大石山区天等县子宫颈癌筛查结果

摘要：目的 分析大石山区天等县2013年超早期子宫颈癌筛查结果，探讨宫颈脱落细胞DNA定量分析在宫颈癌筛查中的临床价值。方法 对天等县3766例妇女进行筛查，同时行宫颈脱落细胞DNA定量分析及液基薄层细胞学（TCT）两种方法筛查宫颈病变，将其筛查结果进行比较分析。结果 液基薄层细胞学（TCT）检查出阳性病例共45例，通过阴道镜活检，查出阳性病例共15例；DNA倍体分析技术查出130例，病理组织学诊断结果：慢性宫颈炎52例，CINⅠ24例，CINⅡ9例，CINⅢ 3例，两组比较具备统计学差异P

关键词：天等县；DNA定量分析技术；宫颈癌；检查

现如今宫颈癌的发病趋势正越来越倾向于年轻化，对宫颈癌的防治便提出了更高的要求和标准。在临床中使用有效的检查方法，能够提升宫颈癌和癌前病变的检出率[1]。

1资料与方法

1.1一般资料 选取2013年8月～10月，自愿接受筛查的天等县妇女共3766人次，年龄为20～65岁，同时行宫颈脱落细胞DNA定量分析技术及液基薄层细胞学制片技术（TCT）两种方法。

1.2方法

1.2.1实验室设备 厦门麦克奥迪细胞DNA定量分析系统、离心机、点触式混匀器、生化培养箱、净水器、抽风机、标本瓶、宫颈刷、磁力加热搅拌器、Feulgen染色剂、染色缸等。

1.2.2样本采集 由妇科医生将宫颈刷的刷头插入宫颈口，朝一个方向旋转3～5圈，力度要适中，避免用力过度导致出血。将刷头拔下，浸没在装有固定液的标本瓶里，拧紧瓶盖，确保液体无渗漏，标本瓶注明标识，立即送检，如不能及时送检，应在4冰箱保存。制片前的标本常温保存不超过2w，4℃保存不超过1个月。

1.2.3制片方法 将标本瓶在点触式混匀器上振荡3～5s，缓缓向尖底离心管中倒入6ml左右的标本溶液，离心管经平衡后放入离心机以1500转/min离心5min，逐个将离心管中的上清液倒出，并在滤纸上尽量吸尽管内的残余液体，针对每个标本，观察其离心管中细胞沉淀的大小不同，确定所需的稀释体积，向相应的离心管加入定量的蒸馏水，原则上稀释体积为细胞沉淀体积的2.5～3倍。将离心管放在点触式混匀器上振荡3～5s，用吸管吸取适量细胞悬液，向用于DNA制片的圆底试管（加有细胞分散液100μL）中加入2滴细胞悬液，向用于TBS制片的圆底试管（加有细胞分散液100μL）中加入1滴细胞悬液。同时将2个圆底试管于混匀器上再次振荡混匀3～5s，用吸管从用于DNA制片的试管中吸取适量的细胞悬液，于相应预先用粘片剂处理的载玻片正上方约3～5cm处，垂直滴2滴细胞悬液至载玻片中心，完成DNA制片。然后吹出吸管内的残余液体，从用于TBS制片的试管中吸取适量的细胞悬液，按同样的方式完成TBS制片。

1.2.4分级方法 TBS分类标准：①未见恶性细胞和上皮内病变，②未明确意义的不典型鳞状上皮细胞，③不典型鳞状上皮细胞，④低度鳞状上皮内病变，⑤高度鳞状上皮内病变，⑥鳞状细胞癌。

在生理状态下，人体绝大多数的细胞处于静止期，DNA含量相当恒定。当致癌因素作用于细胞早期，细胞核内DNA结构和含量发生改变，最终发展为细胞形态异常和恶性增殖。因此，细胞DNA定量分析系统可通过测量细胞核内DNA含量的变化，在形态改变不明显前即可检测出那些病变细胞，实现癌及癌前病变的早期诊断。正常细胞DNA指数值（DI）多为1，DNA指数值大于2.5为异常细胞。凡是有DNA指数ID>2.5的细胞，都要在显微镜下逐一进行核实，以排除系统误将垃圾及细胞核重叠认为癌细胞或异常细胞[2]。DNA报告情况：①未见DNA倍体异常细胞，②可见少量细胞增生（5%～10%增生），③可见1～2个DNA倍体异常细胞（1～2个DI≥2.5），④可见细胞异常增生（≥10%增生），⑤可见3个及3个以上DNA倍体异常细胞（3个及3个以上个DI≥2.5），⑥可见异倍体细胞峰。其中，结果1代表检测阴性，建议定期进行正常筛查（2～3年）。②、③代表可疑或少量病变，建议4～6个月进行复查，以便明确原因；④、⑤、⑥代表检测阳性，建议进行阴道镜检查及活体组织检查；⑦标本不满意（上皮细胞数不足1000个），1个月后复查（重新取材）。

1.2.5病理组织学分型 TBS异常和DNA定量检测阳性病例均进一步按病理学要求进行活检采样，送麦克奥迪公司进一步做病理学检查。宫颈活体组织学分为：①炎症或正常；②CIN病变由轻至重分别为：CINI，CINII，CINIII；③宫颈癌。在所有分型中均为阳①②性。

1.2.6两种方法筛查的阳性率对比 常规细胞学（TBS制片）共检查出45例阳性病例， DNA定量分析技术共检查出130例阳性病例。45例常规细胞学（TBS制片）阳性病例全在DN130例阳性颊骨之列。所有阳性病例全部由妇科医生行宫颈活组织采样送往麦克奥迪公司细胞室进行病理组织学检查。

2结果

2.1两种不同方法宫颈癌阳性率比较，见表1。

2.2对筛查结果为阳性妇女行阴道镜下活检结果进行比较 DNA倍体分析技术检查出CINⅠ24例，CINⅡ 9例，CINⅢ 3例，宫颈炎52例；常规细胞学筛查出CINI 8例，CINII 3例，CINⅢ 4例，宫颈炎24例。DNA定量分析技术活检的阳性率明显高于传统的宫颈细胞学检查，P

3讨论

病理组织学检查是子宫颈癌诊断金标准，常规细胞学技术（TCT）和DNA倍体分析技术是子宫颈癌筛查办法，以上二表可以看出，DNA定量分析技术阳性检出率是3.45%，明显高于常规细胞学技术（TCT）阳性检出率1.19%，而常规细胞学技术（TCT）与病理组织学检查的符合率33.33%明显高于DNA定量分析技术27.69%。

癌细胞在癌变过程中DNA含量改变在前，形态改变在后，细胞DNA定量分析系统可通过测量细胞核内DNA含量的变化，在形态改变不明显前即可检测出那些病变细胞，实现癌及癌前病变的早期诊断，对于那些由慢性宫颈炎或不明原因的（无症状）引起的DNA含量改变的筛查人群366例及早采取有效的临床干预措施，进一步检查治疗，把病变阻断在癌前或早期[3]，具有极其重要的临床意义。

子宫颈液基细胞学（TCT）价格较低，应用较广，细胞DNA倍体定量分析技术的取材方法和制片与液基细胞学（TCT）一样，但染色和阅片不同。TCT是巴氏染色，人工阅片；DNA定量分析是Feulgen染色，自动阅片。其克服了TCT检测技术人员诊断水平、视觉疲劳、诊断工具的差异。超早期检查，可以提前3～5年发现早期宫颈癌。通过DNA定量分析系统对细胞核DNA含量与倍体状况进行测定和分析，较常规细胞学方法在宫颈癌的早期发现及诊断方面更有优势，可弥补基层单位因细胞学诊断技术有限的缺陷，适合在宫颈癌的早期发现和识别。

本次筛查结果表明：DNA定量分析检测方法筛查子宫颈癌虽然价格较高，检测步骤复杂繁琐，染色时间长，各种染色试剂及用水要求严格，所用仪器设备较多，但检出率明显高于价格比较低廉的常规液基细胞学涂片-巴氏分级方法，DNA定量分析更适用于基层单位进行大规模子宫颈癌普查，更有效预防子宫颈癌。

参考文献：

[1]伍军平，罗新，吴小花.宫颈癌筛查8463例结果分析[J].中华妇幼临床医学杂志（电子版）2013，03：197.

[2]何新梅.农村妇女宫颈癌筛查结果分析[J].浙江预防医学，2012，01：263.

[3]蔡静芬，杨幼易.宫颈癌筛查753310例结果分析[J].中国医药导报，2012，13：134.