β地中海贫血基因携带者及G6PD缺乏的产前筛查与血液学指标评价

【摘要】目的：调查本地区围生期妇女β地中海贫血（地贫）基因携带率和G6PD缺乏的发病率；以及评价血液学指标在β地贫及G6PD酶缺乏筛查中的意义。方法：对产前检查的孕妇，进行了β地贫基因诊断及G6PD定量分析，血常规红细胞参数检测及血红蛋白电泳HbA2定量。对已明确诊断的85例β地贫组，76例IDA组及75例G6PD酶缺乏组，进行红细胞参数(RBC、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、RET)结果的比较；并将各方法检测结果与地中海贫血基因诊断结果比较，分析各筛查方法的敏感性和特异性。结果：

2 450例孕妇共检出β地贫阳性85例，β地贫基因携带率为3.5%；共检出G6PD缺乏75例，G6PD缺乏的发病率为3.1%。地贫组、IDA组及G6PD缺乏组RET均增高，与正常对照组比较，差异均有显著性(P

【关键词】β地中海贫血；葡萄糖6-磷酸脱氢酶；平均红细胞体积；铁蛋白

文章编号：1009-5519（2007）23-3488-03 中图分类号：R446 文献标识码：A

Prenatal screen of gene carrier of beta-thalassemia and G6PD deficiency and evaluation of hematological indices

YANG Xiu-tang,HE Jian-feng1,LI Ya-hong2

(1.Depratment of Clinical Laboratories，Luocuu Hospital of Nahai District in Foshan，Guangdong 528226，China；2.Department of Clinical Laboratories，The First People's Hospital of Shunde Affiliated to Nanfang Medical university，Guangdong 528300，China)

【Abstract】Objective:To investigate the gene carrying rate of beta-thalassemia and the morbility rate of G6PD deficiency in the Perinatal pregnant women in Luocun and avaluate the feasibility of hematological indices in the prenatal screen of beta-thalassemia and G6PD deficiency.Methods:The hematological routine test,beta-thalassemia gene diagnosis,G6PD enzyme quantitative analysis and hemoglobin electrophoresis for the leve of HbAz were done i all prenatal preganat women.The values of RBC,Hb,HCT,MCV,MCH,MCHC,RDW,RET and the HbAz level were used for the comparative study among beta-thalassemia group (n=85),iron deficiency anemia (IDA)group (n=76) and G6PD deficiency group (n\75).And the results were compared with those of gene diagnosis of beta-thalassemia in order to evaluate the sensitivity and specificity of hematological indices.Results:Of 2450 pregnant women,85 were found to carry beta-thalassemia gene,the gene carrying rate of beta-thalassemia was 3.5%;75 were found to suffer from G6PD deficency,the morbility rate of G6PD deficiency was 3.1%.Compared with normal group,RET in all groups (beta-thalassemia group,iron deficiency anemia group and G6PD deficiency group)was sigificantly incaeased (P＜0.01)，and RET in G6PD deficiency group was significantly higher than that in IDA group and beta-thalassemia group (P＜0.01).MCY in IDA group and beta-thalassemia group was significantly decreased xompared with that in the normal group,but RDW was significantly increased (P＜0.01).The MCV in beta-thalassemia group was significantly lower than that in IDA group (P＜0.01).In addition,the sensitivity and specificity of MCV in the diagnosis of beta-thalassemia were 97.6% and 54.5% respectively compared with the results of gene detection,while the senrsitivity and specificity of the HbH2 level were 96.8% and 97.4% respectively.Conclusion:The CD41-42(-CTTT)was the most common type of mutations in beta-thalassemia gene for prenatal pregnant women in Luocun.The test of MCV was very simple and effective in the prenatal screen of gene carrier of beta-thalassemia,and the HbA2 level was reliable to survey the prenatla pregnant women for beta-thalassemia.

【Key words】Beta-thalassemia;G6PD enzyme;Meancorpuscular volume;Ferritin

β地中海贫血(地贫)和G6PD缺乏症是广东省常见的单基因遗传性溶血性疾病，多由患病亲代传来，其基因携带者虽仅有轻度贫血或者无症状，却能将致病基因传递给后代，使子女呈显性疾病。重型β地贫患儿，一般在出生后3～6个月出现症状，目前此病在国内外尚无有效的治疗方法，仅能依靠输血维持生命，由于极易发生各种并发症，患者多于青少年期死亡，给社会和家庭带来沉重的负担。预防是最为积极有效的应对措施，通过产前筛查与基因诊断，可达到防止重型地贫儿出生，降低地贫发生率的目的。G6PD缺乏症的危害也极大，因G6PD缺乏可导致新生儿核黄疸死亡或智力低下，对提高人口素质极为不利。为获得本地区β地贫基因突变类型及其频率分布情况的流行病学资料，以及了解G6PD缺乏的发病率，做好遗传咨询和产前诊断，我们对围生期孕妇进行了β地贫基因携带者及G6PD缺乏的系统筛查；并比较了各种实验室指标在产前地贫基因携带者筛查中的应用，以进一步评价血液学指标在产前β地贫基因携带者筛查中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料：β地中海贫血组85例，系在本院产科门诊作产前检查的孕妇，经基因检测确诊，年龄在20～45岁，均未接受输血治疗。缺铁性贫血组76例，系在本院妇产科或血液内科住院，年龄在15～45岁的育龄期妇女，以骨髓铁染色阴性作为诊断缺铁标准，均未接受输血及铁剂治疗；健康对照组100例，系在本院门诊作健康体检，年龄在15～45岁的育龄期妇女。

1.2 方法

1.2.1 红细胞参数检测：SysmexXE-2100五分类血细胞分析仪及配套试剂。

1.2.2 Hb电泳HbA2定量：法国Sebia 全自动电泳分析系统及配套试剂。

1.2.3 地中海贫血的基因诊断：PCR扩增仪为美国PERKIN-ELMER公司的7700型定量PCR仪。提取外周血白细胞DNA后，作β珠蛋白基因分析，采用中山医科大学达安公司试剂，先行PCR扩增，再结合反向点杂交法（PCR-RDB）。该试剂盒能同时检出17个位点18种不同的β珠蛋白基因突变类型。

1.2.4 G6PD酶定量：荧光斑点法检测，PerKinElmer仪器及配套试剂，正常参考值

1.2.5 骨髓铁染色：按照《临床检验操作规程》第二版操作并记录结果。

1.3 统计学方法：采用统计软件SPSS11.5进行方差分析。

2 结果

2.1 β地贫基因携带率：2450例孕妇共检出β地贫阳性85例，β地贫基因携带率为3.5%，85例均为轻型β地贫基因携带者。β复合α地贫2例，检出率为2.4%。

2.2 β地贫基因突变类型及其基因频率：在85例β地贫阳性样品中，共检出10种基因突变类型。结果见表1。

2.3 2 450例孕妇共检出G6PD缺乏75例，孕妇G6PD缺乏的发病率为3.1%。

2.4 红细胞参数比较：红细胞八项参数包括红细胞计数(RBC)、血红蛋白含量(Hb)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度(RDW)及网织红细胞(RET)中，IDA组的RBC、Hb、HCT、MCV、MCH和MCHC均降低，而RDW和RET均增高，与正常对照组比较，差异均有显著性(P均

2.5 HbA2测定结果比较：β地贫组HbA2值增高，与正常对照组比较，差异有显著性(P

2.6 G6PD测定结果比较：G6PD缺乏组G6PD显著减低，与正常对照组比较，差异有显著性(P

2.7 85例β地贫MCV正常2例，MCV分别为86.8，96.8，MCV减低83例，MCV降低诊断β地贫的敏感性可达97.6%。76例IDA中MCV正常或增高(MCV>98 fl)6例，MCV分别为 82.5，83.7，84.8，

86.6，86.9，100，MCV减低70例，MCV降低诊断IDA的敏感性为92.1%。

2.8 76例IDA患者RDW正常(RDW10.9～15.4%)13例，占17.1% ，RDW升高(RDW>15.4%)63例，RDW升高诊断IDA的敏感性为82.9%。85例β地贫RDW正常43例，RDW正常诊断β地贫的敏感性为50.6%，RDW升高42例，占49.4%。

2.9 31例β地贫的30例HbA2轻度增高(HbA24.5%～7.4%)，HbA2增高诊断β地贫的敏感性可达96.8%。38例正常对照HbA2增高1例，HbA2增高诊断β地贫的特异性可达97.4%。

2.10 85例β地贫中，合并G6PD缺乏1例，占β地贫总人数的1.2%。

3 讨论

β地贫是世界上最常见和发病率最高的一种单基因遗传性溶血性疾病，据世界卫生组织报告，世界上约有1亿以上的人口携带β地贫的突变基因[1]，因而β地贫病的研究一直受到国内外的广泛关注。广东地区是地贫的高发区，据有关资料[2]显示，广东省β地贫发病率为1.85%～3.36%。虽然已有大规模调查得出广东省β地贫的流行病学资料，但由于其分子病理具有高度异质性和存在明显的地域、民族差异[3]，仍有必要了解本地区的确切发病率和基因突变类型。根据本调查结果，我们获得本地区围生期妇女β地贫基因携带率为3.5%，与深圳的调查结果一致[2]。

目前对人类珠蛋白基因缺陷的分子机理已有相当的认识，绝大多数β地贫是由于β珠蛋白基因发生点突变所致[4]，迄今为止，世界范围已发现有170多种引起β地贫的基因突变，中国人中已发现有20多种，其中CD 41～42(-CTTT)移码突变是中国人种携带频率最高的突变类型[5]。本组共检出10种β地贫的基因突变类型，同广东省其它地区报道的类似[6]，CD41～42(-CTTT)仍是本地区围生期妇女最常见的β地贫基因突变类型，与广东、广西、四川、福建、台湾的统计结果相似[7]，与地中海沿岸一些国家的携带类型显著不同[8]，再次表明地中海贫血的分布有很大的地域性。过去由于检查手段的限制，对β复合α地贫无法诊断，随着分子生物学技术的运用，发现这两种情况同时存在并不少见，本组受检对象中，β复合α地贫仅占2.4%，明显低于广州[9]报道的13%，可能与我们的调查人群不同有关。

葡萄糖6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症是我国华南地区常见的遗传性溶血性疾病，也是广东省出生缺陷干预病种之一。G6PD缺乏症的遗传规律是X连锁不完全显性遗传，杂合子的酶活性表现度范围很大，可以从显著缺乏到接近正常，但这类杂合子能将致病基因传递给后代。本组G6PD缺乏的发病率为3.1%，低于省内报道[10]的5.13%，是否与我们所调查的例数较少及采用的检测方法不同有关，还有待进一步观察。此结果表明，广东地区是G6PD缺乏症的高发区，因而有必要在育龄人群中进行G6PD缺乏的筛查，本地区已将此项检查列为常规孕检项目。

地贫基因携带者的筛查，国际上并无统一的临床实验方法，用于确诊地贫的基因检测，因操作繁琐、费用高、耗时长，使其难以用于临床实验室的筛查工作，不能作为产前筛查的首选。随着血细胞分析仪的普遍使用，扩大了血液学常规检测的范畴，所提供的MCV及RDW等红细胞参数在地贫基因携带者筛查中的价值已日益受到重视[11]。本组资料显示，MCV在地贫组和IDA组均降低，与正常对照组比较，差异均有显著性(P均

在小细胞性贫血中，MCV只能反映红细胞平均体积的大小，而RDW却反映了红细胞体积大小的离散程度。Bessman等研究显示，100%IDA患者的RDW增高，而88%轻型β地中海贫血患者RDW正常，因此RDW可以作为初步鉴别两种贫血的敏感指标[12]。本组资料显示，RDW在IDA组与地贫组均升高，与正常对照组比较，差异均有显著性(P均0.05)，因而，RDW在地贫与IDA的鉴别诊断价值有待进一步研究。

Hb电泳是最常用的实验室诊断地贫的方法。本组β地贫HbA2值增高，与正常对照组比较，差异有显著性(P

网织红细胞参数是评价骨髓造血功能的有效指标，随着自动血细胞分析仪的广泛使用，RET在贫血诊断中更显示出其重要的临床价值[14]。本组G6PD缺乏、β地中海贫血和IDA的RET均增高，与正常对照组比较，差异均有显著性(P均0.05)；而G6PD缺乏组RET显著增高，与β地贫组及IDA组比较，差异有显著性(P均

参考文献：

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收稿日期：2007-03-20修回日期：2007-08-10