轮状病毒肠炎细胞因子动态变化与中药干预的研究

[摘要] 目的 探讨轮状病毒肠炎细胞因子的变化与加味葛根芩连汤的干预作用。方法 68例患儿随机分为中药组和西药组，另加健康组作对照。中药组在对症治疗的基础上用加味葛根芩连汤，3次/d口服，西药组用利巴韦林，（10～15）mg/（kg・d）静脉滴注，两组连用5d。结果 治疗前后两组IL-2、IL-10、TNF-α水平及临床疗效比较差异有显著性（P＜0.01）。结论 轮状病毒肠炎与血清细胞因子失衡有关，加味葛根芩连汤能对上述细胞因子进行有效的干预。

[关键词] 轮状病毒肠炎；细胞因子；葛根芩连汤

[中图分类号] R272 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2011）23-151-02

The Research of Changs of Cytokines and Intervention of Traditional Medicine in Rotavirus Enteritis

SHI Xuntong1 HU Guohua2 WANG Youcheng3

1.Cixi Maternal and Child Care Center, Zhejiang Province, Cixi 315300, China; 2.Medicial College, Jinhua Polytechnic, Zhejiang Province，Jinhua 321000, China; 3. Jinhua People’s Hospital, Zhejiang Province, Jinhua 321000, China

[Abstract] Objective To discuss the changs of cytokines and the intervention of gegen qinlian decoction in rotavirus enteritis. Methods Children with rotavirus enteritis were randomly divided into traditional medicine group and western medicine group. On the other hand, a group of health children were selected as control. The traditional medicine group was given gegen qinlian decoction three times a day on the basis of semeiologically treats, and the western medicine group was given ribavirin （10-15）mg/（kg・d）, intravenous drip. Both were given for five days. Results IL-2, IL-10 and TNF-α levels of two groups were significant different before and after treatment （P＜0.01）. Conclusion The unbalance of serum cytokines is responsible for rotavirus enteritis, and gegen qinlian decoction can effectively interfere these cytokines.

[Key words] Rotavirus enteritis; Cytokines; Gegen qinlian decoction

目前我国婴幼儿感染性腹泻的主要致病原是轮状病毒，但是轮状病毒肠炎的发病及免疫机制还不完全清楚，疗效并不满意。白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-10（IL-10）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）是体内重要的免疫调节因子和促炎症介质。我们在用加味葛根芩连汤进行临床干预的同时，用ELISA法对68例轮状病毒肠炎患儿血清细胞因子IL-2、IL-10和TNF-α的水平进行治疗前后的检测，旨在探讨轮状病毒肠炎细胞因子动态变化以及细胞因子在发病机制中的作用和葛根芩连汤干预的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

68例患儿均于本院2009年11月～2010年3月经PCR方法检测大便轮状病毒（+）、细菌培养（-），确诊为轮状病毒肠炎，其中男44例，女24例；年龄2～36个月，平均（18.0±9.3）个月。所有肠炎患儿营养状况良好，既往健康，未使用过免疫抑制剂。随机分为中药组35例和西药组33例。同时选择健康体检婴幼儿30例作为对照组。三组患儿性别、年龄、体重等比较，差异无显著性（P＞0.05）。

1.2 治疗方法

中西药两组在对症治疗（口服ORS补液或根据血清电解质及血气分析的结果，纠正酸碱失衡及电解质紊乱等）的基础上中药组用加味葛根芩连汤（中药煎剂）：方剂由葛根15～20g、炙甘草6g、黄芩碳6～9g、黄连3～6g、白术6～9g、焦三仙各10g组成。～1岁10mL/次，～2岁20mL/次，～3岁30mL/次，tid，口服。西药组用利巴韦林注射液（北京双鹤药业股份有限公司生产，国药准字H11020969）（10～15）mg/kg，分2次静脉滴注，两组连用5d，同时于治疗前后分别清晨空腹采静脉血2mL，置－20℃冰箱保存，采用ELISA法检测两组血清IL-2、IL-10、TNF-α水平及评价临床疗效。

1.3 检测方法

所有患儿于治疗前后分别空腹清晨采静脉血2mL，离心取血清置-20℃冰箱保存，用双抗体夹心ELISA法检测细胞因子的水平。试剂盒由深圳晶美公司提供，仪器为澳大利亚产MumkanEX酶标仪，操作时严格按照各试剂盒说明书进行检测。

1.4 疗效标准

按照1998年全国腹泻病防治学术研讨会组委会关于腹泻病疗效判断标准的补充建议[1]，显效：治疗72h时粪便次数及性状恢复正常，大便成形，全身症状消失；有效：治疗72h时大便次数及性状明显好转，大便次数减少，大便转稠，全身状况明显改善；无效：治疗72h时大便次数及性状、全身状况均无好转甚至恶化。

1.5 统计学方法

采用SPSS16.0统计软件包进行处理，动态变化以数表示，阳性率比较采用χ2检验，各细胞因子与临床指标采用直线相关分析；药物疗效的组间比较采用方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗前后血清细胞因子的变化

治疗前中西药组血清IL-2与健康组比均显著降低（P＜0.01），而IL-10、TNF-α水平与健康组比均显著升高（P＜0.01）；治疗后中药组IL-10、TNF-α水平明显低于西药组，IL-2明显高于西药组，两组比较有显著性差异（P＜0.01）。见表1。

2.2 两组临床疗效比较

显效率：中药组65.71%，与西药组36.36%相比，P＜0.01；总有效率：中药组100.00%，与西药组78.79%相比，P＜0.01；差异均有统计学意义。见表2。

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2.3 不良反应

西药组4例恶心、呕吐，4例红细胞、白细胞及血红蛋白轻度下降，停药后消失，中药组未见不良反应。

3 讨论

轮状病毒肠炎目前仍占我国婴幼儿感染性腹泻首要位置，急性腹泻患儿中11%～71%（平均33%）由RV引起[2]，严重威胁着婴幼儿的健康和生命。其病毒主要侵犯小肠黏膜上皮细胞，使绒毛萎缩、变短、黏膜固有层单核细胞浸润。

IL-10由B淋巴细胞、T淋巴细胞及肥大细胞产生，主要作用是促进肥大细胞和T淋巴细胞增殖，并抑制T淋巴细胞产生干扰素。以介导细胞免疫应答为主的Th1细胞主要分泌IL-2、IFN-γ等细胞因子，其中IL-2主要由活化的淋巴细胞产生，是调节机体免疫功能最主要的淋巴因子之一[3]。IL-2能激活多种免疫细胞，诱导淋巴细胞的增生与免疫效应，促进B细胞的免疫应答以及NK细胞、单核巨噬细胞的增生[4]。TNF-α是由激活的单核巨噬细胞产生，充当炎症介质，能介导内毒素的多种生物学作用参与体内炎症反应和组织损伤。轮状病毒肠炎时病毒的毒素激活吞噬细胞等炎症细胞，释放炎症介质和细胞毒素，导致肿瘤坏死因子表达水平增高。同时TNF-α可通过其免疫调节作用促进炎症时的免疫反应和具有抗病毒作用，TNF-α分泌适量时可发挥免疫调节作用，分泌过多时可致机体损伤[5，6]。

中医将轮状病毒肠炎归属于湿热泄范畴。治拟化湿和中，清热解毒主之。加味葛根芩连汤中黄芩、黄连清热解毒；葛根生津止渴、解肌退热、升阳止泻；白术健脾除湿；甘草补牌益气。现代药理学研究认为：黄芩具有抗炎、抗变态反应、抗病毒等广泛的药理活性作用。黄连体外试验对多种病毒、细菌和真菌有抑制作用。葛根有改善微循环，对沙门菌所致家兔发热有明显解热作用。白术能增强网状内皮系统的吞噬功能，促进细胞免疫。甘草具有肾上腺皮质激素样抗炎作用[7]。临床药学研究表明，葛根芩连汤能直接杀灭轮状病毒，明显抑制肠道常见致病菌，并能保护胃肠黏膜，有益于消化吸收功能的恢复，提高机体免疫力，达到迅速止泻的目的[8]。

我们的研究显示葛根芩连汤治疗前中、西药组血清IL-2与健康组比均显著降低（P＜0.01）；而IL-10、TNF-α水平与健康组比显著升高（P＜0.01），治疗后中药组IL-10、TNF-α水平明显低于西药组，而IL-2明显高于西药组，两组比较有显著性差异（P＜0.01）。表明葛根芩连汤可能有促进Th1细胞活化，参与轮状病毒肠炎Th1/Th2细胞失衡的免疫应答与调节。

我们的研究表明，葛根芩连治疗汤轮状病毒肠炎的临床显效率65.71%与西药组36.36%相比具有统计学意义（P＜0.01）；总有效率中药组100.00%与西药组78.79%相比，差异有显著性（P＜0.01）。葛根芩连汤能够增强轮状病毒肠炎的免疫功能，控制炎性反应，抑制病毒，改善肠道微生态内环境和改善肠道微循环，促进消化，缩短病程、提高治愈率等，且无明显不良反应。由于我们的样本资料较少，尚待以后进一步积累资料与研究。

[参考文献]

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[3] Azevedo MS，Yuan L，Pouly S，et al. Cytokine responses in gnotobiotic pigs after infection with virulent or attenuated human rotavirus[J]. J Virol，2006，80（1）：372-382.

[4] Kim JW，Ferris RL，Whiteside TL. Chemokine C receptor 7 expression and protection of circulating CD8+ T lymphocytes from apoptosis[J]. Clin Cancer Res，2005，11（21）：7901-7910.

[5] 安群星，刘利兵，贾宏，等. 内毒素血症大鼠心肌组织中TNF-α及HMG-1基因的表达[J]. 第四军医大学学报，2003，24（10）：903-904.

[6] 高志华. 轮状病毒肠炎患儿血清肿瘤坏死因子-α的表达水平及意义[J]. 中国优生与遗传杂志，2006，14（10）：14，31.

[7] 孙丽霞，唐国津，于秀卿. 婴幼儿轮状病毒肠炎治疗新进展[J]. 医学文选，2005，24（5）：831-833.

[8] 韦汉才. 葛根芩连汤加味治疗小儿轮状病毒肠炎疗效观察[J]. 中国实用医药，2010，5（5）：133.

（收稿日期：2011-06-01）

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