当归养血口服液制备工艺研究

[摘 要]目的：优选当归养血口服液的水提工艺。方法：以处方中所含有效成分芍药苷含量为评价指标，采用L9（34）正交试验，对影响煮提效果的诸因素（加水量、煎煮时间、煎煮次数）进行了优选，最后确定提取工艺。结果：优选当归养血口服液以加水10倍，煎煮3次，每次时间为60 min提取效果最好。结论：该提取工艺可行，试验结果为确定当归养血口服液的提取工艺提供了实验依据。

[关键词]当归养血口服液 生产工艺

中图分类号：R541.4 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）34-0399-01

当归养血口服液是由当归、川芎、党参、甘草、白芍、黄芪、阿胶等中药组成的口服液制剂，具有调补气血等功能，主治气血两虚之病证。临床上用于久病、病后失调、失血过多及一切慢性消耗性病证，症状见面色萎黄或苍白、浑身无力、头晕心悸、气短懒言、舌淡白、脉象细弱或虚大无力等。该制剂系在古方“八珍丸”加味基础上经剂型改革制成的院内制剂，经多年的临床应用，疗效确切。为了提高该制剂的质量，笔者对当归养血口服液的提取工艺进行了研究。由于当归、川芎、白术等药材均含有挥发油，分别约为0.42%、1%和1.4%，因此，我们先将该部分药材进行水蒸气蒸馏提取挥发油，以免后期工艺中损失，然后将药渣及其他药材（阿胶除外）以水为溶媒进行煎煮，再用乙醇沉淀除取杂质，阿胶以打碎并烊化形式加入滤液中。本文采用正交试验，以处方中所含有效成分芍药苷含量为评价指标，筛选出合理的水提工艺。现将实验结果报告如下。

一、仪器与试药

岛津LC6A高效液相色谱仪；SPD6AV型紫外检测器；超声波清洗仪：华南超声仪器厂； 电子 天平：Precisa 57871（全华 科学 仪器有限公司）；芍药苷对照品（ 中国 药品生物制品检定所）；实验药材（市售，经鉴定符合药典规定）；甲醇为色谱纯；其他试剂均为分析纯。

二、实验方法与结果

1 、 水提工艺的正交试验筛选 选择影响提取效果的主要因素：加水量（A）、提取时间（B）、煎煮次数（C）作为考察对象，以芍药苷含量为评价指标，每个因素确定不同的水平进行试验。

2、 供试品溶液的制备 取处方量的药材（阿胶除外）共9份，按不同条件进行提取，其中的当归、川芎、白术等药材先提取挥发油2 h后，再将药渣与其他药材共同提取。将每组的水提液按工艺制成相应的口服液。精密称取本品2 ml，胃水浴上蒸近干，残渣用适量的稀乙醇溶液并分次转移至50 ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，超声处理30 min，滤过，弃去初滤液，取续滤液10 ml，加在中性氧化铝柱（4 g，200目～300目）上，用稀乙醇25 ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用稀乙醇分次溶解残渣，转移至10 ml容量瓶中并稀释至刻度，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，制得供试品溶液。

3 、 对照品溶液制备 精密称取在五氧化二磷减压干燥器中干燥36 h的芍药苷对照品12.5 mg，置25 ml容量瓶中，加稀乙醇适量，振摇使溶解，并用稀乙醇稀释至刻度，摇匀，超声除去气泡，用稀乙醇补足至刻度，摇匀后作为对照品溶液。

4 、 色谱条件 色谱柱：HypersilC 18柱（4.6 mm*250 mm，5 μm）；流动相：甲醇水（28∶72）；流速：0.8 ml/min；紫外检测波长：λ=230 nm；进样量：20 μl；柱温：25 ℃；理论板数按芍药苷峰 计算 应≤10 000。

5 、 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液0.5 ml、1.0 ml、2.0 ml、3.0 ml、4.0 ml、5.0 ml分别置于10 ml容量瓶中，用稀乙醇稀释至刻度，摇匀；分别精密吸取10 μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，并以芍药苷的进样量（μg/μl）为横坐标，相应的峰面积（A*105）为纵坐标绘制标准曲线，其回归方程为：Y=2.648×106X+5.553×103，相关系数r=0.999 1。结果表明：芍药苷进样量在0.25 μg～2.5 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

6、 回收率试验 精密吸取已知含量的当归养血口服液1.0 ml，准确加入一定量的芍药苷，按2.2项“供试品溶液的制备”方法制成供试品溶液，再按“含量测定方法”依法操作，回收率为98.76%，RSD=1.53%。

7 、 样品中芍药苷含量测定 取对照品溶液（0.05 mg/ml）与供试品溶液，用0.45 μm微孔滤膜滤过后，按上述的色谱条件分别精密进样20 μl，测定峰面积。根据标准曲线换算求得各样品中芍药苷含量，由此确定正交试验的含量测定方法。

8 、结果分析可知，当归养血口服液的水提工艺条件以A3B1C3为佳，即加10倍量水煎煮3次，60 min/次，同时提示，影响水提效果的主要因素是提取次数，其次是加水量，煎煮时间影响最小，为验证直观分析结果，我们对实验数据进行了方差分析，结果提取次数对水提效果的影响具有十分显著性意义，这与直观分析结论也是相同的。

9 、 验证实验 按上述确定的最佳工艺条件进行验证。3份，按最佳工艺条件进行重复性试验，测得芍药苷的含量分别为0.931 2 mg/ml、0.934 7 mg/ml、0.930 6 mg/ml，与正交表中的试验结果比较，认为验证结果较为满意。因此，确认当归养血口服液的水提最佳工艺条件为加10倍量水煎煮3次，60 min/次。

三、讨论

通过对当归养血口服液的水提工艺进行研究，确定了最佳工艺，即先将当归、川芎、白术等药材进行水蒸气蒸馏提取挥发油，然后将药渣及其他药材（阿胶除外）以水为溶媒进行煎煮，加10倍药材量的水煎煮3次，60 min/次，在验证试验中所得芍药苷的含量与正交试验中所得芍药苷的含量基本一致，表明优选出的水提工艺为最佳提取工艺。本品是在古方“八珍汤”的基础上加味改剂型制成的中药制剂，由补气健脾之四君子汤与补血调血的四物汤，再加入黄芪和阿胶配合组成的气血双补方，方中用党参、黄芪、熟地补气血为主药，辅以白术、茯苓益气健脾燥湿；当归、阿胶、白芍养血和营；川芎行气活血，甘草和中益气、调和诸药。药理研究表明本品具有强心、兴奋造血系统、调节子宫机能等作用。

参考文献 ：

[1] 肖辛垣，叶立新，袁学，当归养血口服液的水提工艺的探讨，论文网，2011，07

[2] 叶立新，赖素萍，等.当归养血口服液质量标准的研究[J].中华中医药杂志，2005，20（增刊）：293.

[3] 郑虎占，董泽宏，佘靖.中药 现代 研究与应用[M].北京：杂志学苑出版社，1997：1807.