Mta-1在甲状腺肿瘤中的表达及其临床意义

【摘要】 目的 探讨Mta-1蛋白在甲状腺肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学Envision法检测140例甲状腺癌组织、50例甲状腺腺瘤及30例正常甲状腺组织中Mta-1蛋白的表达，分析Mta-1蛋白的表达与甲状腺癌临床病理特征之间的关系。结果 甲状腺癌中Mta-1阳性表达明显高于正常甲状腺组织和甲状腺腺瘤(P

【关键词】 甲状腺肿瘤； 免疫组织化学； Mta-1

甲状腺肿瘤起病隐匿，在临床上发现时多以无痛性甲状腺结节为主要表现，但其具有多变的生物学特征，这给临床术前判断甲状腺肿瘤的良恶性及转移浸润潜力带来一定的困难。近年来甲状腺肿瘤领域研究的热点课题已逐渐集中于探讨甲状腺肿瘤的生物学特性与转移浸润及预后的关系，并寻找相关的分子诊断标志物以提高鉴别诊断甲状腺良恶性肿瘤和判断甲状腺癌转移潜力的准确性，并为分子靶向治疗研究指明新的方向［1，2］。转移相关基因(metastasis associated -1，Mta-1)是近年来发现在许多恶性肿瘤的浸润、转移过程中扮演重要角色的新基因组［3］。目前尚少见Mta-1蛋白在甲状腺良、恶性肿瘤发生、发展、侵袭转移中作用的研究报道［4］。本研究通过观察Mta-1蛋白在甲状腺良、恶性肿瘤中的表达情况，并分析它与甲状腺癌临床病理特征间的关系，旨在探讨Mta-1蛋白在鉴别甲状腺良、恶性肿瘤的诊断价值及其在肿瘤形成、癌变及浸润转移过程中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2005年8月16日～2010年9月15日于东莞石碣医院和暨南大学第一附属医院行手术治疗的甲状腺肿瘤患者190例，其中男46例，女144例；年龄21～72岁，平均(40.5±4.6)岁；甲状腺腺瘤50例，甲状腺癌140例(状癌45例，滤泡状癌45例，髓样癌25例，未分化癌25例)，均经手术切除后送组织病理活检证实。另选择同期甲状腺腺瘤旁的正常甲状腺组织30例为对照组，均经组织病理活检证实。

1.2 方法

1.2.1 试剂 Elivsion试剂盒和DAB显色试剂盒均购自广州安必平医药科技有限公司，Mta-1鼠抗人多克隆抗体均购自Bioworld Technology公司(抗体稀释度1∶150)。

1.2.2 免疫组织化学染色 所有手术切除标本经10%福尔马林液固定，常规石蜡包埋，连续4 μm切片。采用Elivsion两步法Mta-1蛋白的表达，操作程序按说明书进行：脱蜡、脱水、抗原修复，30 ml/L过氧化氢溶液室温封闭10 min，滴加第一抗体Mta-1，37 ℃孵育2 h，滴加第二抗体辣根酶标记羊抗鼠IgG多聚体，37 ℃孵育20 min，DAB显色3～5 min，苏木素对比衬染，光镜下观察。阴性对照以PBS替代一抗，用已知阳性标本作阳性对照。

1.2.3 结果判断 Mta-1蛋白主要在细胞核表达，呈棕黄色颗粒状。随机选择5个高倍镜视野(400倍)，以染色强度和阳性细胞率的得分之和进行判断：无染色记0分，弱染色(浅黄色)记1分，中等染色(棕黄色)记2分，强染色(黄褐色)记3分；阳性细胞率≤5%记0分，＞5%～25%记1分，＞25%～50%记2分，＞50%记3分。上述两项积分相加，0分为阴性(-)，1～2分为弱阳性(+)，3～4分为中等阳性(++)，5～6分为强阳性(+++)。

1.3 统计学方法 采用SPSS 13.0统计软件包进行数据分析。计数资料运用χ2检验法。以P

2 结果

2.1 Mta-1在各型甲状腺肿瘤组织和正常甲状腺组织中的表达 30例正常甲状腺组织中无Mta-1阳性表达；甲状腺腺瘤HIF-1α阳性表达率为8.0%(4/50)；甲状腺癌HIF-1α阳性表达率为55.7%(78/140)。正常甲状腺组织与甲状腺腺瘤中Mta-1阳性表达差异无统计学意义(P>0.05)，甲状腺癌中Mta-1阳性表达明显高于正常甲状腺组织和甲状腺腺瘤，差异均有统计学意义(P0.05)，见表1。

2.2 甲状腺癌组织中Mta-1与临床病理特征的关系 甲状腺癌组织中，Mta-1的表达与肿瘤大小、AJCC分期、分化程度、是否有颈部淋巴结转移以及浸润深度密切相关(P0.05）。见表2。

3 讨论

近年来影像学技术的发展飞速，在一定程度上提高了甲状腺肿瘤的早期诊断率，但影像学技术对早期鉴别诊断甲状腺肿瘤的良恶性仍存在不确定性。因此，寻找能鉴别良、恶性甲状腺肿瘤并评估其生物学特性的肿瘤分子标志物已成为学者们最迫切需要解决的问题［5～6］。

Mta-1是1993年Pencil等应用差异杂交技术从具有转移潜能的鼠乳腺癌细胞株13762NF中筛选克隆出的，因该基因的表达与乳腺肿瘤转移成正相关，故被命名为（肿瘤）转移相关基因。研究表明，Mta-1在人正常组织，包括心、肾、肺、肝等均呈低水平表达，而在肿瘤组织中表达水平较高，且与人类许多恶性肿瘤的侵袭转移过程紧密相关［7～9］。本研究结果显示，甲状腺癌中Mta-1阳性表达明显高于正常甲状腺组织和甲状腺腺瘤，差异有统计学意义(P0.05)。表明Mta-1与甲状腺癌发生发展密切相关，可能参与促进肿瘤细胞异常增殖的过程，且在不同病理类型甲状腺癌发生过程中发挥的作用是相似的。提示Mta-1可以作为辅助甲状腺癌早期鉴别诊断的辅助分子学指标。

同时本研究结果分析了Mta-1表达与甲状腺癌的临床病理特征之间的关系，发现Mta-1的表达与甲状腺癌组织的肿瘤大小、是否有颈部淋巴结转移、浸润深度、分化程度以及AJCC分期密切相关(P

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（收稿日期：2011-09-19）