单刀根对小鼠疼痛模型的影响

摘要：目的：用单刀根的生药超细粉末和不同溶媒提取物，经灌胃给予受试品后，考察该药材的镇痛作用。方法：以热刺激甩尾、热板法、扭体法、药物诱导痛经等致小鼠疼痛模型法，同时用耳肿胀法考察该药材的抗炎作用。结果：扭体实验各受试组与空白组相比，P

关键词：单刀根药材；镇痛；痛经模型；抗炎

中图分类号：R965.1文献标识码：A

文章编号：1007-2349（2012）12-0055-03

在临床应用中，传统药物显示出一定的治疗效果。针对镇痛发生的作用及机理，本实验用相应动物模型实验来证实受试品的镇痛作用，从而为挖掘出更多的镇痛类中药，充分发挥丰富的自然资源在临床中的应用，缓解疼痛患者的病痛寻找新资源。单刀根是傣族民间习用的有镇痛作用的草药。为了进一步证实其镇痛的药效，本实验拟通过动物模型来研究其镇痛作用。

1材料和方法

1.1材料热板测痛仪 GJ-8402型 生产厂家：宁海白石电子医药仪器厂；UGO BASLE Tail Flick 37360 Model 37360 UGO BASILE S.R.L 微量移液器 20～200 μL生产厂家：大龙医疗设备（上海）有限公司；单刀根药材生药粉、单刀根药材水提取物、单刀根药材醇提取物，均由云南省中医中药研究院药理室提供；己烯雌酚注射液 规格：1 mL：2 m品批号：100504 050608生产厂家：上海通用药业股份有限公司；缩宫素注射液 规格：1 mL：10单位产品批号：100404 生产厂家：上海禾丰制药有限公司；阿司匹林肠溶片 规格：每片含0.1阿司匹林 产品批号：BJ00981 生产企业：Bayer Healthcare Manufacturing s.r.l；吗啡注射液 规格：1 mL：10 m品批号：950505生产厂家：沈阳第一制药厂。

1.2实验动物昆明种SPF小鼠级提供单位：昆明医学院实验动物中心许可证号：SCXK 2005-0008雌性135只；雄性90只，体重（20±2）g。

1.3受试物DDG药材小提取物，浓度为2 g生药/mL；DDG药材95%乙醇提取物，浓度为2 g生药/mL，均由云南中医中药研究院药理室提供。2实验方法

2.1扭体法[1～3]雄小鼠90只，体重（20± 2）g。随机分为6组，每组15只。空白对照组，等体积灌胃给予生理盐水；单刀根水提液大剂量组，按小鼠10 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；单刀根水提液小剂量组，按小鼠5 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；单刀根醇提液大剂量组，按小鼠10 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；单刀根醇提液小剂量组，按小鼠5 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；阿司匹林组，按小鼠20mL/kg（78mg/kg）的剂量灌胃给药。各受试组连续灌胃5 d，实验所得结果见表1。

2.2耳肿胀法[4]雄小鼠90只，体重（20± 2）g。随机分为6组，每组15只。空白对照组，等体积灌胃给予生理盐水；单刀根水提液大剂量组，按小鼠10 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；单刀根水提液小剂量组，按小鼠5 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；单刀根醇提液大剂量组，按小鼠10 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药。阿司匹林组，按小鼠20mL/kg（78mg/kg）的剂量灌胃给药。各受试组连续灌胃5 d，于最后1次灌胃结束后，在小鼠右耳的前后两面涂布0.05 mL/只二甲苯。1 h后，将小鼠麻醉处死，剪下双耳用8 mm直径打孔器分别在同一部位打下小鼠圆耳片称重，记录数据，数据进行统计分析。实验所得结果见表2。

2.3热板法[1，5]雌小鼠90只，体重（20± 2）g。把小鼠放于温度为（50±5）℃的热板仪上，记录各小鼠从接触热板仪到舔后足的时间。每组小鼠测定2次，测量完毕后，算出两次测量时间平均值作为基础痛阈值。挑选时间为5～30 s内舔足小鼠为合格小鼠。把合格小鼠随机分为6组，每组15只。空白对照组，等体积灌胃给予生理盐水，连续给药10 d；单刀根水提液大剂量组，按小鼠10 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；单刀根水提液小剂量组，按小鼠5 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；单刀根醇提液大剂量组，按小鼠10 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；单刀根醇提液小剂量组，按小鼠5 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；各受试组连续灌胃给药3 d。各灌胃组小鼠，于最后一次灌胃30 min后，置于热板仪上测定舔足时间，时间间隔30 min，共重复4次。吗啡组，按小鼠10 mL/kg（1.95 mg/kg）的剂量给予小鼠皮下注射吗啡即刻置于热板仪上，按间隔30 min，重复测定4次舔足时间。实验所得结果，见表3。

2.4单刀根药物诱导的痛经实验[6～7]雌小鼠105只，体重（20± 2）g。随机分为7组，每组15只。空白对照组，等体积灌胃给予生理盐水，连续灌胃12天；各受试组，按小鼠2 mg/kg（0.4 mg/mL，5 mL/kg）的剂量给小鼠肌肉注射乙烯雌酚，连续注射12 d；模型组只给乙烯雌酚，不给予受试药。在注射乙烯雌酚第8 d起，单刀根水提液大剂量组，按小鼠10 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；单刀根水提液小剂量组，按小鼠5 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；单刀根醇提液大剂量组，按小鼠10 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；单刀根醇提液小剂量组，按小鼠5 mL/kg的剂量（每mL含生药量2 g）灌胃给药；各受试组连续灌胃给药5 d。吗啡组，在注射乙烯雌酚第12 d，按小鼠10 mL/kg（1.95 mg/kg）的剂量给予小鼠注射吗啡。所有实验组，于第12天给药结束30 min后，按小鼠20 u/kg（2u/mL，10 mL/kg）的剂量，给小鼠腹腔注射缩宫素。并观察小鼠在注射完催产素30 min内的扭体次数，并记录数据，数据进行统计分析。实验所得结果，见表4。

2.5统计学方法所有数据均进行统计分析，均采用t检验。

3实验结果

4讨论

本研究可选方法均为传统、经典镇痛实验方法，成熟、可靠，能不同程度反映受试品的镇痛作用。痛经模型能较好地表现动物疼痛状态，模型组均显100%的疼痛反应。单刀根生药受试品不同程度反映出镇痛作用。单刀根不同溶媒提取物在痛经实验中，结果均与阳性药物数据反映一致，均呈现有镇痛作用。并显一定的量效、时效相关性。对单刀根的镇痛机理和有效部位，还需进一步研究证实，为开发本品做好基础。

参考文献：

[1]徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].第三版.北京：人民卫生出版社，2002，882～888.

[2]杨敏，蒋强富，许韧，等.虎杖水煎液的镇痛作用研究[J].南通医学院学报，2009，29（1）.

[3]黄玉兰，顾海铮.妇乐止痛露治疗痛经的药效学[J].中国医院药学杂志，2002，22（12）.

[4]王团结，宿树兰，欧阳臻，等.没药不同提取物对小鼠痛经模型的影响[J].中药新药与临床药理，2009，20（3）.

[5]洪建华，张本全，梁建萍.芍药甘草汤镇痛作用的实验研究[J].实用中西医结合临床，2008，8（5）.

[6]吴正平.金花葵花总黄酮镇痛作用的实验研究[J].宜春学院学报，2009，31（4）.

[7]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，1993，356.

（收稿日期：2012-10-15）