超临界提取苦橙精油的成分分析

摘要：采用超临界流体萃取得到苦橙（Citrus bigarradia V.）精油，利用GC-MS分析挥发性香味成分，并进行感官质量评价。结果表明，超临界苦橙精油得率为3.56%，苦橙精油中检测出58种挥发性成分，括萜烯类18种、醇类11种、醛类10种、酮类9种、酯类9种，相对含量较高为柠檬烯（90.01%）、月桂烯（3.11%）和α-蒎烯（1.05%）等成分，苦橙精油具有香甜的花香味和橘子、柠檬的果香，清甜而鲜。

关键词：苦橙（Citrus bigarradia V.）；超临界萃取；气质联用；香味

中图分类号：O65 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）12-3182-03

DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2016.12.046

Abstract：The volatile oil of Citrus bigarradia V. was by supercritical fluid， then the volatile flavor compounds of oil were analyzed by capillary gas chromatography-mass spectrometry（GC-MS） and added to cigarettes as flavors. The results showed that average yield of the volatile oil was 3.56%，58 constituents were identified in oil， the oil include 18 terpene， 11 alcohols，10 aldehydes， 9 ketones and 9 esters. The volatile oil of Citrus bigarradia V. has fresh and sweet floral，fruits note.

Key words：Citrus bigarradia V.；supercritical extraction；GC-MS；flavor

苦橙（Citrus bigarradia V.）属芸香科常绿小乔木，亦称为酸橙树，原产于中国及日本，引入欧洲后，被广泛种植和利用[1]。最初，人们将其用作于杀菌剂和镇定剂，现在被广泛用于食品、日化、医药等方面。苦橙果皮、叶、花和果实均可被加工利用，苦橙精油已进入美国食品香料和萃取物制造者协会（FEMA）的食用香料名录，同时也被中国食品添加剂使用卫生标准纳入允许食品香料[2]。苦橙精油与同为芸香科香料植物的甜橙相似，但苦橙精油的香气品质、功效作用较甜橙精油都略胜一筹，因此苦橙精油的价格也相对较高，若将少量的苦橙精油添加到甜橙精油中，可得到很好的效果[2]，关于甜橙精油的加工和成分分析报道相对较多[3-8]，而对苦橙精油的挥发性成分则鲜见报道。为进一步开发苦橙精油资源，利用超临界提取苦橙的挥发油，利用气相色谱-质谱联用仪对苦橙精油的挥发性成分进行分离和鉴定，旨在为掌握苦橙精油内在组成成分以及扩大其应用范围提供数据支撑。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

苦橙皮由广西产苦橙去除果肉而得；色谱乙醇，百灵威科技有限公司。

气相色谱-质谱联用仪（Agilent 7890/5977，美国Agilent公司）；超临界萃取装置（HA221-50-02，杭州华黎泵业有限公司）。

1.2 样品制备与处理

将苦橙皮适当破碎，置于超临界萃取釜中，开启CO2钢瓶，通过加压系统加压，当萃取釜压力达到18.5 MPa时关闭CO2钢瓶，萃取温度为35 ℃，萃取时间为45 min，然后解析釜中得到苦橙精油，回收率为3.56%。

称取上述苦橙精油0.100 0 g转移至5 mL容量瓶，用无水乙醇溶解稀释，并定容至刻度，经有机滤膜（0.45 μm）过滤至1.5 mL色谱瓶。

1.3 气相色谱-质谱分析条件

色谱柱HP-5MS（60 m×0.25 mm×0.25 μm）；载气氦气流量1.0 mL/min；进样口温度260 ℃；进样量1 μL；分流比10∶1；升温程序初始为50 ℃，持续 2 min，升温速率为4 ℃/min，升温至280 ℃并保持20 min。质谱的传输线温度为280 ℃；电子倍增器 1 700 V；扫描方式全扫描，溶剂延迟7 min。

1.4 苦橙精油成分定性定量分析

苦橙精油气相色谱-质谱分析后，各分离成分进行NIST/Wiley谱库检索分析，对主要成分先利用保留指数进行定性分析，然后采用色谱峰面积归一化法进行相对定量。

1.5 苦橙精油的感官评价

按照GB/T 14454.2-93的方法组成感官评价小组，在无杂气、异味、空气流通感官评价室内进行，取1.0 g的苦橙精油样品置于洁净、无异味10 mL辩香瓶内，用辨香纸蘸苦橙精油试样，由小组成员进行感官评价，全面评定其香气品质。

2 结果与分析

2.1 苦橙精油挥发性成分分析

超临界萃取苦橙精油的总离子流如图1所示，其成分分析结果见表1。由表1可知，在超临界萃取的苦橙精油中挥发性成分共计有58种，其中包括萜烯类18种、醇类11种、醛类10种、酮类9种、酯类9种。含量最高的是柠檬烯，达到90%以上，相比文献报道的甜橙精油中的柠檬烯较高[3，4]。这也成为鉴别市售的真假苦橙精油的依据之一。苦橙精油中柠檬烯具有新鲜的橘子-柠檬果香，清甜而鲜，香气轻飘，但不持久，是苦橙精油的主成分，也是其特征香气成分。除柠檬烯外，其他含量成分也都发挥着重要的作用，如蒎烯清凉的松木香气；月桂烯通常有愉悦、清淡的果香香韵；芳樟醇有清新的花，弱的柑桔香，可增加加香产品的花香、清香，提调辛香韵味，使其吸味柔和；壬醛、癸醛具有强烈的柑橘和柠檬样的果香香韵；乙酸辛酯的类似橙花与茉莉，微带脂蜡和青气的花果香气等。这些成分香气特征各有不同，但互相配伍协调，构成了苦橙精油独特的香韵，这对苦橙精油香韵有较大贡献，也为苦橙精油的应用提供了数据支撑。

2.2 苦橙精油感官评价

按照“1.5”方法对超临界萃取的苦橙精油感官质量进行评价。结果表明，苦橙精油具有香甜的花香味和橘子、柠檬的果香，清甜而鲜，香气轻飘，花香和果香交替散发，穿透性较强，令人愉悦，留香持久。

3 结论

利用超临界流通萃取苦橙精油，得率为3.56%，经气相色谱质谱对苦橙精油进行分析，鉴定出58种挥发性成分，括萜烯类18种、醇类11种、醛类10种、酮类9种、酯类9种，相对含量较高的有柠檬烯（90.01%）、月桂烯（3.11%）和α-蒎烯（1.05%）等成分，苦橙精油具有香甜的花香味和橘子、柠檬的果香，清甜而鲜，苦橙精油有较好的应用前景。

参考文献：

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