维吾尔药黑种草子中总黄酮分析论文

1仪器与材料

TU－1800型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；电热恒温水浴锅（型号：HH-S4）；电子天平（型号：AB104-N）；芦丁对照品由中国药品生物制品检定所提供，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，甲醇试剂均为分析纯；实验用水为蒸馏水。

维吾尔药黑种草子购于新疆维吾尔民族医院，经新疆医科大学生药学教研室邢文兵鉴定。

2方法与结果

2.1维吾尔药黑种草子黄酮类化合物的提取取维吾尔药黑种草子25g精密称定，置100ml圆底烧瓶中，加入甲醇50ml，回流3h，滤过，提取液置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，待用。

2.2标准曲线的绘制精密称取芦丁对照品100mg,置50ml容量瓶中，加入甲醇70ml，置水浴中微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，得浓度为2.0mg·ml-1的标准溶液。精密量取对照品溶液0.0，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0ml，置10ml量瓶中，分别加水至2.4ml，再分别加5%NaNO2溶液0.4ml，摇匀，放置6min；再加10%Al（NO3）3溶液0.4ml，摇匀，放置6min；再加10%NaOH溶液4.0ml，摇匀，室温放置15min。在500nm波长处测定吸光度，同时以试剂空白作参比。以吸光度为纵坐标，溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线。

2.3测定波长的选择精密吸取3.0ml芦丁,余下部分按“2.3”方法操作，在紫外-可见分光光度计上，波长400～800nm扫描，确定最大吸收波长为500nm。

2.4标准曲线与回归方程结果表明，芦丁标准溶液浓度线性关系良好。得到回归方程：A=0.0109C-0.0003，r=0.9998。

2.5维吾尔药黑种草子总黄酮含量的测定精密量取样品溶液0.5ml，置10ml量瓶中，余下部分按“2.3”项方法操作，在500nm波长处平行测定5次，同以样品空白做参比。根据回归方程，计算总黄酮浓度。根据公式：总黄酮含量（%）=（黄酮化合物质量/样品质量）×100%，得维吾尔药黑种草子总黄酮含量。结果见表1。表1维吾尔药黑种草子总黄酮含量测定结果（略）

2.6精密度实验取一定质量浓度的供试品溶液，按“2.3”项显色，连续测定5次,结果见表2。采用本法测定维吾尔药黑种草子总黄酮含量，精密度良好，其相对标准偏差（RSD）为0.59%。表2精密度实验结果（略）

2.7稳定性实验取对照品溶液及供试品溶液，按“2.3”项显色，于室温分别放置0，15，30，45，60min，测定对照品及供试品溶液吸光度，其RSD分别1.68%，2.92%。表明对照品及供试品溶液在1h内稳定。结果见表3。表3稳定性实验结果（略）

2.8回收率实验精密称取已知量的维吾尔药黑种草子5份，分别精密加芦丁对照品适量，按“2.3”项下方法测定，平均回收率为98.2%，RSD为0.55%。结果见表4。表4回收率实验结果（略）

3讨论

有关维吾尔药黑种子草中总黄酮的含量测定，目前尚未见相关报道。本方法采用甲醇回流提取维吾尔药黑种草子中总黄酮，以NaNO2-Al(NO3)3-NaOH体系为显色剂，利用分光光度法测定总黄酮，操作简便，重复性好，结果准确可靠，为维吾尔药黑种草子的质量控制提供了可行的方法。

【摘要】目的采用比色法测定维吾尔药黑种草子中总黄酮的含量。方法以芦丁作对照品，以亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠体系为显色剂,检测波长为500nm。结果线性范围为0.008～0.040mg·ml-1，平均回收率为98.2%，相对标准偏差(RSD)为0.55%。结论该法为控制维吾尔药黑种草子的内在质量提供了依据。

【关键词】维吾尔药黑种草子；总黄酮；比色法