HPLC法测定小儿治喘灵口服液中甘草苷的含量

【摘要】目的：用HPLC法对小儿治喘灵口服液中甘草苷进行了含量测定研究。方法：采用色谱柱：Nova-Pak C18柱(4.6mm×150mm，4um，美国Waters公司); 流动相：乙腈-2.5%冰醋酸溶液（13：87）；波长276nm；流速1.0mL/min。结果：甘草苷的线性范围为0.0313ug~0.5008ug(r=0.9999)。平均回收率为98.84%，RSD为0.65%。结论：此法简便、快速、准确，为制定制剂的质量标准提供了参考。

【关键词】小儿治喘灵口服液 甘草苷 高效液相色谱法

Determination of Liquiritin in xiaoerzhichuanling oral solution by HPLC

【Absract】 OBJECTIVE To establish a HPLC methodfor the determination of liquiritin in xiaoerzhichuanling oral solution. METHODS The chromatographic condition included Nova-Pak C18 column(4.6mm×150mm，4um) and the mobile phase consisting of acetonitrile -2.5%acetic acid(13:87). Detectior wavelength was at 276nm .A flow rate was 1.0 mL/min. RESULTS:The linear range of liquiritin was 0.0313ug-0.5008ug with correlation coefficient 0.9999 .The average recovery of Liquiritin was 98.84%,andRSD was 0.65%.CONCLUSION It was proved that the method was convenient, simple, rapid and accurate that could be used for quality control of Jiawei-shenmaiyin oral solution.

【Key words】xiaoerzhichuanling oral solutionLiquiritin HPLC

小儿治喘灵口服液由党参、黄芪、制半夏、五味子、桂枝、北沙参、熟地、甘草等中药组成，具有补肾纳气、止咳平喘功效。用于治疗小儿哮喘，尤其在哮喘平缓期，具有明显的防治哮喘反复发作的功效。本文建立了甘草苷的含量测定方法，但甘草苷的测定只是提供参考，质量标准还有待以后提高。

1 仪器与试药

Waters 2690 高效液相色谱仪（美国Waters 公司）；2487紫外检测器；Millenium32色谱工作站。

甘草苷对照品（111610-200503）购于中国药品生物制品检定所。

乙腈为进口高效液相纯，其余试剂均为分析纯。

2 含量测定

2.1色谱条件：色谱柱：Nova-Pak C18柱（4.6×150mm,4um，美国Waters公司）；流动相：乙腈-2.5%冰醋酸溶液（13∶87）；波长276nm；流速1.0mL/min；进样量10uL。进样前样品用0.45um的微孔滤膜过滤。

2.2标准曲线的绘制：精密称取甘草苷对照品6.26mg，置50.0mL容量瓶中，加70%乙醇稀释至刻度（0.1252mg/mL）。精密吸取上述对照品溶液1.0mL，置10.0mL容量瓶中，加70%乙醇稀释置刻度（12.52ug/mL）。按2.1色谱条件进样，进样量分别为2.5uL;5.0uL;10.0uL;20.0uL;40.0uL。以峰面积的积分值与进样量进行线性回归，求得回归方程为Y=1853688.64X-30143.42(R=0.9999)。测得甘草苷的线性范围为0.0313ug~0.5008ug。

2.3阴性对照实验：按处方工艺，制成不含甘草的空白对照溶液，按样品测定方法配成阴性对照品溶液，以2.1法进样，结果表明空白无干扰，实验专属性强，见图（1）。

Areference; Bblank; Csample

2.4精密度实验:取同一份对照品溶液，按2.1色谱条件连续反复进样6次，计算RSD值为2.03%。

2.5重复性实验:精密吸取同一批号（021227）的样品6份，按样品测定项下配制，按2.1色谱条件进样，测得甘草苷含量分别为0.4108mg/mL、0.4228 mg/mL、0.4378 mg/mL、0.4198 mg/mL、0.4140mg/mL、0.4300 mg/mL。平均为0.4225 mg/mL，RSD为2.38%。

2.6稳定性实验:每隔2h,4h,6h,8h,10h对同一样品进行测定，计算RSD值为2.64%。

2.7加样回收实验:取已知浓度的样品（021227）1.0mL,6份，置50mL容量瓶中，分别精密移入甘草苷对照品溶液（精密称取甘草苷对照品4.28mg，置10mL容量瓶中，加70%乙醇至刻度）1.0mL，加70%乙醇至刻度，摇匀，按2.1色谱条件进样测定，计算回收率，结果见表1。

2.8样品的测定:精密移取样品1.0mL，用70%乙醇定容为25mL，按2.1色谱条件进样测定，将峰面积积分，代入回归方程，计算含量，结果见表2。

3 讨论

在做高效液相色谱时，查文献［１，２］采用多种流动相比较，有的空白有干扰、有的出峰太快，最后采用乙腈-2.5%冰醋酸（13：87）为流动相，空白无干扰，分离效果最好。

测定样品时发现含量相差很大，所以有必要对药材源头进行质量控制，才能保障成品有更好的质量。

参考文献

1 何三民，石森林.HPLC法测定甘草中甘草素，异甘草素，甘草苷的含量.中草药，2003，34（7）：618

2 国家药典委员会.中华人民共和国药典.2005年版（一部）：59-60

作者单位：200233上海市徐汇区田林街道社区卫生服务中心1

200233上海市第八人民医院2