芪桂益脉灵对大鼠心肌缺血再灌注损伤模型血清内皮素及降钙素基因相关肽的影响

关键词 心肌缺血再灌注 芪桂益脉灵 内皮素 降钙素基因相关肽 大鼠

资料与方法

材料：普通Wister大鼠70只［SCXK(辽)2003-0012］，雌雄各半，200～250g，由沈阳市双义实验动物研究所提供。

药品试剂:芪桂益脉灵由黄芪100g、桂枝20g、苦参20g、三七15g、黄连7.5g、龙齿20g、党参50g、麦冬15g、五味子15g、炒枣仁20g十味中药组成,经水煎浓缩；消心痛溶于生理盐水，供实验用。内皮素(ET)及降钙素基因相关肽（CGRP）放射免疫分析药盒均购自北京市。

动物模型制备：用20%乌拉坦(2ml/kg)腹腔麻醉大鼠。连接四道生理记录仪，暴露左颈总动脉，插动脉套管以监测血压。行气管插管连接小动物呼吸机,频率90次/分钟,潮气量12ml,呼∶吸为1∶1。沿胸骨左缘第3、4肋间逐层打开胸腔,轻压暴露心脏,用穿有5-0缝合线的3/8弯针从左心耳下缘1mm处进针,钩绕左冠状动脉前降支主干,于肺动脉圆锥旁出针。两线间放置一根聚乙烯小管,拉紧丝线形成闭环并用止血钳固定即产生缺血,放松丝线即发生再灌注。心肌缺血依据心肌局部青紫、心电图ST段上抬、放松丝线局部心肌反应性充血、ST段下移、出现心律失常，表明再灌注成功。

分组及处理：70只Wister大鼠随机分为七组（每组10只），正常对照（Normal）组：灌服生理盐水12ml/（kg・日）,不造模；假手术（Sham）组：灌服生理盐水12ml/（kg・日）,造模时完成全部手术操作，只穿线不结扎；缺血再灌注（I/R）组：灌服生理盐水12ml/（kg・日）,造模时持续缺血30分钟,再灌2小时；缺血预适应（IPC）组：灌服生理盐水12ml/（kg・日），造模时先行3次缺血5分钟,再灌5分钟,然后缺血30分钟,再灌2小时；消心痛（ID）组：灌服消心痛2.7mg/（kg・日），造模按I/R组操作；芪桂益脉灵低剂量（QGYMLL）组：灌服芪桂益脉灵10g/（kg・日），造模按I/R组操作；芪桂益脉灵高剂量（QGYMLH）组:灌服芪桂益脉灵20g/（kg・日），造模按I/R组操作。上述药物在实验前制成等体积(12ml/kg)混悬液备用,连续灌服7天。末次给药后1小时,冠状动脉结扎复制心肌缺血模型。

ET、CGRP的检测：实验结束后，动脉采血2ml，用于实验。按照试剂盒操作说明，用放免法测定血清ET及CGRP。

统计学处理：所有数据以均数±标准差（X±S）表示，用SPSS13.0进行单因素方差分析，组间比较采用q检验。P＜0.05表示差异具有显著性。

结 果

各组动物血清ET及CGRP含量变化（见表）。

结果表明：Normal组与Sham组相比，血清ET及CGRP均无显著性差异（P>0.05）；I/R组、IPC组、ID组、QGYMLL组、QGYMLH组与Sham组相比血清ET均升高（P

讨 论

近年来的研究表明,心肌缺血再灌注时,冠状动脉血管内皮细胞缺血、缺氧,直接或间接刺激ET前体原基因的转录,促进ET的释放。ET是由血管内皮细胞释放的人体内最强的缩血管活性肽,过量释放可引起冠状动脉强烈痉挛,心肌缺血坏死,并使梗死面积扩大,进一步加重血管内膜损伤。CGRP是目前已知的最强的舒血管活性多肽,有研究发现,一次短暂缺血发作就可引起CGRP的明显释放,提示CGRP可能是一种内源性心肌保护物质。

心肌缺血再灌注损伤的中医病机以心气亏虚为本，血脉瘀阻为标。本实验选择具有益气养心、行气活血、通调血脉的芪桂益脉灵，从中药药理性预适应的角度探讨了其对心肌缺血再灌注损伤的保护作用，证实了缺血预适应和芪桂益脉灵预处理可以使血ET减少，血CGRP增加。

芪桂益脉灵是治疗冠心病心绞痛的有效方剂。方中黄芪益气补心,桂枝温阳通经,二药配合补心气通心脉为主药；党参助黄芪补气养心、行气活血作用,三七有活血化瘀、养血行血通脉之功,故为臣药。该方通补兼施，标本兼顾，恰中心肌缺血再灌注损伤的病机。另外，黄芪具有调节抗再灌注损伤的作用，这种作用很可能是其心肌保护效应的机制之一。党参、麦冬、五味子能增加冠脉血流量,改善心肌供血,调整心肌代谢,降低心肌耗氧量,增强机体的抗缺氧能力,并能调节血压,改善左室功能,增加左室射血分数,改善微循环,并使血浆纤维蛋白含量减少。目前药物理预适应的研究主要集中在单味中药或有效成分，探讨复方药理预适应是否可以通过多途径、多机制模拟缺血预适应启动心肌的内源性调控保护,具有深远的意义。