南葶苈子含量测定研究

【摘 要】目的：探讨中药材含量测定项下，粉碎后过筛比例对含量测定的影响。方法：取不同过筛比例的南葶苈子粉末做含量测定的对比试验。结果：结果显示含量测定误差很大。结论：不同的过筛比例，造成了含量测定结果的不公正、不准确、不科学。因此，必须严格规定取样与过筛的比例，才能真实的反映药材品种的优劣。

【关键词】南葶苈子；粉碎过筛；含量测定

南葶苈子系十字花科植物播娘蒿[Deseurainiasophia（L.）WebbexPrantl]的种子，主要分布于东北、河北、内蒙古、山东、河南、浙江、甘肃等地。具有止咳平喘、消肿利尿、强心之功效，尤其在治疗肺心病方面效果尤为显著[1]，《中国药典》2010版一部规定了葶苈子含量测定的方法[2]，需要粉碎过筛再进行含量测定，而实际操作过程中发现葶苈子含量测定结果还受过筛比例的影响。中药种类不同，粉碎难易程度也不同，葶苈子属于种子类中药，粉碎时易粘连、吸附于粉碎机上，造成有效成分的损失。本文用同一批南葶苈子粉碎后，采用通过不同过筛率的丹参粉末，做含量测定的对比试验，结果显示含量测定误差很大。

1.1 试剂与试药

南葶苈子采购于山东临沂，经鉴别为十字花科植物播娘蒿（Descurainia sophia）Webb ex Prantl的干燥成熟种子，槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷对照品批号：111854-201202（购于中检所）、甲醇为色谱纯、纯化水为本单位制备。

1.2 仪器与试验条件

U3000型高效液相色谱仪， 紫外检测器。色谱柱：C18柱#4.6 mm×250 mm。检测波长：254nm。流动相：乙腈-0.1%醋酸溶液（11：89）。流速：1.0 mL/min。

1.3 试验方法

1.3.1 样品处理

取南葶苈子药材，混匀，分成四份，编号为：1号、2号、3号、4号。每份约50g，将四份样品分别置粉碎机内粉碎，粉碎后过四号筛，反复粉碎，反复过筛，直至1号样品过筛率为55%；2号样品过筛率为75%；3号样品过筛率为90%，4号样品过筛率为100%，备用。

1.3.2 对照品溶液的制备

取槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷对照品适量，精密称定，加30%甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。

1.3.3 线性关系考察

吸取对照品溶液0.5ml于5ml容量瓶中，定容、摇匀，制成含对照品0.09g/L的标准溶液，分别进样1、7、10、20、30μl。记录峰面积，以峰面积（Y）对进样量（ X，μg），进行线性回归分析，得回归方程Y=716.74X-15.78，r=0.9998，线性范围0.090～2.70μg。

1.3.4 精密度试验

精密吸取浓度为20μg /ml的对照品溶液25μl，连续进样6次测定，其峰面积的RSD为0.8%，表明精密度良好。

1.3.5 稳定性试验

精密吸取同一供试品溶液25μl，分别在0、2、4、6、8、10h进行测定，峰面积RSD=0.92%，表明室温条件下供试液在10h内稳定。

1.3.6 重复性试验

取同一批样品5份，按样品含量测定项下依法平行操作，测定每份样品中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷的含量，结果RSD=1.2%。

1.3.7 加样回收率试验

精密称取已知含量的样品5份，各0.25g，分别精密加入对照品0.45mg，按照2010版《中国药典》 项下方法配制供试品溶液，进样10μl，每个样品测定3次，根据峰面积计算平均回收率，结果平均回收率为99.78%，RSD为2.4%。

1.3.8 供试品溶液的制备：

取1号、2号、3号、4号通过四号筛的粉末各约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得（各做平行样1份）。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各25 uL，注入液相色谱仪，测定，即得。结果按干燥品计算，含槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷（C33H40O22）不得少于0.075%。对照和样品图谱见图1、图2。

2 试验结果

本试验采用同一批南葶苈子药材，相同条件下作对比试验，结果显示含量测定结果误差很大。实验数据见表1。

3 结论

不同过筛比例的葶苈子，含量测定结果差异很大，1号、2号已不符合药典标准规定，实际操作过程中不同检验人员使用粉碎机粉碎程度不同，所做的结果误差很大。可能由于不同粉碎程度使葶苈子中有效成分析出也不同，因此建议新版《中国药典》一部，收载中药材含量测定时，应明示粉碎方法和通过筛网的比例，统一检验方法，确保药品检验报告书的严肃性和权威性。