抗HLA—I/II抗体、抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体与不孕和流产的关系

【摘要】 目的 探讨抗HLA-I/II抗体、抗心磷脂抗体（ACA）和抗β2糖蛋白1（β2GP1）抗体与不孕和流产的关系。方法 选取2011～2012年在本院就诊的不孕症患者550例、复发性流产患者1650例和正常分娩者150例。对各组分别进行抗HLA-I/II抗体、抗心磷脂抗体和抗β2GP1抗体检测， 并将阳性率进行比较。 结果 不孕组抗HLA-I/II阴性率、ACA和抗β2GP1阳性率分别为76.0%、19.3%和17.5%；RSA组抗HLA-I/II阴性率、ACA和抗β2GP1阳性率分别为85.0%、23.5%和22.7%；均显著高于对照组， P

【关键词】抗HLA-I/II抗体；抗心磷脂抗体；抗β2GP1抗体；不孕症；复发性流产

复发性流产（recurrent spontaneous abortion， RSA）是指妊娠20周前连续自然流产3次及3次以上者， 为常见的妊娠并发症， 发生率约为1～5%。RSA的病因十分复杂， 除了胚胎染色体或流产夫妇染色体异常、解剖异常、内分泌异常、和感染等病因外， 免疫学异常逐渐被认为是导致RSA发生的主要病因[1]。根据流产的发病机制， 目前， 国际上将与免疫有关的RSA分为自身免疫型和同种免疫型两大类。其中， 自身免疫型RSA主要与抗磷脂抗体（antiphosphlipid antibody， APA）、抗β2GP1抗体阳性有关， 而URSA则与母体封闭抗体缺乏有关。不孕症是妇科常见病之一， 原（继）发性不孕也存在免疫学因素[2]。近年来， 抗HLA-I/II抗体、抗心磷脂抗体和抗β2GP1抗体与不孕和复发性流产之间的关系成为研究热点。本文通550例不孕症、1650例RSA患者和150例正常分娩者抗HLA-I/II抗体、抗心磷脂抗体和抗β2GP1抗体检测， 探讨这三种抗体与不孕、RSA的关系。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选择2011-01至2013-03于本院门诊就诊的不孕患者550例、RSA患者1650例， 病例入选标准：①不孕症组：具有正常性生活， 不避孕， 一年以上不孕者作为不孕症组；②RSA组：妊娠早期自然流产3次或3次以上， 同时无死胎、死产及活产史， 妇检及其他检查均排除染色体、解剖、内分泌、感染等因素者作为RSA组。患者年龄在20～45岁， 平均为（25.6±3.6）岁， 流产时孕周6～16周， 平均孕周（8.7±2.3）周；另选择同期正常分娩者150例作为正常对照组。两组之间平均年龄及平均孕周无差异。抽取外周血3 ml， 离心， -20℃保存。

1. 2 实验方法 ACA和抗β2GP1试剂盒采用德国Orgentec公司的原装试剂盒， 用ELISA 分析仪在波长450 nm处读取吸光度值（ OD）， 定性检测ACA及抗β2-GP1抗体， 阴性对照的OD值应

1. 3 统计学方法 应用SPSS 13. 0统计软件对实验数据进行统计处理， 计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 以P

2 结果

不孕组抗HLA-I/II阴性率、ACA和抗β2GP1阳性率分别为76.0%、19.3%和17.5%；RSA组抗HLA-I/II阴性率、ACA和抗β2GP1阳性率分别为85.0%、23.5%和22.7%；对照组抗HLA-I/II阴性率、ACA和抗β2GP1阳性率分别为20%、3.3%和2.7%；不孕组、RSA组与对照组比较， P

3 讨论

如果将妊娠这一复杂的生理过程看作是器官移植， 将带有父系异体抗原成分的胚胎看成是母体的移植物， 那么母体与作为移植物的胚胎细胞在母胎界面上相互识别， 母体在识别胚胎抗原的同时， 产生封闭抗体。母体中的细胞毒淋巴细胞与产生的封闭抗体结合后， 细胞的毒作用被封闭， 防止对胎儿的杀伤；同时胚胎细胞上的抗原与封闭抗体相结合， 对母体的淋巴细胞与胚胎细胞之间的通路进行阻断。目前的研究结果在孕妇首次妊娠时会出现封闭抗体， 在分娩后3～6周上升， 以后将持续存在[3]。 封闭抗体在妊娠中起到对母体淋巴细胞识别父系抗原的抑制作用以及保护胎儿等作用， 是保证孕妇顺利分娩的重要抗体。如果在妊娠过程中母体由于某种因素， 封闭抗体缺乏， 将会导致母体对作为移植物的胚胎排斥， 进而造成复发性流产[4]。由于封闭抗体是一组复杂的抗体组合， 现在人们还不清楚其具体组成， 人们通常将抗HLA-I/II抗体作为封闭抗体的代表。本研究中， 我们发现不孕症和RSA两组的抗HLA-I/II抗体阴性率显著高于对照组， 说明封闭抗体缺乏是导致不孕和复发性流产的一个重要因素。

ACA 是一组自身免疫性抗体， 本研究主要探讨ACA与不孕、RSA的相关性。正常情况下， 带有负电荷的心磷脂（心肌、子宫居多） 位于细胞膜脂质双层的内层， 不被免疫系统识别， 一旦暴露， 心磷脂抗原刺激机体产生一种自身免疫性抗体即ACA， 它是强烈的凝血活性物质， 可直接造成血管内皮细胞损伤。ACA 可能通过以下途径导致流产发生[5， 6]：作用于血管内皮细胞膜上的磷脂， 抑制花生四烯酸的释放， 进一步影响前列腺素的产生；促进血管收缩以及血小板聚集；与血小板磷脂结合， 诱导血小板激活、聚集， 导致血管内血栓形成；通过干扰血栓调节素， 抑制纤溶酶原的活化。因此， ACA 能使母体血液高凝， 在胎盘微小血管处形成血栓或梗死， 引起母-胎间血液循环障碍， 胎盘与母体间的物质交换减少和屏障功能下降， 造成胎儿营养供给不足而流产和死亡。然而并非所有 RSA 者都有胎盘或绒毛血管内的血栓形成， 进一步的研究发现， ACA 破坏或阻碍滋养层细胞正常功能， 导致滋养层蜕膜浅植入， 因此认为胎盘形成不良可能是引起 RSA的发病机制之一[7]。本研究中， 我们发现不孕症和RSA两组的ACA阳性率明显高于对照组， 表明ACA是导致不孕和RSA的重要因素之一。

β2GP1（又称载脂蛋白H）是由肝细胞合成， 是血浆中含量较丰富的一种单链糖蛋白。在血浆中与脂蛋白结合， 其第1、2、5功能区有大量带正电荷的氨基酸序列， 与带阴离子磷脂的物质结合后， β2GP1将其隐藏的抗原表位显露， 导致了抗β2GP1抗体产生[8]。体外实验证明， 它能抑制内源性的凝集通路及抑制血小板上的凝血酶原酶的活性。近年来研究表明， 抗β2GP1抗体与妊娠疾病有一定联系， 是导致抗磷脂综合征的主要抗体。抗β2GP1抗体阳性人群发生相关临床症状的比率高于ACA 阳性人群， 因此， 直接测抗β2GP1抗体可能更具特异性。本研究中， 我们发现不孕症和RSA两组的抗β2GP1抗体阳性率明显高于对照组， 表明抗β2GP1抗体是导致不孕和RSA的重要因素之一。ACA阳性的检出率较抗β2GP1抗体的检出率高， 这一方面是因为能与磷脂结合产生ACA的磷脂结合蛋白不限于β2GP1。联合ACA和抗β2GP1抗体检测可增加抗磷脂综合征在不孕和RSA检测的准确性， 比单独检测ACA准确性提高许多， 大大减少抗磷脂综合征的漏诊率和误诊率。本研究表明抗HLA-I/II抗体、ACA和抗β2GP1抗体与不孕和RSA有直接关系， 因此， 在临床工作中遇到不孕症和RSA患者时有必要进行抗HLA-I/II抗体、ACA和抗β2GP1抗体检测， 以便及时诊断并对症治疗。

参考文献

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