MMP―9、TNF―α、NT―proBNP在川崎病患儿血浆中的变化及临床意义

[摘要] 目的 探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、N末端脑利钠肽（NT-proBNP）在川崎病（KD）患儿中的临床意义。方法 方便选取该院2014年3月―2016年10月住院的KD患儿58例，根据心脏超声心动图检查结果分为冠状动脉损伤（CAL）组26例和无冠状动脉损伤（NCAL）组32例，另选取同期年龄相仿的门诊健康体检儿童25例作为对照组，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）和电化学发光免疫分析法（CLIA）分别测定各组儿童MMP-9、TNF-α和NT-proBNP水平。 结果 KD患儿治疗前血浆MMP-9、TNF-α、NT-proBNP水平与对照组比较，差异有统计学意义（t=20.73、9.34、16.61，P

[关键词] 川崎病；基质金属蛋白酶-9；肿瘤坏死因子-α；N末端脑利钠肽

[中图分类号] R725.4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2017）02（a）-0028-03

[Abstract] Objective To study the clinical significance of MMP-9， TNF-α and NT-proBNP in the plasma of children with Kawasaki disease. Methods Convenient selection 58 cases of KD children in our hospital from March 2014 to October 2016 were selected and divided into the CAL group with 26 cases and NCAL group with 32 cases， and 25 cases of healthy physical examination children at the same period were selected as the control group， and the MMP-9， TNF-α and NT-proBNP levels of children in each group were respectively measured by the ELISA and CLIA. Results The differences in the plasma MMP-9，TNF-α，NT-proBNP levels of KD children before treatment between the two groups had statistical significance（t=20.73，9.34，16.61， P

[Key words] Kawasaki disease； MMP-9； TNF-α； NT-proBNP

川崎病（KD）是胗锥时期常见的以全身血管炎为主要病变的急性发热、出疹、自限性疾病。自1976年日本川崎富作医生首次报道，其发病率呈现出两种不同的趋势，在日本、韩国、台湾等远东地区逐年增高，而在北美洲、澳大利亚、欧洲等则趋于平稳[1]，现已成为我国儿科住院的常见病之一。心血管并发症包括冠状动脉扩张及冠状动脉瘤、心功能减低、二尖瓣反流、体动脉病变等是KD最常见的并发症。其中冠状动脉并发症是KD患儿最严重的并发症，可引起心肌缺血、梗死甚至猝死，预防和诊治是目前儿科医师关注的重点[2]。该研究通过对该院2014年3月―2016年10月诊断明确的58例KD患儿血浆MMP-9、TNF-α、NT-proBNP的检测，探讨其水平变化及在冠状动脉损伤中的作用，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选取该院儿科住院的KD患儿58例，均符合王卫平主编[3]第8版儿科学KD的诊断标准 ，并排除已于院外丙种球蛋白治疗、合并先天性心脏病、免疫性疾病等。其中男34例，女24例；发病年龄8个月～6岁，平均（2.5±0.9）岁。根据心脏超声心动图结果将KD患儿分为CAL组26例和NCAL组32例。另选取同期门诊健康体检儿童25例作为对照组。其中男13例，女12例，年龄6个月～5岁，平均（2.2±0.7）岁。各组年龄、性别差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

KD患儿分别于治疗前及治疗后采集外周静脉血2 mL送该院实验室采用罗氏电化学发光免疫分析仪测定血浆NT-proBNP水平，另采集外周静脉血2 mL，EDTA抗凝，立即离心取血浆保存于-80℃冰箱待统一测定MMP-9、TNF-α水平。KD患儿入院时均行心脏超声心动图检查，确诊后给予大剂量丙种球蛋白及阿司匹林治疗。正常对照组只采血1次，标本处理方法同上。采用ELISA法检测血浆MMP-9、TNF-α的含量。人MMP-9试剂盒购自美国R&D公司，人TNF-α试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司，严格按照试剂说明书的步骤进行操作。

1.3 统计方法

采用SPSS 17.0学统计软件进行数据处理。计量资料用均数±标准差（x±s）表示，两组比较用两独立样本t检验或配对样本t检验，相关分析采用Pearson相关分析，以P

2 结果

2.1 两组血浆MMP-9、TNF-α、NT-proBNP蛋白水平的比较

治疗前病例组血浆MMP-9、TNF-α、NT-proBNP水平均显著高于对照组，差异均有统计学意义（t=20.73、9.34 、16.61，P

2.2 CAL组、NCAL组治疗前血浆MMP-9、TNF-α、NT-proBNP蛋白水平的比较

KD患儿治疗前CAL组血浆MMP-9、TNF-α、NT-proBNP的水平与NCAL组比较，差异有统计学意义（t=5.25、3.45、5.57，P

2.3 KD患儿血浆MMP-9、TNF-α、NT-proBNP相关性分析

KD组治疗前TNF-α与MMP-9、NT-proBNP水平均成正相关关系（r=0.61、0.72，P

3 讨论

KD现已成为儿童后天获得性心脏病的最主要原因 ，发病机理仍然不清楚，诊断主要依据临床特点而缺乏特异性的实验室指标。在感染等因素的诱发下，遗传易感性个体的免疫系统高度活化，产生大量的细胞因子，启动细胞因子的瀑布式反应，导致血管内皮损伤，在KD发病机制中起重要作用。

MMP-9是降解血管外细胞基质的主要酶类，能够降解胶原酶和弹性蛋白酶，有助于中性粒细胞、单核巨噬细胞细胞等向血管壁深层浸润，参与多种疾病的病理过程。目前国内外学者认为血管基质的代谢紊乱是KD发病机制的重要原因之一，尤其与CAL的发生。国外学者Sakata[4]发现，KD患儿急性期血清MMP-9水平显著增高，并在死亡KD患儿冠状动脉标本中检测到异常增高的MMP-9。我国学者赵建美等[5-6]研究发现，KD急性期MMP-9在外周血单个核细胞中mRNA表达和血清中MMP-9浓度明显增高，酶活性亦增强，CAL较NCAL更显著，且MMP-9/TIMP-1比值与左冠状动脉内径/主动脉瓣环内径比值呈正相关。TNF-α是一种具有广泛生物学活性的调节因子，可以通过诱导免疫细胞粘附分子的表达、促进炎性因子的释放等参与KD血管炎的发生，其拮抗剂―英夫利昔单抗在治疗大剂量丙种球蛋白无反应型KD起到很好的疗效。Lau[7]等认为TNF-α可以上调血管平滑肌细胞内的MMP-9的表达。国内张艳兰等[8-9]对KD小鼠研究发现，TNF-α/NF-ΚB/MMP-9信号通路可能是KD血管炎及CAL发生的重要通路。NT-proBNP是与BNP水平成正相关关系的一种由心室肌细胞合成分泌的内分泌激素，较BNP有较好的血浆稳定性，更加适合作为心功能受损的重要生物学指标。研究发现[10]，NT-proBNP在KD患儿急性期显著增高，并且可以早期预测冠状动脉损害。Qin YJ等[11]对体外培养大鼠心室肌细胞BNP mRNA表达的研究发现，TNF-α能选择性诱发BNP mRNA表达。该研究结果显示，TNF-α可能是KD发病的始动因素，通过一定的信号转导途径促进MMP-9和NT-proBNP分泌，并与KD冠状动脉损伤有一定的关系。

综上所述， MMP-9、TNF-α、NT-proBNP⒂KD血管炎及冠状动脉损害的发生发展，联合检测有助于早期诊断KD和预测心血管系统并发症。

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[11] Qin XJ， Zhang XL， Yu YQ， et al. Cardioprotective affect of erythropoietin on sepsis-induced myocardial injury in rat[J].World J Emerg Med，2013，4（3），215-222.

（收稿日期：2016-11-16）

[作者简介] 杜风华（1969.3-），女，内蒙古通辽人，本科，副主任医师，研究方向：儿内科。