白血病的单克隆抗体靶向治疗的研究

中图分类号：R733.7文献标识码：B文章编号：1005-0515（2011）11-049-02

随着各种不同作用机制的化疗药物联合应用及造血干细胞移植治疗手段的完善,白血病已逐渐成为一种可望治愈的恶性疾病，但仍有许多因素限制着高剂量化疗及造血干细胞移植的临床应用，因此，只杀伤肿瘤细胞而正常细胞不受损害的单克隆靶向治疗一直受到关注，其已成为白血病重要的治疗选择及研究方向。

1 单克隆抗体治疗白血病的机制

1.1 免疫介导的抗白血病作用。

1.2 抑制肿瘤细胞的增殖，诱导肿瘤细胞的分化。

1.3 抗体介导的肿瘤细胞凋亡。

1.4 利用单抗的融合蛋白递送细胞毒药物。

1.5 利用单抗携带放射性同位素。

2 单克隆抗体治疗白血病的临床应用及研究现状

2.1 抗CD20单克隆抗体：CD20在B淋巴细胞恶性增生性疾病的B淋巴细胞上表达。

美罗华是一种高亲和力的人鼠嵌合型抗CD20的单克隆抗体，其对B-CLL有抗肿瘤活性，但早期研究证明，美罗华在CLL的疗效不足20%,为提高美罗华的疗效，目前主要采用如下两种方法:①增加美罗华的治疗剂量：O’Brien 等[1]进行了临床I 期试验，首剂给予375mg/m2,然后剂量从500mg/m2逐渐增至2250 mg/m2，50例CLL患者中ORR为40%，反应率与剂量具有明显的相关性。②联合化疗：多为两种甚至三种无交叉耐药性的药物联合，有报道[2]，氟达拉宾单用（n=178)与合用美罗华（n=104）比较，无进展生存概率分别为0.45及0.67，总生存概率分别为0.81及0.93。但有学者认为美罗华联合氟达拉宾会增加氟达拉宾的毒性[3]。此外,有研究证明美罗华联合化疗可提高ALL的疗效[4],已有相关研究[5]将美罗华用于ALL自体骨髓移植中消除MRD，起到体内净化的作用。还有报道美罗华治疗B-PLL有显著疗效[6]，2例B-PLL单用美罗华治疗4周，都取得CR。

2.2 抗CD33单克隆抗体：85%的AML原始细胞上表达CD33，偶尔也表达在ALL的原始细胞上,正常干细胞无表达。

目前基于抗CD33单抗开发的药物主要分为3类:①未标记:最初为鼠源性的M195，为一无细胞毒性的IgG2a单抗,HuM195是把M195人源化改构而成的 ,与CD33的结合力为M195的4-8倍，但其疗效有限，在Feldman 等[7]的研究中,49 例难治复发的AML用HuM195 治疗,仅2 例血液学CR, 1 例 PR ,总反应率仅为6.12%。然而HuM195对M3尤其是低肿瘤负荷患者疗效较好，将Hum195用于AML-M3的试验，包含27例以全反式维甲酸和/或化疗后CR的患者，25例持续CR，中位CR期29个月。②标记免疫毒素:GO为人源化的CD33单抗与抗癌抗生素卡奇霉素的免疫连接物, 2000年5月获美国FDA批准用于治疗60 岁以上的难治/复发AML。与HuM195相比其疗效明显提高, 单一药物治疗142 例CD33阳性初治的AML,总有效率为30%,CR率为16%。联合用药治疗AML及MDS转向白血病,据报道, GO与氟达拉宾、阿糖孢苷和环孢素合用治疗39例AML和20例MDS RAEB/RAEBT初治病人，中位年龄57岁,CR率46% ,CRp2%，中位生存期8个月[8]。其还可用于治疗分子复发APL，在16例APL病率人中,14 例分子复发转阴,缓解持续时间中位15个月[9]。③标记放射性同位素:CD33 单抗(HuM195)与同位素结合的产物均在Ⅰ、Ⅱ期临床试验阶段,包括213B i、 131I 、90Y等,213B i产生α射线射程很短,可选择性杀伤单个肿瘤细胞以减少非特异性细胞毒作用。治疗AML的剂量为0.28 -1.0 mCi/kg,CR率大于80%[10]。其对难治/复发的AML疗效不明显,更适于低负荷AML治疗及残留病灶的清除。131I- HuM195 产生的β射线射程长,能有效的清除肿瘤细胞,但会引起明显的骨髓抑制,有研究证实131I- HuM195适合于联合马利兰和环磷酰胺(BU/CY)作为异基因BMT 的预处理[11]。90Y-HuM195产生的β射线穿透距离为0.5mm，不伴有r粒子释放，其Ⅰ期临床试验显示其可用于自体干细胞移植及非清髓性异基因干细胞移植预处理方案中。

2.3 抗CD52单克隆抗体：人类CD52抗原表达于所大多数正常和恶性的T、B淋巴细胞，造血干细胞及中性粒细胞上不表达。

抗CD52单克隆抗体临床应用如下:①骨髓移植：1982年Hows和Smith在伦敦的Hammersmith医院进行了第一例应用抗CD52单克隆抗体进行的体外移植物T淋巴细胞清除的骨髓移植病例。②慢性白血病: 抗CD52单抗治疗初治CLL，有效率达87%，CR率为19%。2001年抗CD52单抗(Campath)获FDA批准用于治疗难治复发性B-CLL。据报道72名难治性或复发性CLL患者在用Campth-1H12周后，总有效率达33%,CR率为5%，PR率为28%，97%的患者外周血中CLL细胞被清除[12]。③CD52(+)的PLL、难治或复发T -PLL：针对该类疾病抗CD52单抗的有效率为24%～76%。Dearden等[13]用Campth-1H治疗39例对常规治疗产生耐受的T-PLL，总有效率76% ,CR率高达60%。④其他:如对某些传统化疗效果不好的白血病类型：p53蛋白突变缺失,颗粒淋巴细胞白血病。此外针对急性淋巴细胞白血病也已初步显示较好的前景，Claire等[14]用Campath治疗39例T-ALL, OR率76% ,其中CR率60% , PR率16%。

2.4 抗CD45单克隆抗体：CD45广泛存在于造血系细胞,90%以上的白血病细胞都有表达。

动物实验及Ⅰ/Ⅱ期临床试验结果显示131I 及90Y 结合的CD45 单抗能对骨髓、脾脏及其他白血病累及部位进行清髓性照射,可作为急性白血病骨髓移植的预处理方案的组成部分,25例131I-anti-CD45单抗联合标准BUCY方案对第1次缓解的AML患者进行预处理,90%患者有良好生物分布，在24例CR1的患者中，18例SCT后DFS10-63个月，中位42个月，其中4例死于移植相关并发症，2例复发。而以BUCY作预处理的CR1的AML复发率为30%。此外，99mTc及90Y标记的抗CD45单抗对白血病的放射免疫治疗正在研究中。

2.5 抗CD44单克隆抗体：CD44在正常造血生成和肿瘤发生、发展及转移过程中有重要作用。AML各亚型均表达CD44分子。

目前所获得的抗CD44单克隆抗体是鼠源性的:①H90:Charrad等[15]首次报道在M1～M5亚型的白血病细胞培养基中加入H90能够诱导白血病细胞的终末分化。在M3中它诱导白血病细胞分化的程度与维甲酸一样高,可以诱导约60%的M3患者的白血病细胞达到终末分化。除了M3,抗CD44抗体H90诱导分化效果最好的是M5,可以使M5白血病细胞分化为成熟的单核细胞。②A3D8: 除H90的上述作用外，A3D8可诱导NB4早幼粒细胞系和新鲜采集的M3幼稚细胞凋亡。A3D8同时与全反式维甲酸合用时,能诱导KG1a 细胞向成熟单核细胞分化，此点与H90相同。这是其它已知的白血病细胞分化诱导剂如全反式维甲酸、二甲基亚砜等所做不到的[16]。③HI44a:HI44a能够有效诱导M2 ～M5 新鲜白血病细胞分化及凋亡,抑制白血病细胞系THP－1增殖,诱导其凋亡。白血病原始细胞经HI44a作用后,细胞向成熟阶段分化,标志分化成熟的CD11b、CD14和CD15表达增强。

2.6抗CD22 单克隆抗体:

抗CD22单抗为针对B细胞的鼠源化单抗,初步研究显示其免疫连接物对CLL有一定的疗效,对HCL的效果更为明显。其结合的免疫毒素有:BL-2-假单胞外毒素A连接物; RFB4-dgRTA-蓖麻毒素连接物; CMC-544-抗癌抗生素calicheamicin 连接物。

除以上单抗外，抗23单抗可治疗B-CLL，抗IL-2受体单抗可治疗急性T淋巴细胞性白血病,抗220KD单抗可治疗急性白血病，针对CD14，CD15，CD64、CD66的抗体都被试用于AML的治疗，因未能取得好的疗效而被放弃。此外尚有多个单抗在进行临床前研究或Ⅰ、Ⅱ期临床研究,如抗CD2 、CD3 、CD5及CD38单抗等。

单克隆抗体靶向治疗开辟了白血病的又一治疗新途径，但其仍有不足之处尚待进一步研究:①单抗应用的最佳时机及最佳用药方案。②近期和远期的毒性反应及防御对策。③扩大已有抗体的应用范围。④与传统化疗药物的联合应用。⑤有肯定疗效的鼠源单抗人源化。⑥开发新的单抗及抗体偶联物。通过以上问题的探索与解决从而能更正确、合理地应用单克隆抗体。

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