尖锐湿疣局部皮损内的白介素2\白介素4\白介素10和白介素12水平的研究

【摘要】 目的 研究尖锐湿疣患者局部皮损内的细胞因子白介素2 (IL-2)、白介素4(IL-4)、白介素10(IL-10)和白介素12 (IL-12)在发病机制中的作用。方法 使用双抗体夹心ELISA法对尖锐湿疣患者局部疣体组织内的IL-2、IL-4、IL-10和IL-12的水平进行检测。结果 尖锐湿疣组的疣体组织内的IL-2和IL-12水平都明显低于正常对照组,而IL-4和IL-10水平都明显高于正常对照组;复发性尖锐湿疣组的疣体组织内的IL-2和IL-12水平都明显低于未复发组,而IL-4和IL-10水平都明显高于未复发组,差异均有统计学意义。结论 尖锐湿疣患者局部皮损内的细胞免疫功能下降,可能与疾病的发生及复发有关。

【关键词】 尖锐湿疣;白介素2;白介素4;白介素10;白介素12

作者单位:200080上海交通大学附属第一人民医院皮肤科

尖锐湿疣(CA)是由人瘤病毒(HPV) 感染引起的一种性传播疾病。近年来我国尖锐湿疣的发病率呈明显上升趋势,而且治疗后复发率很高,成为性病临床工作中的一个重点和难点。一些研究表明CA的发生、消退、复发及癌变都与机体的免疫功能有关[1]。白介素2 (IL-2) 、白介素4(IL-4)、白介素10(IL-10)和白介素12(IL-12)等细胞因子与机体的免疫状况密切相关。为探讨疣体皮损局部的免疫状态在尖锐湿疣发病机制中的作用,我们对CA患者局部疣体组织内的IL-2、IL-4、IL-10和IL-12等细胞因子的水平进行了研究,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 病例资料 患者均来自我院皮肤性病科就诊的初发CA, 根据2000年我国卫生部制定的尖锐湿疣诊断标准确诊。患者3个月内未接受免疫疗法及其他治疗,且排除自身免疫性疾病、严重系统性疾病和感染性疾病。共收集60例男性 CA 患者的典型皮损标本,年龄19~47岁,平均31.5岁;病期3 d~6个月,平均 1.8月。所有CA患者均经治疗清除所有疣体皮损,随访观察共6个月,分为复发组和未复发组 (16例患者的疣体经治疗完全消失后,在随访期间又在局部重新出现新发的疣体皮损者定为复发;44例未出现者定为未复发)。另取14例健康男性包皮环切术的包皮组织作为正常对照组。

1.2 实验步骤

1.2.1 标本制备 常规消毒局部皮肤,切取CA患者的部分疣体皮损,称重后用生理盐水冲洗3 次,再以50 mg/ml比例加生理盐水,置于组织研磨器内研磨成匀浆后离心,取上清液分装,置-30℃冰箱内保存待测。

1.2.2 对组织标本内的IL-2、IL-4、IL-10和IL-12的水平进行检测。按照ELISA检测试剂盒说明书操作,使用双抗体夹心ELISA 方法,将标准品倍比稀释,用酶标测定仪分别在波长450 nm 处测定各孔的OD 值,绘制标准曲线;测定各个实验标本的OD 值,从中求出每个标本的各细胞因子的浓度水平。ELISA检测试剂盒由晶美生物工程有限公司提供。

1.3 统计学分析 应用SPSS 13.0 统计软件包对实验结果进行统计处理。检测的计量资料用均数±标准差(x±s) 表示;使用方差分析和LSD检验等方法对实验数据进行统计分析。P

2 结果

我们对尖锐湿疣患者局部疣体组织内的细胞因子检测结果显示,CA患者的IL-2和IL-12的水平都明显低于正常对照组,而IL-4和IL- 10水平都明显高于正常对照组,具有显著的统计学差异(P

表1

尖锐湿疣患者疣体组织内的IL-2、IL-4、IL-10和IL-12的检测结果(x±s,pg/ml)

组别例数IL-2IL-4IL-10IL-12

CA复发组161.93±0.483.62±0.914.89±1.231.16±0.34

CA未复发组443.79±1.011.99±0.543.21±0.883.14±0.81

正常对照组146.68±1.790.62±0.161.14±0.314.97±1.25

3 讨论

近年来的研究发现尖锐湿疣的发生、消退、复发及癌变与患者的免疫功能有关,尤其与细胞免疫功能下降有密切关系[2]。Th1淋巴细胞分泌细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-α等, 主要介导细胞免疫;而Th2淋巴细胞分泌细胞因子IL-4、IL-5、IL-6和IL-10等,主要介导体液免疫。IL-2 属于Th1型细胞因子,可增强Th细胞的活性,刺激NK细胞生长,还可诱导NK细胞和淋巴因子激活的杀伤细胞的分化和效应功能,具有广泛的抗病毒活性。IL-12也属于Th1型细胞因子,可促进 T细胞和NK细胞增殖,增强T细胞和NK细胞活性并诱导γ干扰素产生, 而对IL-4的产生起抑制作用。IL-12诱导免疫反应朝Th1 型方向发展, 并刺激Th1细胞的发育和增殖,从而在细胞免疫中发挥重要作用。IL-4 属于Th2型细胞因子,可刺激活化B细胞和T细胞增殖,在调节体液免疫中起重要作用;另外其可抑制Th1细胞活化及分泌细胞因子。IL-10 也是由Th2细胞分泌,可促进体液免疫,抑制细胞免疫,能抑制Th1细胞产生IL-2和IFN-γ而达到调节作用[3]。目前对CA患者全身性免疫功能的研究较多,国内外对CA 患者血液中的Th1和Th2 淋巴细胞的研究发现在免疫应答过程中Th1 型细胞因子水平降低,而Th2 型细胞因子水平升高,存在Thl和Th2 分泌细胞因子交互作用失衡的现象[4],表明CA患者的全身性细胞免疫功能下降。

尖锐湿疣是好发于生殖器及附近皮肤黏膜处的HPV病毒感染性疾病,其复发也主要局限于原发损害附近的皮肤黏膜。除患者全身免疫功能外, CA患者疣体皮损处的局部免疫状态对其病程及预后也起着重要影响。王岚等[5]证实CA 局部淋巴细胞不仅比例失调,而且淋巴细胞和单核细胞功能受抑制或降低,不能有效地杀伤靶细胞,从而使HPV病毒得以生长繁殖。为了进一步探讨CA的发病机制,我们对CA患者局部疣体组织内的IL-2、IL-4、IL-10和IL-12水平进行了检测,结果发现CA患者的Th1型细胞因子IL-2和IL-12的水平都明显低于正常对照组,而Th2型细胞因子IL-4和IL-10 水平都明显高于正常对照组,表明CA患者皮损局部的细胞免疫功能下降,这可能是导致 CA发生及复发的重要原因。研究还发现 CA复发组的IL-2和IL-12的水平低于未复发组, 而IL-4和IL-10的水平高于未复发组。与未复发组相比,CA复发组表现为Th1型免疫反应更弱,而Th2型免疫反应更强,提示CA患者局部皮损组织内的IL-2和IL-12的水平增加可能减少CA的复发。总之,CA 患者Th1 型细胞因子水平降低,而Th2 型细胞因子水平升高,说明CA 患者存在Th1与Th2 型细胞因子平衡失调而向Th2方向漂移,并由此导致一系列的细胞免疫功能的抑制,对病毒清除及抵抗力下降,使HPV病毒发生免疫逃逸,这可能与尖锐湿疣的发病机制有关[6]。

参 考 文 献

[1] Kobayashi A, Miaslowski C, Wallhagen M, et al.Recent development in understanding the immune response to human papillomavirus infection and cervical neoplasia. Oncol Nurs Forum, 2000, 27:643-651.

[2] Ahmed AM, Madkan V, Tyring SK. Human papillomaviruses and genital disease. Dermatol Clin, 2006, 24:157-165.

[3] Romagnani S. Regulation of the T cell response. Clin Exp Allergy, 2006, 36:1357-1366.

[4] 朱宁,程浩. Th1/Th2 与尖锐湿疣关系的研究进展. 浙江医学,2007,10:1137-1140.

[5] 王岚,陈映玲,周礼义. 尖锐湿疣患者肿瘤坏死因子α、白介素6和白介素8水平的研究. 中华皮肤科杂志,1998,4:239-240.

[6] 李莉,周再高,曾抗,等.尖锐湿疣患者外周血Th1/Th2淋巴细胞比的改变.第一军医大学学报,2003,23:737-739.