土荆芥化学成分的研究

[摘要]从土荆芥Chenopodium ambrosioides的全草中分离得到12个化合物，通过波谱解析，化合物结构分别鉴定为山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷（kaempferol-7-O-α-L-rhamnopyranoside，1），山柰酚-3，7-O-α-L-二鼠李糖苷（kaempferol-3，7-di-O-α-L-rhamnopyranoside，2），万寿菊素（patuletin，3），槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷（quercetin-7-O-α-L-rhamnopyranoside，4），蚱蜢酮（grasshopper ketone，5），4-hydroxy-4-methyl-2-cyclohexen-1-one（6），丁香脂素（syringaresinol，7），苄基-β-D-葡萄糖苷（benzyl β-D-glucopyranoside，8），dendranthemoside B（9），反式阿魏酸酰对羟基苯乙胺（N-trans-feruloyl tyramine，10），N-3-羟基-4-甲氧基苯乙基反式阿魏酸酰胺（N-trans-feruloyl 4′-O-methyl dopamine，11），N-p-香豆酰酪胺{4-hydroxy-N-[2-（4-hydroxyphenyl）ethyl]benzamide，12}。其中化合物3，6～8，10，12为首次从该属中分离得到。化合物2～12为首次从该植物中分离得到。

[关键词]藜科；土荆芥；化学成分

[收稿日期]2013-11-03

[基金项目]国家“重大新药创制”科技重大专项（2012ZX09301002001003）

[通信作者]*陈若芸，研究员，硕士生导师，Tel/Fax：（010）83161622，E-mail：

[作者简介]宋坤，硕士研究生，E-mail：土荆芥Chenopodium ambrosioides L.又名鹅脚草、红泽兰、钩虫草等，为藜科Chenopodiaceae藜属植物的一年生或多年生草本植物。该属植物共有250余种，广泛分布于世界各地。我国藜属植物有19种，主要分布于盐碱地和北方的干旱地区。其中约6种为民间用药。具有杀虫，除湿热，止痒，止泻，解毒消肿等功效[1]。

土荆芥原产于热带美洲，现广泛分布于全世界温带至热带地区。具祛风、除湿、杀虫、通经、止痛功效，用于治疗皮肤风湿痹痛、钩虫、蛔虫、痛经、闭经、皮肤湿疹和蛇虫咬伤等[1]。土荆芥还是中成药荆花胃康胶丸中的一味主药，其具有治疗胃病和十二指肠溃疡的作用。已有的报道多是针对土荆芥的挥发油成分，对其非挥发油成分报道较少[2]。本课题组对其非挥发油成分进行研究，从中分离得到12个化合物，经光谱解析，确定了它们的结构。

1材料

Boetius熔点测定仪（温度未校正）；Varian公司Mercury-400和INOVA-500核磁共振仪；Agilent 1100 LC/MSD Trap SL型质谱仪；Agilent 1100高效液相色谱仪；Dikema C18分析型色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；青岛海洋化工厂硅胶（160～200，200～300目）；YMC公司ODS填料；Pharmacia Sephadex LH-20；南开大学化工厂生产的D101型大孔树脂。

土荆芥药材是于2011年1月由陕西天士力集团药材基地提供，经中国医学科学院药物研究所马林副研究员鉴定为土荆芥C.ambrosioides，标本保存于中国医学科学院药物研究所标本室，标本号99054。

2提取和分离

土荆芥带有果穗的干燥地上部分31 kg用95%乙醇回流提取3次，每次提取1 h，经浓缩干燥后得到2 076 g浸膏，将浸膏悬浮于水中，依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取。乙酸乙酯部分（47 g）经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇（50∶1～30∶1～10∶1～5∶1～0∶1）梯度洗脱，得到20个部分。再将第11份重结晶（甲醇）得到化合物1（1 g）。第17份经Sephadex LH-20（甲醇），制备HPLC分离，在260 nm下用40%甲醇于45 min得到化合物2（100 mg）。第8份经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇（30∶1）洗脱得到的其中1份，经制备HPLC分离，在254 nm下用60%甲醇于45 min得到化合物3（5 mg），另一份经制备HPLC分离在300 nm下用40%甲醇于45 min得到化合物12（6 mg）。第19份经Sephadex LH-20（甲醇），经制备HPLC分离，在320 nm下用40%甲醇于50 min 得到化合物10（5 mg）；氯仿部分185 g经硅胶柱色谱，用石油醚-乙酸乙酯（85∶15～70∶30～1∶1），乙酸乙酯，甲醇快速洗脱，共得到BA，BB，BC，BD，BE 5个部分。其中BD部分（约20 g）经硅胶柱色谱，二氯甲烷-甲醇（100∶1～80∶1～60∶1～40∶1～20∶1～0∶1）洗脱得到20个部分。将第10部分经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇（20∶1），经制备HPLC分离，在230 nm下用25%甲醇洗脱于80 min得到化合物5（6 mg）。第8部分经硅胶柱色谱，石油醚-乙酸乙酯（2∶1）洗脱得到的其中一份经制备HPLC分离，在230 nm下用25%甲醇洗脱于30 min得到化合物6（5 mg），洗脱得到的另一部分经制备HPLC分离，在230 nm下用40%甲醇洗脱于45 min得到化合物11（6 mg）。第7部分经硅胶柱色谱，石油醚-乙酸乙酯（5∶1），制备HPLC分离，在230 nm下用50%甲醇洗脱于30 min得到化合物7（10 mg）；正丁醇部分240 g用水溶解，经D101大孔树脂分离，依次用水，30%，50%，70%，95%乙醇梯度洗脱。30%乙醇洗脱部分经反相色谱柱，甲醇-水（25∶75～100∶0）梯度洗脱得到15个部分，将第11份重结晶（甲醇）得到化合物4（20 mg）。第5份经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇-水（40∶10∶1），经制备HPLC分离，在210 nm下用25%甲醇于40 min得到化合物8（6 mg）。将第4部分经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇-水（40∶10∶1），经制备HPLC分离，在230 nm下用25%甲醇于55 min得到化合物9（5 mg）。

3结构鉴定

化合物1黄色针状结晶（甲醇），mp 221～223 ℃；ESI-MS m/z 433[M+H]+；1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ：1.12（3H，d，J=6.5 Hz，Rha-Me），5.53（1H，br s，Rha-H-1″），6.41（1H，d，J=1.5 Hz，H-6），6.81（1H，d，J=1.5 Hz，H-8），6.92（2H，d，J=9.0 Hz，H-3′，5′），8.08（2H，d，J=9.0 Hz，H-2′，6′）；13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：147.6（C-2），136.2（C-3），176.2（C-4），160.5（C-5），98.9（C-6），161.5（C-7），94.5（C-8），155.8（C-9），104.8（C-10），121.6（C-1′），129.8（C-2′，6′），115.6（C-3′，5′），159.5（C-4′），98.5（C-1″），70.4（C-2″），70.2（C-3″），71.7（C-4″），70.0（C-5″），18.0（Rha-Me）。以上数据与文献[3]一致，故鉴定该化合物为山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷（kaempferol-7-O-α-L-rhamnopyranoside）。

化合物2黄色针状结晶（甲醇），mp 218～220 ℃；ESI-MS m/z 579[M+H]+；1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ：1.12（3H，d，J=6.5 Hz，Rha-Me），0.80（3H，d，J=5.0 Hz，Rha′-Me），5.54（1H，br s，Rha-H-1″），5.29（1H，br s，Rha′-H-1），6.45（1H，d，J=1.5 Hz，H-6），6.78（1H，d，J=1.5 Hz，H-8），6.91（2H，d， J=8.5 Hz，H-3′，5′），7.86（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′）；13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：156.2（C-2），134.6（C-3），178.0（C-4），160.3（C-5），99.6（C-6），161.8（C-7），94.7（C-8），157.9（C-9），105.9（C-10），120.4（C-1′），161.0（C-4′），130.8（C-2′，6′），115.5（C-3′，5′），101.9（C-1″），71.2（C-2″），70.8（C-3″），71.7（C-4″），70.1（C-5″），17.6（Rha-Me），98.5（C-1），70.4（C-2），70.3（C-3），70.7（C-4），69.9（C-5），18.0（Rha′-Me′）。以上数据与文献[4]一致，故鉴定该化合物为山柰酚-3，7-O-α-L-二鼠李糖苷（kaempferol-3，7-di-O-α-L-rhamnopyranoside）。

化合物3黄色粉末，ESI-MS m/z 333[M+H]+：1H-NMR（DMSO-d6，300 MHz）δ：3.74（3H，s，-OMe），7.66（1H，m，H-2′），7.53（1H，d，J=7.5 Hz，H-6′），6.87（1H，d，J=7.5 Hz，H-5′），6.50（1H，s，H-8）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：147.4（C-2），135.9（C-3），176.5（C-4），151.9（C-5），131.3（C-6），152.2（C-7），94.1（C-8），151.9（C-9），103.8（C-10），122.5（C-1′），115.5（C-2′），145.5（C-3′），147.4（C-4′），115.5（C-5′），120.5（C-6′），60.5（6-OMe）。以上数据与文献[5]一致，故鉴定该化合物为万寿菊素（patuletin）。

化合物4黄色结晶（甲醇），mp 278～282 ℃；ESI-MS m/z 449[M+H]+；1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ：1.12（3H，d，J=6.0 Hz，Rha -Me），5.54（1H，br s，Rha-H-1″），6.40（1H，d，J=1.5 Hz，H-6），6.77（1H，d，J=1.5 Hz，H-8），7.57（1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-6′），7.71（1H，d，J=1.5 Hz，H-2′），6.88（1H，d，J=8.0 Hz，H-5′）；13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：147.6（C-2），136.2（C-3），176.1（C-4），160.5（C-5），98.5（C-6），161.5（C-7），94.3（C-8），155.8（C-9），104.8（C-10），121.9（C-1′），115.7（C-2′），145.2（C-3′），148.0（C-4′），115.3（C-5′），120.3（C-6′），98.9（C-1″），70.4（C-2″），70.2（C-3″），71.7（C-4″），69.9（C-5″），18.1（Rha-Me）。以上数据与文献[6]一致，故鉴定该化合物为槲皮素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（quercetin-7-O-α-L-rhamnopyranoside）。

化合物5白色粉末，ESI-MS m/z 247[M+Na]+；1H-NMR（DMSO-d6，600 MHz）δ：1.04（3H，s，H-10），1.25（3H，s，H-11），1.29（3H，s，H-12），2.10（3H，s，H-13），1.21（1H，m，H-2a），2.04（1H，m，H-2b），2.51（1H，m，H-4a），1.79（1H，m，H-4b），4.01（1H，m，H-3），5.74（1H，s，H-8）；13C-NMR（DMSO-d6，150 MHz）δ：209.2（C-7），197.9（C-9），118.8（C-6），99.6（C-8），70.7（C-5），62.1（C-3），49.6（C-2），49.3（C-4），35.6（C-1），31.7（C-10），30.4（C-12），28.8（C-11），26.2（C-13）。以上数据与文献[7]一致，故鉴定该化合物为蚱蜢酮（grasshopper ketone）。

化合物6无色油状物，EI-MS m/ z 127[M+H]+；1H-NMR（CD3OD，400 MHz）δ：5.77（1H，d，J=10.0 Hz，H-2），6.77（1H，d，J=10.0 Hz，H-3），1.35（3H，s，H-7），2.42（2H，m，H-6），2.05（2H，m，H-5）；13C-NMR（CD3OD，100 MHz）δ：201.5（C-1），128.1（C-2），157.5（C-3），68.7（C-4），35.7（C-5），38.0（C-6），27.0（C-7）。以上数据与文献[8]一致，故鉴定该化合物为4-hydroxy-4-methyl-2-cyclohexen-1-one。

化合物7白色粉末，ESI-MS m/z 441[M+Na]+；1H-NMR（CDCl3，600 MHz）δ：6.59（4H，s，H-2，2′，6，6′），5.51（2H，s，H-4，4′），4.73（2H，m，H-7，7′），4.28（2H，m，H-9b，9′b），3.92（2H，m，H-9a，9′a），3.91（12H，s，-OMe×4），3.10（2H，m，H-8，8′）；13C-NMR（CD3OD，150 MHz）δ：148.0（C-3，3′，5，5′），134.9（C-4，4′），131.7（C-1，1′），103.2（C-2，2′，6，6′），86.2（C-7，7′），55.4（C-8，8′），71.4（C-9，9′），56.8（OMe）。以上数据与文献[9]一致，故鉴定该化合物为丁香脂素（syringaresinol）。

化合物8白色粉末，ESI-MS m/z 293[M+Na]+；1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ：7.38～7.27（5H，m，Ar-H），4.82（1H，d，J=12.5 Hz，H-7a），4.57（1H，d，J=12.5 Hz，H-7b），4.22（1H，d，J=8.0 Hz，H-1′），3.70（1H，dd，J=11.0，5.5 Hz，H-6′a），3.46（1H，d，J=11.0 Hz，H-6′b）；13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：138.2（C-1），127.7（C-2，6），128.3（C-3，5），127.5（C-4），70.3（C-7），102.2（C-1′），73.6（C-2′），77.1（C-3′），69.6（C-4′），76.9（C-5′），61.3（C-6′）。以上数据与文献[10]一致，故鉴定该化合物为苄基-β-D-葡萄糖苷（benzyl β-D-glucopyranoside）。

化合物9无色无定形粉末，ESI-MS m/z 388[M+Na]+；1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ：1.54（1H，t，J=11.5 Hz，H-2a），1.44（1H，m，H-2b），3.78（1H，m，H-3），1.37（1H，q，J=12.0 Hz，H-4a），1.68（1H，br d，J=12.0 Hz，H-4b），1.99（1H，m，H-5），6.76（1H，d，J=16.0 Hz，H-7），6.18（1H，d，J=16.0 Hz，H-8），2.21（3H，s，H-10），0.95（3H，s，H-11），0.76（3H，s，H-12），0.69（3H，d，J=6.5 Hz，H-13），4.87（1H，d，J=7.0 Hz，H-1′）；13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：198.0（C-9），152.6（C-7），130.5（C-8），73.6（C-3），41.3（C-2），40.1（C-1），37.9（C-4），33.6（C-5），77.1（C-6），27.2（C-10），25.7（C-11），24.6（C-12），16.3（C-13），101.5（C-1′），73.4（C-2′），76.9（C-3′），70.3（C-4′），76.8（C-5′），61.3（C-6′）。以上数据与文献[11]一致，故鉴定该化合物为dendranthemoside B。

化合物10白色粉末，ESI-MS m/z 314[M+H]+；1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ：7.31（1H，d，J=15.5 Hz，H-7），6.44（1H，d，J=15.5 Hz，H-8），6.99（1H，dd，J=8.0 Hz，J=1.5 Hz，H-6），7.12（1H，d，J=1.5 Hz，H-2），6.80（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），7.02（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），6.69（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′），3.81（3H，s，-OMe），2.65（2H，m，H-7′），3.33（2H，m，H-8′）；13C-NMR（DMSO-d6，125 MHz）δ：126.9（C-1），111.2（C-2），148.7（C-3），148.3（C-4），116.1（C-5），122.0（C-6），139.3（C-7），119.5（C-8），165.8（C-9），130.0（C-1′），129.9（C-2′，6′），115.6（C-3′，5′），156.1（C-4′），56.0（OMe），40.4（C-8′），40.0（C-7′）。以上数据与文献[9]一致，故鉴定该化合物为反式阿魏酸酰对羟基苯乙胺（N-trans-feruloyltyramine）。

化合物11白色粉末，ESI-MS m/z 343[M]+；1H-NMR（DMSO-d6，600 MHz）δ：7.53（1H，d，J=15.6 Hz，H-7），6.17（1H，d，J=15.6 Hz，H-8），7.04（1H，dd，J=8.4，1.8 Hz，H-6），6.97（1H，d，J=1.8 Hz，H-2），6.90（1H，d，J=8.4 Hz，H-5），6.87（1H，d，J=8.4 Hz，H-5′），6.72（1H，m，H-2′），6.71（1H，m，H-6′），3.63（2H，m，H-8′），2.82（2H，t，J=7.2 Hz，H-7′），3.91（3H，s，3-OMe），3.88（3H，s，4′-OMe）；13C-NMR（DMSO-d6，150 MHz）δ：127.3（C-1），111.2（C-2），147.4（C-3），146.7（C-4），114.7（C-5），122.2（C-6），141.1（C-7），118.1（C-8），166.1（C-9），130.1（C-1′），109.5（C-2′），146.7（C-3′），144.3（C-4′），114.4（C-5′），121.4（C-6′），56.0（3-OMe，4′-OMe）。以上数据与文献[12]一致，故鉴定该化合物为N-3-羟基-4-甲氧基苯乙基反式阿魏酸酰胺（N-trans-feruloyl4′-O-methyldopamine）。

化合物12白色粉末，ESI-MS m/z 284[M+H]+；1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：7.37（2H，d，J=8.4 Hz，H-5，9），7.01（2H，d，J=8.4 Hz，H-6，8），6.78（2H，d，J=8.4 Hz，H-4′，8′），6.68（2H，d，J=8.4 Hz，H-5′，7′），7.38（1H，d，J=15.6 Hz，H-3），6.38（1H，d，J=15.6 Hz，H-2），2.64（2H，t，J=8.0 Hz，H-2′），3.31（2H，m，H-1′）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：165.3（C-1），118.7（C-2），138.6（C-3），125.9（C-4），129.4（C-5，9），115.1（C-6，8），158.8（C-7），40.7（C-1′），34.5（C-2′），129.5（C-3′），129.1（C-4′，8′），155.6（C-6′），115.7（C-5′，7′）。以上数据与文献[13]一致，故鉴定该化合物为N-p-香豆酰酪胺{4-hydroxy-N-[2-（4-hydroxyphenyl）ethyl]benzamide}。

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Chemical constituents from Chenopodium ambrosioides

SONG Kun， WANG Hong-qing， LIU Chao， KANG Jie， LI Bao-ming， CHEN Ruo-yun*

（State Key Laboratory for Bioactive Substances and Functions of Natural Medicines， Institute of Materia Medica，

Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College， Beijing 100050， China）

[Abstract]Twelve compounds were isolated from the herb of Chenopodium ambrosioides， and their structures were identified by spectroscopic methods as kaempferol-7-O-α-L-rhamnopyranoside（1），kaempferol-3，7-di-O-α-L-rhamnopyranoside（2）， patuletin（3），quercetin-7-O-α-L-rhamnopyranoside（4）， grasshopper ketone（5）， 4-hydroxy-4-methyl-2-cyclohexen-1-one（6）， syringaresinol（7），benzyl β-D-glucopyranoside（8）， dendranthemoside B（9），N-trans-feruloyl tyramine（10），N-trans-feruloyl 4′-O-methyldopamine（11）， and 4-hydroxy-N-[2-（4-hydroxyphenyl）ethyl]benzamide（12）.Among them，compounds 3，6-8，10，and 12 were isolated from the genus Chenopodium for the first time，and compounds 2-12 were isolated from this plant for the first time.

[Key words]Chenopodiaceae； Chenopodium ambrosioides； chemical constituent

doi：10.4268/cjcmm20140218