴性样品不干扰样品测定,见图3。溶剂峰见图4。

图1 阿魏酸对照品HPLC图谱

图2 供试品溶液HPLC图谱

图3 阴性液HPLC图谱

图4 溶剂峰

2.4 线性关系的考察

精密称取阿魏酸对照品，分别加甲醇制成1.912μg/ml、3.824μg/ml、19.12μg/ml、38.24μg/ml、57.36μg/ml的溶液，分别精密吸取上述溶液10μl注入液相色谱仪，测定峰面积积分值，计算(表一)。以峰面积积分值为纵坐标，阿魏酸对照品进样量为横坐标绘制标准曲线(图5)。得回归方程Y=8264.2+7908686X，相关系数r=0.9999，结果表明阿魏酸量在19.12-573.6μg范围内，峰面积积分值与阿魏酸量呈线性关系。

表一

图5 阿魏酸标准曲线图

2.5 精密度试验

取同一对照品溶液，精密吸取此溶液10μL，按“2.1”项色谱条件重复进样5次，测定阿魏酸峰面积，以测定结果的相对偏差反映方法的精密度，结果见表二。

表二

X=602287 RSD=0.26%

2.6 重现性试验

取同一样品，按“2.2.2”项方法制备5份供试液， 分别进样测定，测定结果见表三

表三

X=0.292mg/袋 RSD=2.24%

2.7 稳定性试验

取同一供试品溶液，按“2.2.2”项方法制备供试液，分别在0、1.5、3、4.5、6 h测定阿魏酸峰面积，结果其RSD值为0.05％，表明样品在6h内稳定。见表四

表四

X=601846.8 RSD=0.05%

2.8 加样回收率试验

将已知含量（0.28mg/袋）的样品研细，分别精密称取3.0g，共计5份，分别精密加入阿魏酸对照品100μg按“2.2.2”项方法制备供试液，进样量10 μL，测定阿魏酸峰面积，计算阿魏酸含量和回收率，结果见表五。

表五

99.68% RSD=0.29%

2.9 样品测定

取3批样品按“2.2.2”项方法制备供试液，并进行含量测定，测定结果见表六。

表六

3 讨论

3.1 选用取本品1袋，研细，取约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流30分钟， 可将阿魏酸提取完全。用甲醇-0.1%磷酸水溶液(体积比31∶69)为流动相，分离效果较好，且无干扰吸收峰。

3.2 应用HPLC法对肤痒颗粒中川芎有效成分阿魏酸的含量进行了测定,灵敏度、准确度高，专属性强，重现性好，可作为质量控制方法。

参考文献

[1]《中华人民共和国卫生部药品标准・中药成方制剂》第六册.