银杏洋参合剂对老龄小鼠体内自由基代谢的影响

[摘要] 目的:观察银杏洋参合剂对小鼠体内自由基代谢的影响。方法:以老龄小鼠为模型分高、中、低剂量组,分别连续灌胃给予不同剂量银杏洋参合剂30 d后测定小鼠血清、肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)水平。结果:银杏洋参合剂能有效提高老龄小鼠心脏、肝脏中SOD活性(剂量为80 mg•kg-1时分别提高了27.49%、14.44%)及血清、肝脏中GSH-Px、CAT活性(剂量为80 mg•kg-1时,血清中的活性分别提高了35.61%、28.18%;肝脏中的活性分别提高了29.79%、18.71%),降低血清、肝脏中的MDA水平(剂量为80 mg•kg-1时分别减少了29.79%、18.71%)。结论:银杏洋参合剂能改善小鼠体内的自由基代谢,增强细胞免疫,可能有助于其抗衰老作用的发挥。

[关键词] 银杏洋参合剂; 自由基代谢; 小鼠

[中图分类号] R-33; R339.38; R967[文献标识码] A[文章编号] 1671-7562(2010)01-0047-03

doi:10.3969/j.issn.1671-7562.2010.01.013

Effect of Ginkgo- American ginseng mixture on the

free-radical metabolism in aging mice in vivo

LI Cai-hong1,2, WU Ke-feng2, ZHOU Ke-yuan1

(1. Department of Biochemistry and Molecular Biology, Guangdong Medical College, Zhanjiang 524023 China; 2. Key

Laboratory for Research and Development of Natural Drugs, Guangdong Medical College, Zhanjiang 524023, China)

[Abstract] Objective: To observe the effect of Ginkgo- American ginseng mixture on the free-radical metabolism in mice. Methods: The models of natural aging mice were used and dividied into three high-, meta-, and low- dose groups. After administrated intragastrically with Ginkgo-American ginseng mixture for 30 days, the activities of glutathion peroxidase(GSH-Px), super oxide dismutase(SOD), catalasein(CAT) and the levels of malondialdehyde(MDA) in serum and liver were detected. Results: Ginkgo- American ginseng mixture efficiently increased the activity of SOD in liver and heart(dose of 80 mg•kg-1, increased 27.49%, 14.44%respectively), GSH-Px,CAT in serum and liver(dose of 80 mg•kg-1, increased 35.61% and 28.18% in serum, increased 29.79% and 18.71% in liver respectively), and the levels of MDA in serum and liver(dose of 80 mg•kg-1, decreased 29.79%, 18.71% respectively) decreased in aging mice. Conclusion: Ginkgo- American ginseng mixture possesses the anti-senility effect by improving free radical metabolism and enhancing immune function in mice.

[Key words] Ginkgo-American ginseng mixture; free radical metabolism; mice

银杏洋参合剂是由我校处方以银杏叶及西洋参提取物为主成分制成。本研究拟主要通过观察银杏洋参合剂抗氧化保护及抗自由基能力,分析其可能的作用机制,为临床应用提供实验

依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 自然衰老小鼠,昆明种,14月龄,雌性,体质量(47.5±5.0)g,由湖北省医学科学院实验动物中心提供。

1.1.2 药物与试剂 银杏洋参合剂(批号070926)、天保宁片(批号070914)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA,检测试剂盒为南京建成生物工程研究所产品,批号20071217)、BCA试剂盒(北京普利莱公司)。

1.1.3 主要仪器 752型紫外可见分光光度仪。

1.2 方法

14月老龄雌性小鼠随机分为对照组、银杏洋参合剂组(分设3个剂量组,即20、40、80 mg•kg-1组)、天保宁片组,每组10只。银杏洋参合剂3个剂量组分别以20、40、80 mg•kg-1的银杏洋参合剂灌胃给药;天保宁片组以40 mg•kg-1的天保宁片溶解液灌胃;对照组灌胃给予蒸馏水,每日1次,连续给药30 d。各小鼠末次给药2 h后摘眼球取血,分离血清,并取脏器,-20 ℃保存备测。制备组织匀浆,匀浆液以3 000 r•min-1离心10 min,上清液经BCA法定量蛋白后按试剂盒方法测定SOD、GSH-Px、CAT的活性以及MDA的水平。

1.3 统计学处理

数据用±s表示,采用SPSS 13.0统计软件进行多组间单因素方差分析,组间两两比较采用q检验。

2 结果

银杏洋参合剂对老龄小鼠血清中SOD、GSH-Px、CAT活性及MDA水平的影响见表1。银杏洋参合剂给药组大部分都能显著提高衰老小鼠血清的SOD、GSH-Px、CAT活性和降低血清中的MDA水平。天保宁片能显著提高血清中的SOD活性、心脏中的GSH-Px活性,降低血清中的MDA水平。

银杏洋参合剂对老龄小鼠肝脏SOD、GSH-Px、CAT活性及MDA水平的影响见表2。银杏洋参合剂给药组大部分都能显著提高衰老小鼠肝脏的SOD、GSH-Px、CAT活性和降低肝脏中的MDA水平。天保宁片能显著提高肝脏中的SOD、GSH-Px、CAT活性,降低肝脏中的MDA水平。

3 讨论

目前,衰老被认为主要与自由基密切相关。正常情况下,自由基的产生和消除处于平衡状态,机体衰老时清除自由基能力减弱,过剩的自由基引发一系列生物学毒性反应。组织器官的结构和功能逐步紊乱,整个机体呈现出衰老特征[1]。GSH具有重要的生理功能,通过GSH-Px还原体内不断生成的脂质过氧化物和H2O2,以消除它们对酶和膜蛋白上巯基的氧化作用,维持细胞及组织的正常功能及代谢[2]。而GSH-Px和SOD在协同处理自由基的过程中起主要作用,是主要的H2O2清除酶[3],可清除线粒体和胞质中产生的H2O2,从而防止羟自由基的产生。CAT能分解破坏力极强的羟自由基。羟自由基的化学性质非常活泼,是对生物体危害最大的自由基[4],它和自由基清除剂及组织发生反应的能力都很强,只有很高浓度的自由基清除剂才能奏效。MDA是氧自由基攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸引起脂质过氧化作用而形成的脂质过氧化物,其量反映了体内脂质过氧化的程度,间接地反映细胞损伤程度。

天保宁是从银杏叶中提取的含黄酮甙药物制剂[5],现已证明其主要药理学作用是清除自由基的生成,抑制细胞膜脂质过氧化反应,防止血栓形成,对离体及在体局部心肌缺血引起的心功能紊乱具有保护作用。它能降低血液黏度,减少过氧化脂质的产生,提高红细胞SOD活性[6]。银杏洋参合剂是以银杏叶、西洋参为主要原料的合剂,具有益气活血、通络止痛等功效[7]。

本研究银杏洋参合剂分低、中、高剂量组,天保宁只取中剂量组作为阳性对照,分别对14月龄小鼠进行处理,并测定SOD、GSH-Px、CAT、MDA等指标,有助于我们进一步阐明银杏洋参合剂对老龄小鼠体内自由基代谢的影响,根据结果分析表明银杏洋参合剂能有效降低MDA水平,提高SOD、GSH-Px、CAT活性,说明银杏洋参合剂可有效减轻体内的氧化性损伤,改善机体的抗氧化能力。

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